Клинико-диагностическое значение определения аминотрансфераз в крови

Аминотрансферазы: аспартат- и аланинаминотрансферазы осуществляют весьма важную функцию – обратимый перенос аминогрупп с аминонокислот на кетокислоты. Содержатся во всех клетках человеческого организма (больше всего в ткани печени, мышцах сердца, скелетной мускулатуры, почках).

Активность АсАТ преобладает в мышечной ткани, а АлАТ – в печени.

Пределы колебаний активности ферментов в сыворотке крови у взрослых составляет: АсАТ – 0.1 – 0.45 мкмоль/л*ч,

АлАТ – 0.1 – 0.68 мкмоль/л*ч

Наиболее часто активность аминотрансфераз исследуют с целью дифференциальной диагностики патологии печени и миокарда. Увеличение активности аминотрансфераз наблюдается при:

· Инфаркте миокарда активность АсАТ в 95% случаев повышается (активность КК, ЛДГ при этом повышена). Возрастание происходит на 4-6 ч. с момента приступа. Оно четко выражено спустя 24-36 ч. (увеличивается в 4-5 раз выше нормы) и лишь на 3-7 сутки снижается до нормы. Отношение показателей активностей КК/АсАТ имеет высокую значимость при дифференциальной диагностике инфаркта миокарда(отношение около 5) и поражениях скелетных мышц(около 27). Коэффициент де Ритиса АсАТ/АлАТ более 1.

· Остром вирусном гепатите (АлАТ и АсАТ более чем в 100 раз). Коэффициент де Ритиса менее 1,33.

Быстрое снижение активности аминотрансфераз одновременно с возрастанием гипербилирубинемии свидетельствует об обширных некротических изменениях в ткани печени. В благоприятных ситуациях гепатита активность данных ферментов снижается медленно в течение нескольких недель и даже месяцев.

· Хроническом гепатите;

· Циррозе печени (активность повышается в 5-8 раз);

· Механической желтухе (АлАТ повышается в 50 раз долго остается повышенной, сопровождаясь возрастанием активности ЩФ, ГГТП и содержанием билирубина);

· Токсическом поражении печени;

· Легочной эмболии (активность КК при этом не повышена);

· Пораженияхмышц (мышечной дистрофии, дерматоитозит);

Снижение активности АсАТ и АлАТ наблюдаются при:

· Снижении содержания в организме витамина В₆

· Почечной недостаточности.

 

Задание для самостоятельной работы:

· Законспектируйте методику;

· Подготовьте рабочее место для исследования;

· Проведите определение активности аминотрансфераз в предложенной сыворотке;

· Оцените полученные результаты;

· Сделайте выводы по работе и рисунки.

· Ответьте на дополнительные вопросы.

Ответьте на вопросы:

1. К какому классу ферментов относятся АлАТ и АсАТ?

2^*. Напишите уравнение реакции, которую катализирует АлАТ.

3. Назовите место локализации АлАТ и АсАТ.

4. Что такое коэффициент де Ритиса, как его рассчитывают, что он характеризует.

10. Назовите основные заболевания, при которых изменяется активность аминотрансфераз. Объясните причину.

6^*.Назовите, какие еще ферменты изменяют свою активность при заболеваниях сердца; печени?

 

Практическая работа.

Определение активности кислой и щелочной фосфатаз в сыворотке крови.

Цели занятия:

- Усвоить представления о диагностическом значении определения ферментов;

- Знать изоферменты, клинико-диагностическое значение определения фосфатаз в сыворотке крови;

- Уметь определять активность кислой щелочной фосфатазы в сыворотке крови;

Принцип метода: принцип определения активности фосфатаз основан на способности ферментов, отщеплять неорганический фосфат от нитрофенил-фосфата в щелочной среде.

 

Реактивы. 5. Буфер, рН=10,4. 6. 4-нитрофенилфосфат. 7. NaOH 0.4 ммоль/л 8. Сыворотка.

Оборудование. 6. ФЭК, кювета на 10 мм. 7. Термостат. 8. Пробирки – 2 шт. 9. Пипетки на 1 и 5 мл. 10. Дозатор 0,02 мл.

 

Ход определения.

Реактив.	Опыт.	Контроль.
Рабочий реактив.	1,0	1,0
Сыворотка.	0,02	-
Перемешать, проинкубировать в течение 20 минут при 300С в термостате.
NaOH	5,0	5,0

 

Перемешать и измерить оптическую плотность опыта (Д) против контроля в кюветах на 10 мм, при длине волны 405 нм.

Расчет результатов:

ЩФ, МЕ/л = Д _* 812.

Нормальные величины: 30 –90 МЕ/л.