Сосудорасширяющие средства

 

Изыскание сосудорасширяющих средств представляет весьма сложный и трудоемкий процесс, ибо он включает первичное исследование адренонегативных средств, ганглиоблокаторов, седативных средств и веществ, влияющих непосредственно на гладкие мышцы сосудов. Описываемые ниже методики используют для выявления активности главным образом последней группы средств.

По фармакотерапевтическому принципу сосудорасширяющие средства делятся на две группы: гипотензивные и средства, применяемые при регионарных сосудистых спазмах, из которых наиболее важными являются коронарорасширяющие вещества.

Сосуды изолированного уха кролика позволяют изучить непосредственное миотропное действие препарата. Необходимые концентрации вещества готовят на перфузионной жидкости. Для количественной оценки эффекта проводят 8-12 перфузии раствором исследуемого вещества. С целью сравнения интенсивности действия изучаемых веществ в качестве эталона может быть использован папаверина гидрохлорид в концентрации 10^-5.

Полоска аорты является довольно чувствительным объектом, для изучения возможного действия на мышцы сосудов. Методика работы на этом препарате изложена в разделе, посвященном скриннингу сердечных гликозидов. Оценка активности препарата может быть выражена в процентах эффекта папаверина в концентрации 10^-5.

Перфузируемый изолированный отрезок мелких артерий может быть также использован для оценки влияния исследуемых веществ на перифе­рический тонус сосудов (Carrier е. а., 1965). Общая схема экспериментальной установки представлена на рис. 17. Для правильной оценки объемной скорости оттока перфузата важно предварительно установить максимальную пропускную способность канюль при используемом в эксперименте давлении. Для сопоставления активности исследуемых веществ в качестве стандарта может быть использован папаверин в разведении 10^-5.

Влияние на артериальное давление в остром опыте. Собак или кошек наркотизируют этаминалом-натрия. Регистрируют давление в сонной арте­рии. Исследуемые вещества вводят в бедренную вену. Изучают интенсивность и продолжительность снижения артериального давления. Получаемый эффект выражают в процентах от исходного уровня и сопоставляют с дей-

Рис. 17. Схема установки для работы на изолированном отрезке

артерии (Carrier е. а., 1965):

1 – отвод для регистрирующего устройства; 2 – перфузат; 3 – трехходовой кран; 4 – гуттометр.

 

ствием папаверина (собаке вводят внутривенно 50 мг/кг или кошке 1 мг/кг).

Регионарная ангиорезистография. Для оценки влияния фармакологических препаратов на тонус сосудов в настоящее время широко используют ме­тодику определения сопротивления различных регионарных сосудов. Для этого через артериальную канюлю в сосуд подают такой постоянный объем крови, который создает характерное для этой сосудистой зоны внутриартериальное давление (рис. 18). Естественно, что при дилатации сосудов это давление падает. Внутрисосудистое давление служит показателем тонуса сосудов этой области и его изменения используют для оценки влияния исследуемых веществ на сопротивление сосудов. Представляется целесообразным сопоставление эффекта исследуемых веществ с действием папаверина.

Рис. 18. Схема установки для резистографии (М. В. Хаюгин, 1963).

1, 2 – соединительные трубки; 3 – электромагнитные клапаны; 4 – эластиче­ский колпачок; 5 – камера «головки» насоса; 6 – жесткий гидропривод; 7 – цилиндр; 8 – плунжер; S – регулятор и шкала расхода; 10 – контактный диск;11 – контакты, включающие клапаны; 12 – эксцентрик, вращаемый мотором.

 

Исследование изменений артериального давления в хроническом опыте на собаках и кроликах. Удобной формой оценки гипотензивного действия препаратов являются эксперименты на животных с выведенной в кожный лоскут сонной артерией (Van Leersum, 1911). Трижды измеряют максимальное и минимальное давление на протяжении 15 мин в исходном состоянии и через 5, 15, 30 и 60 мин после введения препарата. Каждую дозу вещества исследуют в 8-12 наблюдениях. Вычисляют средние величины. Определяют интенсивность и продолжительность действия, а также время развития максимального эффекта. Результаты наблюдений обрабатывают статистически с вычислением средних величин и достоверности их различий по сравнению с исходными данными.

Оценка эффекта на животных с экспериментальной гипертонией. Гипотензивное действие может быть связано с особенностями реактивности сосудов в условиях длительного повышения их тонуса. С этой точки зрения выявление сосудорасширяющего действия при экспериментальных гипертензиях представляется весьма существенным звеном фармакологического исследования новых препаратов.

Обзор методов воспроизведения экспериментальных гипертоний и методика фармакологического эксперимента в этих условиях достаточно полно представлены В. Н. Ментовой (1954). Следует, однако, заметить, что эти ис­следования довольно сложны и трудоемки и. поэтому могут быть использованы лишь на заключительных этапах изучения гипотензивных средств.

Коронарорасширяющие средства. Венечные сосуды изолированного сердца. Используют изолированные сердца кроликов или кошек, приготовленные но общепринятой методике. Исследование проводят либо на остановленных строфантином (1:25 000) сердцах, либо на работающем сердце. В последнем случае на отток перфузата в значительной мере влияют изменения деятельности сердца (Я. И. Хаджай и др., 1962). Используемый для остановки сердца строфантин пропускают течение 20-30 мин (остановка обычно наступает через 5 мин), а затем производят отмывание нормальной пита­тельной жидкостью в течение 30-60 мин. Реактивность сосудов при этом сохраняется (Н. П. Кравков, 1914). Недостатком методики является влияние на результаты опытов остаточного эффекта строфантина.

 

 

Рис. 19. Схема экспериментальной установки для регистрации кол­латерального притока перфузата в систему передней нисходящей ветви левой коронарной артерии:

 

1 – полиэтиленовая канюля; 2 – устройство для регистрации общего коронарного оттока; 3 – пластинка, закрывающая выпускное отверстие измерительной трубки; 4 – электромагнит, включающийся в течение 15 секунд с интервалом в 15 секунд; 5 – прерыватель; 6 – туттометр.

 

Ретроградный коронарный кровоток. Для исследования действия веществ на интеркоронарные анастомозы используют регистрацию ретроградного оттока из канюлированной в верхней трети нисходящей ветви левой венечной артерии изолированного сердца кошки (В. В. Гацура, Л. A. Бандурина, 1964).

Эксперимент начинают через 30 мин после перевязки нисходящей ветви, с помощью гуттографа и расходомера регистрируют коллатеральный приток и общий отток перфузата (рис. 19). Проводят статистическую обработку результатов.

 

Регистрация венозного оттока из венечного синуса осуществляется при катетеризации последнего у кошек или собак. Для регистрации оттока крови могут быть использованы различные конструкции расходомеров (Л. Г. Боровских, 1966).

 

 

Рис. 20. Схема установки для регистрации ретроградного кровотока и давления в периферическом отрезке передней нисходящей ветви левой коронарной артерии.

 

1 – датчик фотогуттометра; 2 – полиэтиленовая канюля; 3 – эластический манометр; 4 – электромагнитные отметчики (сверху вниз — отметчик, регистрирующий ретроградный отток в каплях, отметчик введения препарата, отметчик времени); 5 – ртутный манометр для регистрации системного артериального давления; 6 – манометр для регистрации ретроградного давления в периферическом отрезке передней нисходящей ветви.

 

Методика катетеризации состоит из следующих этапов: 1) наложение на ушко правого предсердия кисетного шва вокруг предполагаемого места введения катетера; 2) разрез стенки ушка и введение полиэтиленового катетера в венечный синус под визуальным контролем (катетер заполняется раствором гепарина); 3) наложение лигатуры, фиксирующей катетер в синусе, и подключение его к регистрирующей системе (кровь после измерения вводится в бедренную или яремную вену).

Одновременно регистрируют артериальное давление и ЭКГ для оценки роли общих функциональных сдвигов сердечно-сосудистой системы в изменениях венечного кровотока. Подробное описание этой методики дано Morаwitz с соавторами (1912), Н. В. Кавериной (1964) и др.

Резистография венечных сосудов. Для анализа действия на сосуды исследуемых веществ изучают динамику сопротивления венечных сосудов при подаче в артерии крови под постоянным давлением. Стабилизация давления крови достигается путем применения различных аппаратов искусственного регионарного кровообращения. Динамику объемного кровотока используют для оценки действия исследуемого вещества на просвет венечных сосудов. Методика и теоретическое обоснование резистографии детально освещены в работах М. В. Хаютина (1964) и др.

Регистрация коллатерального коронарного кровотока в условиях острого опыта позволяет осуществлять прямую оценку влияний на кровоснабжение ишемизированных зон миокарда. Опыты проводят на собаках со вскрытой грудной клеткой. Канюлируют дистальный отрезок перевязанной нисходящей ветви (рис. 20) и регистрируют коллатеральный приток крови в зону ишемии и ретроградное артериальное давление (В. В. Гацура,1966, 1969).

Одновременная регистрация артериального давления, эпикардиальной электрокардиограммы и определение насыщения кислородом тканей в зоне ишемии открывают возможности для изучения некоторых сторон механизма действия веществ на коллатеральное кровообращение.

Полярографию используют для оценки действия исследуемых веществ на кислородный баланс в зоне ишемии миокарда. Предпочтительнее одновременная регистрация насыщения кислородом тканей в фокусе ишемии, пограничных зонах и интактном миокарде. Применение этой методики показало повышение уровня напряжения кислорода в центральной и пограничной зонах ишемии миокарда под влиянием небольших доз папаверина, эуфиллина и некоторых других коронарорасширяющих препаратов (А. В. Сапожков, 1968). Методика полярографического исследования кислородного баланса в миокарде изложена в работах И. М. Эпштейна (I960)., Н. В. Саноцкой (1963) и других, техника ее проста и она, несомненно, перспективна как один из тонких современных приемов фармакологического скриннинга.

Для понимания специфики действия коронародилататоров большой интерес представляет экспериментальный анализ механизма действия коронарорасширяющих средств, так как регуляция тонуса коронарных сосудов чрезвычайно сложна. Для изучения роли гемодинамических факторов проводят исследования коронарного кровотока при: 1) стабилизации системного артериального давления; 2) постоянном давлении перфузируемой крови; 3) стабилизации ритма сердечных сокращений; 4) предварительной атропинизации и фармакологической десимпатизации.

Проведение указанных аналитических приемов позволяет в определенной степени дифференцировать собственно сосудистое действие препарата от вторичных гемодинамических влияний на общее и коллатеральное коронар­ное кровообращение.