Противоаритмические средства

Оценку противоаритмической активности исследуемых веществ проводят, с одной стороны, по данным изучения сдвигов таких показателей возбудимости сердца, как его лабильность и величина порогового раздражения, вызывающего экстрасистолу, с другой стороны, определяют эффективность препаратов при фармакотерапии эксиериментальных аритмий. Исследование физиологических параметров возбудимости миокарда может представлять большой интерес и для изучения возможного патологического влияния исследуемых препаратов на ритмическую деятельность сердца. Библиография, касающаяся этого вопроса, представлена в ряде обзоров, посвященных проблеме изыскания противоаритмических средств (В. В. Гацура, 1965 и др.)

Порог возбудимости сердца лягушки in situ. Описываемая методика представляется простым и довольно точным тестом обнаружения отрицательно батмотропной активности веществ. Обычным способом готовят препарат сердца лягушки (центральная нервная система не разрушается). С помощью мобильного платинового эпикардиального электрода и игольчатого электрода, введенного подкожно в правую переднюю лапу, регистрируется ЭКГ с высоким вольтажем зубца R. Зубец R используется для запуска фазирующего устройства, включающего стимулятор в определенную фазу сердечного цикла (обычно в области нисходящей части зубца Т). Для раздражения используют электрод из серфина, к которому припаивают эластичный проводник, и миниатюрный игольчатый электрод, вводимый субэпикардиально в область основания желудочка (рис. 15). Вольтаж стимула постепенно повышается (от 0,5 до 30 В) до возникновения экстрасистолического комплекса, регистрируемого механографически на ленте кимографа и отмечаемого при визуальном наблюдении на экране осциллографа. Исследуемые вещества вводят подкожно. Пороговый вольтаж определяют трижды в исходном состоянии и через 15, 30, 45 и 60 мин после введения препаратов. Результаты наблюдения обрабатывают статистически. Анализ кимограмм позволяет также оценивать действие исследуемых веществ на амплитуду и частоту сердечных сокращений (Т. А. Бутцева, 1966).

Влияние на лабильность предсердия изолированного сердца кошки. Препарат изолированного сердца кошки готовят общепринятым способом. Ушко правого предсердия соединяют с легким регистрирующим рычагом для записи сокращений на кимографе. Активный платиновый электрод накладывают на ушко предсердия, пассивный вводят через стенку резиновой трубки в перфузат. Электроды соединяют со стимулятором (рис. 16). Предваритель-

но определяют пороговое раздражение и затем используют его удвоенную величину. Параметры стимулов: напряжение тока — 6-8 В, длительность — 5-10 мс. Путем постепенного увеличения частоты импульсов определяют уровень лабильности до перфузии раствором исследуемого вещества и через 10 мин после воздействия. Проводится 8-10 экспериментов с каждой концентрацией исследуемого препарата. Вычисляют средние величины лабильности и достоверность их различий с исходными данными. Одновременно можно измерять отток перфузата и учитывать характер влияния препарата на тонус венечных сосудов (В. В. Гацура и др., 1962). Аналогичным образом могут быть использованы изолированные предсердия, помещаемые в ванночку для работы с изолированными органами.

Аритмия, вызываемая электрической стимуляцией в сочетании с воздействием ацетилхолином и дефицитом калия. Предсердия кролика помещают в модифицированный раствор Рингера при 30-31°: натрия хлорида 9 г, калия хлорида 0,4 г, кальция хлорида 0,24 г, натрия бикарбоната 0,5 г, глюкозы 2 г и дистиллированной воды до 1 л (Holland, Born, 1957). Предсердия стимулируют прямоугольными импульсами (75 мсек, 6-10 В). Механическая запись производится на кимографе. Фибрилляция, трепетание или их сочетание возникают, когда стимуляция достигает более чем 1200 имп/мин, при концентрации ацетилхолина 3 10^-4 мкг/мл и уменьшении концентрации калия до 0,05-0,1 г/л (путем замены на раствор Рингера с дефицитом калия). Электрическую стимуляцию используют лишь для вызывания аритмии, которая продолжается до смены раствора на нормальный. Исследуемое вещество в определенной концентрации добавляют в ванночку на третьей минуте аритмии. Если препарат не влияет на аритмию предсердий в течение 8-10 минут, производят смену раствора на питательную жидкость обычного состава. Учитывают степень защитного действия исследуемого препарата и влияние его на интенсивность аритмии. Хинидин, вызывающий устранение фибрилляции через 0,1±1,3 мин при воздействии в концентрации 2 10^-5, может быть использован в качестве стандарта для сравнения противоаритмической активности испытуемых соединений.

«Аконитиновая» аритмия воспроизводится на изолированном предсердии кролика путем аппликации диска фильтрующей бумаги (2 мм в диаметре), смоченной 2,5% раствором аконитина, на верхушку ушка левого предсердия (McLeod е. а., 1962). Для предупреждения смывания аконитина ушко выводят над уровнем жидкости в ванночке и подсушивают перед наложением диска. Диск с аконитином накладывают на ушко в течение 1  мин, затем после удаления аконитина ушко погружают в питательный раствор. Электрокардиограмма записывается с помощью электродов, закрепленных на ушке предсердия. Левое ушко предсердия соединяют нитью с легким регистрирующим рычагом. Эксперимент состоит из трех этапов: 1) наблюдение в течение часа за эффектом аконитина (в первые 5 мин каждую минуту, а затем каждые 5 или 10 мин) с регистрацией ЭКГ; 2) через 10 мин после наложения аконитина в ванночку добавляют исследуемое вещество и записывают ЭКГ в последовательности, указанной выше, в течение 30 мин; 3) на предсердия воздействуют исследуемым веществом до наложения аконитина для изучения его профилактического противоаритмического действия.

Желудочковая аритмия, вызываемая кальцием. Белых крыс весом 60-130 г наркотизируют путем внутрибрюшинного введения этаминала нат­рия (60 мг/кг в 0,6% растворе). Мерцание желудочков и фибрилляцию вызывают введением в бедренную вену 2 мл/кг 10% водного раствора кальция хлорида (Malinow е. а., 1955). Во время этой инъекции и 2 мин спустя изу­чают сердечный ритм (с помощью кардиоскопа), и поведение животных. Результаты наблюдения оценивают следующим образом: I — изолированные вентрикулярные систолы; II — частые желудочковые экстрасистолы; III — кратковременная фибрилляция или трепетание желудочков; IV — длительная непрерывная желудочковая фибрилляция или мерцание. Контрольную и опытную группы формируют из животных, дающих реакцию III или IV сте­пени интенсивности. Исследуемые вещества обычно назначают за две минуты до введения кальция хлорида. Следует иметь в виду, что аритмию, вызываемую хлоридом кальция, помимо противоаритмических средств элек­тивного действия, можно также предупреждать противогистаминными, симпатолитическими и ганглиоблокирующими средствами.

Аритмии, вызываемые перевязкой коронарной артерии. Эксперименты проводят на собаках, наркотизируемых этаминалом-натрия. Переднюю нисходящую ветвь левой коронарной артерии перевязывают на уровне нижнего края ушка левого предсердия или на границе между верхней и средней ее третями. До операции собак предварительно адаптируют к станку для стояния и процедуре съемки электрокардиограммы.

Как правило, на протяжении пяти первых дней после перевязки нисходящей ветви наблюдают стойкие расстройства ритма в форме желудочковой экстрасистолии различной интенсивности (В. В. Гацура, 1957). При про­ведении эксперимента электрокардиограмму записывают до введения исследуемого вещества и затем через 10, 20, 30 и 60 мин после его инъекции. Визуальное наблюдение проводят постоянно с помощью злектрокардиоскопа. Отмечают изменения в интенсивности экстрасистолии и характере экстрасистол (переход полиморфной экстрасистолии в мономорфную и т. д.).

Влияние препаратов на интенсивность экстрасистолии оценивают в процентах от ее частоты в исходном состоянии. Результаты экспериментальной фармакотерапии представляют наибольший интерес для оценки возможности применения исследуемых веществ в клинической практике.