Для отбора средств, положительно влияющих на эритропоэз, используют методы экспериментальной терапии анемий и исследование баланса железа в организме. В эксперименте наиболее широко применяют модели анемий, вызываемых уксуснокислым свинцом (Gerlich, 1950) и некоторыми гемолитическими ядами, в частности производными фенилгидразина (Я. Я. Соколовская, 1948). Для скриннинга могут быть использованы также анемии, возникающие при рентгеновском облучении, резекции желудка и некоторых других воздействиях. Подробное описание методов воспроизведения анемии, и лейкопении можно найти в обзоре К. А. Мещерской (1954).
Стимуляторы эритропоэза. Влияние на содержание гемоглобина в крови. На щенятах 14-15-дневного возраста воспроизводят анемию путем повторных кровопусканий (3 дня подряд с потерей крови в объеме 2-2,5% по отношению к весу тела) с последующим введением плазмозамещающего раствора. Щенят кормят только молоком материнским или коровьим. На 5-й день гемоглобин и количество эритроцитов снижаются до 40% исходных величин, и при молочной диете их восстановление происходит весьма медленно. При введении исследуемых препаратов учитывают содержание гемоглобина, количество эритроцитов и ретикулоцитов и содержание железа в сыворотке.
Полученные данные сопоставляют с результатами наблюдений на контрольной группе животных.
Учет баланса железа. Исследуют разность между количеством введенного железа и величиной его экскреции с мочой и через кишечник.
Наибольший интерес в этом плане представляет использование радиоактивного железа (Hahn е. а., 1939) в связи с простотой обнаружения его локализации в организме и экскретах.
Скриннинг веществ, влияющих на гемопоэз, в частности витамина B12, весьма специфичен и связан с использованием микробиологических методик. Техника этих методов оценки содержания витамина В12 и фолиевой кислоты довольно детально описана Brodsky (1964), однако их применение уже выходит за рамки первичного отбора препаратов этого типа действия.
Стимуляторы лейкопоэза. Изучение активности стимуляторов лейкопоэза основано, главным образом, на оценке их действия при лечении экспериментальных лейкопений. Наиболее удобными моделями для изучения стимулирующего действия на лейкопоэз являются лейкопении, вызываемые отравлением бензолом и лучами Рентгена.
Лучевая лейкопения у кроликов воспроизводится облучением рентгеновыми лучами участков брюшной стенки (10×15 см) при напряжении 180 кВ, силе тока 15 мА с фильтрами из 0,5 мм меди и 3,5 мм алюминия. Общая доза 300 R. Производят обычно три сеанса облучения с интервалами в 1-2 дня. Количество лейкоцитов при этом снижается в 4-5 раз, лейкопения держится до 40 дней (К. А. Мещерская, 1954). Стимулирующий эффект исследуемых веществ оценивают по сравнению с данными контрольной группы опытов.
Агранулоцитоз воспроизводят наиболее быстро на кроликах при подостром отравлении бензолом. Бензол вводят подкожно в дозе 1 мл/кг ежедневно в течение 6-7 дней. Используют кроликов весом 1,5-2,5 кг. Старые и жирные кролики могут погибнуть до наступления заметных изменений со стороны крови. У 90% кроликов через 7-8 дней количество гранулоцитов снижается в среднем в 10 раз по сравнению с исходными данными. Приблизительно у 10% кроликов в ответ на введение бензола повышается количество лейкоцитов в крови. Исследуют влияние препаратов на лейкопоэз в сравнении с динамикой агранулоцитоза у контрольной группы животных. Помимо указанных способов воспроизведения экспериментальной лейкопении можно использовать метилтиоурацил, эмбихин, амидопирин, сульфаниламиды и некоторые другие химические агенты. Однако эти формы лейкопений менее стабильны и сопровождаются значительными побочными эффектами. По данным М. В. Кораблева (1960), определенный интерес для воспроизведения лейкопений может представлять интоксикация тетратионом (тетраметилтиурамдисульфидом).
Противолейкозные средства
Изыскание противолейкозных средств базируется главным образом на данных экспериментальной терапии спонтанных лейкозов у определенных линий белых мышей (Н. П. Вощанова, 1950) или перевивки лейкозов, а также на данных наблюдений, проводимых на культурах тканей.
Эти приемы исследования тесно связаны с методами оценки эффекта цитостатиков, которые обстоятельно представлены в ряде капитальных обзоров и монографий, посвященных экспериментальной терапии злокачественных новообразований (Л. М. Шабад, 1954; В. А. Чернов, 1964; Skipper е. а., 1962).
В связи с тем, что скриннинг противоопухолевых средств весьма специфичен и детально изложен в перечисленных выше работах, описание методов опенки противолейкозной активности в рамках настоящей работы не представляется целесообразным.
