Белки нерастворимы во многих органических растворителях (спирт, ацетон, эфир). При добавлении к раствору белка больших количеств спирта или ацетона выпадает осадок белка.
Реакция обусловлена обезвоживанием (дегидратацией) коллоидных частиц белка. Осаждение происходит только из нейтральных или слабокислых растворов и лучше в присутствии электролитов, например, хлористого натрия, кратковременное воздействие органических растворителей при низкой температуре – от 0 до -15 °С сохраняет белок в нативном состоянии, длительное воздействие приводит к денатурации белка.
1 Цель работы – провести осаждение белка органическими растворителями
Приборы и материалы
Белок 1 %
Этиловый спирт или ацетон
Сульфат аммония (насыщенный раствор)
Описание работы
К пяти каплям 1% раствора белка приливают 15 – 20 капель этилового спирта (или ацетона) - раствор мутнеет. Добавляют одну каплю насыщенного раствора сульфата аммония. Через некоторое время выпадает осадок белка.
Контрольные вопросы
За счет чего происходит осаждение белков органическими растворителями?
Лабораторная работа 14. Осаждение белков солями тяжелых металлов
Белки осаждаются солями меди, цинка, свинца, ртути, серебра и др., при этом происходит денатурация белковой молекулы.
Ионы тяжелых металлов образуют довольно прочные соединения с полярными группами белков, искажая систему ионных и водородных связей нативной белковой молекулы и образуя нерастворимые комплексы.
При осаждении белков некоторыми солями тяжелых металлов, например, уксуснокислым свинцом и сульфатом меди, избыток этих солей ведет к растворению (пептизации) осадка. Ионы металла, адсорбируясь на поверхности белковых мицелл, придают им положительные заряды. Одноименно заряженные мицеллы отталкиваются, что способствует их переходу из осадка в раствор. При избытке солей серебра и ртути пептизации не наблюдается.
1 Цель работы – провести осаждение белков солями тяжелых металлов
Приборы и материалы
Белок 1 %
Сульфат меди 7 %
Уксуснокислый свинец 5 %
Описание работы
В две пробирки вносят по пять капель 1 % раствора белка и по две капли: в 1-ю пробирку 7 % раствора сульфата меди, во 2-ю пробирку – 5 % раствора уксусного свинца. Наблюдают образование осадка. Затем в обе пробирки добавляют еще 5 – 10капель осадителя и наблюдают растворение осадка.
Контрольные вопросы
За счет чего происходит осаждение белков тяжелыми металлами?
Лабораторная работа 15. Осаждение белков минеральными кислотами
Концентрированные минеральные кислоты (азотная, серная, соляная) вызывают дегидратацию белковых частиц и нейтрализацию их заряда, при этом происходит образование комплексных соединений. Все это приводит к необратимой денатурации белка. В избытке серной или соляной кислот, а также при их длительном воздействии, выпавший осадок денатурированного белка растворяется, по-видимому, за счет перезарядки белка и частичного гидролиза. В избытке азотной кислоты этого растворения не происходит.
1 Цель работы – провести осаждение белка минеральными кислотами
Приборы и материалы
Белок 1 %
Азотная кислота (конц.)
Серная кислота (конц.)
Описание работы
В две пробирки наливают по пять капель концентрированной азотной и серной кислот. Затем, наклонив пробирки под углом 45°, осторожно по стенке пробирки (чтобы жидкости не смешивались) наливают такой же объем раствора белка. На границе двух слоев жидкости появляется осадок белка в виде тонкого белого кольца. Осторожно встряхивают пробирки, обнаруживают растворение осадка белка при осаждении серной кислотой, в пробирке с азотной кислотой белок не растворяется.
Контрольные вопросы
За счет чего происходит осаждение белков неорганическими кислотами?
