Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


ќпределение белка в молоке по Ћоури




ѕринцип метода основан на образовании окрашенных продуктов ароматических аминокислот с реактивом ‘олина в сочетании с биуретовой реакцией на пептидные св€зи. ћетод характеризуетс€ высокой чувствительностью (10 Ц 100 мкг белка в пробе).

’од работы. 1мл молока внос€т в литровую колбу и довод€т до 1 л дистиллированной водой. ѕосле тщательного перемешивани€ в пробирку отбирают 2 мл разбавленного молока, добавл€ют 5 мл реактива —, после чего содержимое пробирки перемешивают и оставл€ют на 10 мин. «атем приливают 0,5 мл реактива ‘олина и колориметрируют после 45 минутной выдержки при l = 750нм (красный светофильтр).  онцентрацию белка молока (Dоп) в пробе наход€т по предварительно построенной калибровочной кривой.

ѕостроение калибровочной кривой. 10 мл приготовленного 0,1%-ного раствора белка казеина помещают в мерную колбу на 100 мл и довод€т объем до метки дистиллированной водой. »з полученного таким образом раствора в 7 пробирок отбирают порции, содержащие от 20 до 150 g казеина (1мг = 1000 g). –аствор казеина и воду внос€т в количествах, указанных в таблице 6. ѕараллельно готов€т контрольную пробу, дл€ этого в пробирку внос€т 2 мл дистиллированной воды. ¬ каждую пробирку (в том числе и в контрольную) добавл€ют 5 мл реактива —, после чего содержимое пробирок перемешивают и оставл€ют на 10 мин. «атем приливают 0,5 мл реактива ‘олина и колориметрируют после 45 минутной выдержки при l = 750нм (красный светофильтр), концентрацию белка в пробе откладывают на оси абсцисс, по оси ординат Ц величину оптической плотности (Dср) при 750нм (рисунок 4).

 

 

Dср

 

 

Dоп

20 40 60 80 100 120 140 —×10-6, г/мл

 

–исунок 4 - √рафик зависимости оптической плотности (D) от концентрации белка в пробе (—)

 

 онцентрацию белка в молоке рассчитывают по формуле

, (5)

где   Ц концентраци€ белка в молоке, %;

с - концентраци€ казеина в пробе, найденна€ по графику, г/мл;

0,002054 Ц количество молока в пробе (в 2 мл, вз€тых дл€ анализа), г.

“аблица 3 - ќсновные параметры опыта и его результаты

g казеина              
 ол-во 0,1%-ного раствора казеина, мл 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4
 ол-во Ќ2ќ, мл 1,8 1,6 1,4 1,2 1,0 0,8 0,6
 онцентраци€ казеина, г/мл   20×10-6   40×10-6   60×10-6   80×10-6   100×10-6   120×10-6   140×10-6
ќптическа€ плотность D1              
D2              
Dср              

ћатериалы и реактивы: молоко; 0,1% раствор белка казеина по √аммарстену на фосфатном буфере (см. приложение Ѕ п.10); реактив ј (см. приложение Ѕ п.11); реактив ¬ (см. приложение Ѕ п.12); реактив — (см. приложение Ѕ п.13); реактив ‘олина ((см. приложение Ѕ п.14).

ќборудование: пробирки; мерные колбы на 1 л, 100 мл; пипетки на 1 и 2 мл с ценой делени€ 0,05 мл; ‘Ё -56ћ.

 

 онтрольные вопросы

1. ’имизм метода  ьельдал€.

2.  оэффициенты пересчета азота на белок.

3. ћетодика работы на аппарате —ереньева.

4. —хема определени€ азотосодержащих соединений в сыре.

5. ѕринцип метода определени€ белка по методу Ћоури.

6. ћетодика построени€ калибровочной кривой.





ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-05-08; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 781 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

Ѕутерброд по-студенчески - кусок черного хлеба, а на него кусок белого. © Ќеизвестно
==> читать все изречени€...

669 - | 726 -


© 2015-2023 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.011 с.