Значение изучаемой темы:
Среди физико-химических показателей организма важнейшее место принадлежит кислотно-основному равновесию крови. От соотношения концентрации ионов водорода и ионов ОН- крови зависит активность ферментов. Интенсивность окислительно-восстановительных реакций, процессы расщепления и синтеза белка, окисления углеводов и липидов, чувствительность клеточных рецепторов к медиаторам и гормонам, проницаемость клеточных мембран, физико-химические свойства коллоидных систем клеток и межклеточных структур.
Пределы изменения рН крови являются жизненно важными и наиболее жесткими из всех известных гомеостатических показателей. Даже небольшие их отклонение влекут за собой нарушения жизненно важных физиологических процессов.
Методы исследования КОС.
Исследования кислотно-основного равновесия крови проводят на специальных газоанализаторах, которые прямым методом измеряют рН (потенциометрия) и рСО2 (полярография), а также температуру и барометрическое давление. Затем автоматически проводятся расчет остальных показателей КОР.
Для оценки и правильной диагностики нарушений КОР крови существуют специальные номограммы. В номограммах указана область нормальных значений КОР крови, острых или хронических метаболических и респираторных нарушений. При нанесении полученного анализа на такую номограмму можно четко определить, какое нарушение КОР имеется у больного и правильно выбрать метод его коррекции.
Преаналитический этап исследований КОС.
Для исследования КОР идеальным материалом является артериальная кровь, которую обычно берут из лучевой, локтевой, бедренной артерий стеклянным или пластиковым шприцом.
· Время взятия крови с 7 до 9 ч, натощак, исключая физическую активность за 3 дня до исследования;
· За 5 минут до взятия крови обследуемый находится в покое, взятие проводят в одном положении – сидя или лежа;
· Время наложения жгута не превышает 1 мин;
· Основное требование к получению материала – взятие в анаэробных условиях, отсутствие пузырьков воздуха в шприце, выбор адекватного антикоагулянта без его избытка (гепарин);
· Исследование крови после забора должно быть выполнено не позднее чем через 5-10 мин, если исследование не может быть выполнено в указанные сроки, закупоренный шприц помещают в воду с кусочками льда, не более чем на 1 час;
· Перед исследованием шприц с кровью извлекают из ледяной бани и выдерживают при комнатной температуре не менее 10 мин;
· Перед измерением кровь перемешивают путем вращения шприца между ладонями и переворачиванием его вверх и вниз;
· У пациентов в критическом состоянии анализ выполняют немедленно.
Практическая работа
Определение буферной емкости сыворотки крови.
Цели занятия:
- Усвоить представление о диагностическом значении определения кислотно-основного состояния крови;
- Знать буферные системы: определение, типы, механизм действия, значение для организма;
- Уметь определять буферную емкость предложенной сыворотки крови.
| Реактивы: 1. вода дистиллированная; 2. физиологический раствор; 3. фосфатный буфер рН-7,4; 4. гидрооксид натрия рН=9; 5. сыворотка. | Оборудование: 1. бюретка для титрования; 2. колбы –2 шт; 3. воронка; 4. химический стакан. |
Ход работы.
· Возьмите две колбы, в одну налейте 2 мл сыворотки крови, разведенной в 10 раз, во вторую – 2 мл фосфатного буфера рН=7,4, разведенного в 10 раз водой;
· Добавьте в обе колбы по 2 капли индикатора фенолофталеина;
· Оттитруйте содержимое обеих колб 0,1н NaOH до появления малиновой окраски (рН-9,0).
Расчет проводят по формуле:
Буферная емкость = А*10*н / (рН1 – рН0)*2, где
А – мл щелочи, пошедшей на титрование;
10 – разведение сыворотки;
н – молярная масса эквивалента щелочи;
рН0 – водородный показатель до начала титрования (рН=7.4)
рН1 – водородный показатель после окончании титрования (рН1=9);
2 – объем взятой сыворотки.
· Сравните буферную емкость сыворотки крови с буферной емкостью фосфатного буфера и сделайте соответствующие выводы.
Задание для самостоятельной работы:
· Законспектируйте методику;
· Подготовьте рабочее место для исследования;
· Проведите определение буферной емкости предложенной сыворотки;
· Оцените полученные результаты;
· Заполните бланки анализа;
· Сделайте выводы по работе и рисунки;
· Ответьте на дополнительные вопросы.
Ответьте на вопросы:
1. Что называют «буферными системами»? их биологическое значение. Примеры.
2. Какие буферные системы находятся в крови человека? Напишите их формулы.
3. Какие показатели характеризуют кислотно-основное состояние в организме человека?
4. Что называют: а) метаболическим ацидозом? б) респираторным ацидозом? в) метаболическим алкалозом? г) респираторным алкалозом? Приведите примеры заболеваний с нарушением КОС.
Раздел 9. Гемостаз.
Значение изучаемой темы:
Данный раздел является актуальным и клинически значимым, так как нарушения свертывания крови наблюдаются довольно часто: при острых лейкозах, некоторых видах анемий, циррозе печени, гемофилиях, недостаточности витамина К и при многих других состояниях и заболеваниях, отягощая их течение. Знание этой темы важно и для лаборантов клинических и биохимических лабораторий, так как именно они проводят основные исследования показателей гемостаза.
