Выделение сапонинов из растительного сырья включает следующие стадии:
Ø получение экстракта;
Ø выделение из него суммы сапонинов и их очистка от сопутствующих веществ;
Ø разделение сапонинов на индивидуальные гликозиды.
Обычно суммарный экстракт для выделения сапонинов получают обработкой сырья полярными растворителями: метиловым или этиловым спиртом и водой.Сырье предварительно обрабатывают петролейным эфиром или четыреххлористым углеродом для разрушения комплексов сапонинов со стеринами.
Методы выделения
Гликозиды с небольшим числом моносахаридных остатков (3-4) обычно плохо расторимы в воде и выпадают в осадок при разбавлении спиртовых растворов водой.
Полярные сапонины плохо растворимы в метиловом и этиловом спиртах и выпадают в осадок при охлаждении или продолжительном стоянии спиртовых растворах, либо при добавлении спирта к водным и водно-спиртовым растворам.
Кислые сапонины растворимы в водных растворах щелочей и выпадают в осадок при подкислении.
Из спиртовых растворов тритерпеновые сапонины осаждают этиловым эфиром, ацетоном, этилацетатом, а некоторые – бутиловым и изоамиловым спиртами.
Из водных растворов сопутствующие малополярные примеси извлекают этиловым эфиром, хлороформом, четыреххлористым углеродом, а тритерпеновые гликозиды – бутиловым или изоамиловым спиртами.
Полученные сапониновые фракции очищают повторным переосаждением, что, однако, не приводит к полной очистке от полярных сопутствующих веществ: неорганических примесей, моно- и олигосахаридов, гликозидов других классов, органических кислот и др.
Ряд методов основан на способности сапонинов образовывать нерастворимые в воде или водном спирте соли с гидроксидом бария или ацетатом свинца и комплексы с холестерином, таннинами, белками. Соли затем разлагают угольной или серной кислотами;
Холестериновые комплексы – извлечением холестерина бензолом, толуолом, этиловым эфиром или пиридином. Танниновые – кипячением с водной суспензией оксида цинка. Белковые – извлечением гликозидов подходящими органическими растворителями.
Эта группа методов дает более чистую сумму сапонинов, но не является общей методикой и не гарантирует количественного выделения и отсутствия значительного содержания балластных веществ в отдельных случаях.
Сапонины, образующие коллоидные растворы, очищают от примесей, дающих истинные растворы (моносахариды, минеральные вещества), с помощью диализа и электролиза.
Хорошие результаты очистки сапониновых фракций от растительных пигментов и восстанавливающих сахаров получены при гельфильтрации на сефадексах.
Значительное распространение нашли хроматографические методы очистки суммы сапонинов. Гликозиды, содержащие свободные карбоксильные группы, могут быть отделены от сопутствующих веществ, в том числе и от минеральных примесей, с помощью ионообменной хроматографии. Хроматографическую очистку суммы сапонинов проводят на оксиде алюминия, силикагеле, активированном угле.
