Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


ћетоды анализа сырь€, содержащего сапонины




 

Ќаличие сапонинов в лекарственном растительном сырье можно установить при помощи качественных реакций, которые провод€т непосредственно с сырьем или с извлечением из него.

 ачественные реакции на сапонины основаны на их физических, химических и биологических свойствах. ƒл€ проведени€ качественных реакций готов€т водный настой 1:10 при нагревании на вод€ной бане. ѕосле охлаждени€ настой фильтруют.

–еакции, основанные на физических свойствах.

ƒл€ проведени€ реакции на пенообразование берут две пробирки, в одну добавл€ют 5 мл 0,1 моль/л HCl, в другую добавл€ют 5 мл 0,1 моль/л NaOH и сильно встр€хивают. ≈сли образуетс€ стойка€ пена в обеих пробирках или в пробирке с кислотой Ц это говорит о кислых тритерпеновых сапонинах.

—тероидные сапонины дают дают обильную, стойкую пену в щелочной среде.

’имические методы.

ќтнос€тс€ реакции осаждени€ сапонинов и цветные реакции.

1.»з водных растворов сапонины осаждаютс€ гидроксидами бари€ и магни€, сол€ми меди, ацетатом свинца. ѕричем тритерпеновые Ц осаждаютс€ средним ацетатом свинца, а стероидные Ц основным.

2. »з спиртовых извлечений (или растворов) стероидные сапонины и тритерпеновые сапонины выпадают в осадок при добавлении 1% спиртового раствора холестерина в виде холестеридов.

3. —тероидные сапонины, так же как и сердечные гликозиды, дают реакцию Ћибермана-Ѕухарда с уксусным ангидридом и кислотой концентрированной серной Ц образуетс€ быстро переход€ща€ окраска от розовой до зеленой и синей.

4. –еакци€ —анье - стероидные сапонины от тритерпеновых можно отличить по реакции с 1% раствором сурьмы треххлористой, концентрированной серной кислотой, содержащей уксусный ангидрид, если образуетс€ желтое окрашивание.

”читыва€, что многие из перечисленных химических реакций могут давать и другие соединени€, провод€т еще и биологические испытани€.

Ќа биологических свойствах сапонинов основана реакци€ гемолиза с 2 % взвесью эритроцитов в изотоническом растворе.  ровь становитс€ прозрачной, €рко-красной. ƒл€ проведени€ этой реакции из растительного сырь€ готов€т настой на изотоническом растворе.

√осударственна€ фармакопе€ XI издани€ (вып.2) рекомендует использо≠вать качественные реакции дл€ подтверждени€ подлинности дл€ трех видов сырь€.

1.  орневища с корн€ми синюхи голубой. — водным извлечением проводитс€ реакци€ пенообразовани€, основанна€ на способности сапонинов снижать поверхностное нат€жение жидкости (воды) и давать в отваре стойкую и обильную пену после встр€хивани€.

2.  орни аралии маньчжурской. ћетанольное извлечение хроматографируют в тонком закрепленном слое силикагел€ (на пластинках Ђ—илуфолї) в системе растворителей хлороформ-метанол-вода (61:32:7). ¬ качестве свидетелей используют раствор Ђ—апаралаї. ’роматограмму про€вл€ют 20% H2SO4 и нагревают в сушильном шкафу (1=105∞—) в течение 10 мин. ѕо€вл€ютс€ 3 п€тна вишневого цвета на уровне п€тен аралозидов в Ђсапаралеї.

3.  орни женьшен€.

а) –еакци€ с порошком корн€ женьшен€ (на гликозиды). ѕри нанесении конц. H2SO4 на порошок корн€ женьшен€ через 1-2 минуты по€вл€етс€ кирпично-красное окрашивание, переход€щее в красно-фиолетовое, а затем - в фиолетовое.

б) Ќаличие панаксозидов доказывают при помощи разделени€ извлечени€ из корн€ женьшен€ в тонком слое силикагел€ и последующим про€влением хроматограммы раствором фосфорно-вольфрамовой кислоты при нагревании. ѕанаксозиды про€вл€ютс€ в виде розовых п€тен.

≈диного метода количественного определени€ сапонинов в лекарственном растительном сырье нет.

„аще всего используют физико-химические методы:

1.ѕотенциометрический метод. ћетод основан на определении изменени€ электродвижущей силы (Ёƒ—) в результате титровани€. ћетод используетс€ дл€ определени€ суммы аралозидов в корн€х аралии маньчжурской.

Ётапы определени€: - подготовительный; экстракци€ аралозидов метиловым спиртом и их кислотный гидролиз:

 

 

 

R1, R2 Ц сахара олеанолова€ кислота

 

- очистка от сопутствующих веществ - осаждение олеаноловой кисло≠ты в результате смены растворител€ (разбавление спиртового извлече≠ни€ водой и охлаждение);

- растворение олеаноловой кислоты в гор€чей смеси метилового и изобутилового спиртов (1:1,5);

- количественное определение - титрование раствором едкого натра (0,1 моль/л) в смеси метилового спирта и бензола:

“очку эквивалентности определ€ют потенциометрически.

2. —пектрофотометрический метод. ћетод основан на способности сапонинов и их окрашенных комплексов поглощать монохроматический свет при определенной длине волны. ћетод предложен дл€ определени€ содержани€ сапонинов в следующих видах сырь€:

а) корневища с корн€ми диоскореи ниппонской. ѕровод€т кислотный гидролиз сапонинов с последующим проведением реакции свободного агликона (диосгенина) с реактивом (п-диметиламинобензальдегид). ќбразуетс€ окрашенный комплекс; б) корни солодки. ѕровод€т осаждение глицирризиновой кислоты концентрированным раствором аммиака. ќсадок раствор€ют и определ€ют оптическую плотность полученного раствора.

3. √равиметрический метод - определение экстрактивных веществ. ћетод основан на определении сухого остатка после высушивани€ суммы веществ, извлеченных из сырь€ соответствующим экстрагентом. ћетод предложен дл€ оценки качества сырь€ женьшен€, почечного ча€, синюхи голубой, солодки.

¬ сырье астрагала шерстистоцветкового и заманихи высокой количественное содержание биологически активных веществ не определ€ют.

4. –анее дл€ количественной оценки сырь€ использовали определение гемолитического индекса и пенного числа.

 оличественное определение сапонинов гемолитическим методом основано на предположении, что гемолитическое действие пр€мо пропорционально количеству вещества в растворе.

√емолитический индекс Ц наименьша€ концентраци€ извлечени€ из сырь€, котора€ вызывает полный гемолиз эритроцитов. ƒл€ этого к настою сырь€ на изотоническом растворе добавл€ют 2% взвесь бараньих эритроцитов. ¬ результате гемолиза кровь становитс€ прозрачной, €рко-красной, лакированной (эритроциты перейдут в плазму). –асчет провод€т на 1 г испытуемого вещества.

5. ѕенное число Ц наименьша€ концентраци€ извлечени€ из 1 г сырь€, при встр€хивании которого в течение 15 секунд образуетс€ пена, устойчива€ в течение 15 минут.

6. ќпредел€ли силу действи€ сапонинового сырь€ на рыбах, то есть рыбный индекс. Ёто наименьша€ концентраци€ извлечени€, при которой гибнут рыбы массой до 0,5 г, длиной 3-4 см в течение 1 часа.

ѕри вы€снении структуры сапонинов

помимо традиционных методов (элементарный анализ, определение молекул€рной массы) широко используютс€ методы ”‘-спектроскопии, » -спектроскопии, ямр-спектроскопии.

» - спектроскопи€ при исследовании тритерпенов примен€етс€ дл€ обнаружени€ и характеристики двойных св€зей, гидроксильных групп, ќ-ацильных группировок, карбонильных, карбоксильных, метильных групп.

ѕо характерным полосам поглощени€ CH3-групп в области 1245-1392 см-1 отличают тетрациклические тритерпены от пентациклических групп альфа- и бета- амирина, а также последние друг от друга. ѕо »  спектрам продуктов окислени€ оксидом рутени€ (1”) предложен метод доказательства положени€ изолированной двойной св€зи в тритерпенах.

—трогое отнесение сапонинов к сткроидам может быть сделано на основании »  спектров и их генинов: наличие полос поглощени€ при 852(866), 900 (900), 922(922), 987 (982) см-1 (спирокетальна€ группировка нормального и изо-(р€дов) позвол€ет однозначно отнести сапонины к стероидному р€ду.

¬ последнее врем€ при исследовании структур пентациклических тритерпенов получила распространение масс-спектрометри€ и методы яћ– спектроскопии.

”становление строени€ углеводного остатка тритерпеновых и стероидных сапонинов осуществл€етс€ с помощью методов структурной химии олиго- и полисахаридов.

—юда входит:

І определение качественного и количественного состава моносахаридов;

І установление последовательности моносахаридных остатков в углеводной цепи;

І определение положени€ гликозидных св€зей в моносахаридных остатках;

І определение размеров оксидных циклов моносахаридов;

І установление конфигурации гликозидных центров.

 





ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-01-29; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 6341 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

—воим успехом € об€зана тому, что никогда не оправдывалась и не принимала оправданий от других. © ‘лоренс Ќайтингейл
==> читать все изречени€...

1518 - | 1325 -


© 2015-2024 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.01 с.