Лабораторная работа 16. Осаждение белков органическими кислотами

Белки из растворов могут осаждаться органическими кис­лотами. Трихлоруксусная и сульфосалициловая кислоты яв­ляются очень чувствительными и специфическими реактива­ми на белок.

Под действием органических кислот происходит дегидра­тация белковой молекулы и снятие заряда.

Трихлоруксусная кислота осаждает только белки и не осаждает продукты распада белка и аминокислоты, поэтому ею пользуются часто для полного удаления белков из биоло­гических жидкостей. В этих условиях продукты распада бел­ков остаются в растворе.

 

1 Цель работы – провести осаждение белков органическими кислотами

 

Приборы и материалы

 

Белок 1 %

Сульфосалициловая кислота 10 %

Трихлоруксусная кислота 10 % (ТХУ)

 

Описание работы

 

В две пробирки наливают по 5 капель 1 % раствора белка, в одну пробирку добавляют 1 – 2 капли 10 % рас­твора сульфосалициловой кислоты, в другую – 1 – 2 капли 10 % раствора трихлоруксусной кислоты. В пробирках об­разуется осадок белка.

 

Контрольные вопросы

 

За счет чего происходит осаждение белков органическими растворителями?

 

Оформление результатов работы

Результаты лабораторных работ 11-16 заносят в таблицу 4.

.

Таблица 4 – Реакции осаждения белков

Название групп осадителей	Употребляемые реактивы	Результат реакции	Чем обусловлена реакция
Соли щелочных и щелочноземельных металлов
Органические растворители
Соли тяжелых металлов
Концентрированные минеральные кислоты
Органические кислоты

Лабораторная работа 17. Осаждение белков при нагревании

Почти все белки денатурируют при нагревании (50 - 55 °С и выше), при этом белок теряет свои нативные свой­ства, уменьшается его растворимость (уменьшение гидро­фильных свойств ведет к нарушению гидратной оболочки). Важную роль в выпадении в осадок денатурированного при нагревании белка играет концентрация водородных ионов и присутствие солей. Наиболее полное и быстрое осаждение происходит в изоэлектрической точке белка. В сильнокислых и щелочных растворах белок не выпадает в осадок при ки­пячении; так как он приобретает соответственно сильно по­ложительный или отрицательный заряд:

 

NH₃⁺ NH₃⁺

R + H⁺Cl^- R Cl^-

COO^- COOH

 

амфион катион

 

NH₃⁺ NH₂

R + Na⁺OH^- R Na⁺

COO^- COO^-

 

амфион анион

 

 

1 Цель работы – провести тепловое осаждение белка

 

Приборы и материалы

 

Водяная баня

Электроплитка

Белок 1 %

Описание работы

 

В пробирку наливают пять капель 1 % раствора белка. Пробирку с раствором белка нагревают до кипения. Жидкость мутнеет (наблюдается опалесценция).