Цели занятия
- Усвоить представление о диагностическом значении определения электролитов в плазме крови;
- Знать классификацию минеральных веществ организма, клинико-диагностическое значение определения хлоридов в сыворотке крови;
- Уметь определять содержание хлоридов в сыворотке крови.
Принцип метода: в присутствии ионов хлора в кислой среде тиоцианат образует тиоцианат-ионы, образующие окрашенный комплекс с железом (+3). Интенсивность окраски пропорциональна концентрации хлоид-ионов в пробе.
| Реактивы. 1. Монореагент. 2. Стандартный раствор хлорид-ионов – 100 ммоль/л. 3. Сыворотка крови. | Оборудование. 1. ФЭК. 2. Кюветы на 5 мм. 3. Пипетки на 2,0 мл. 4. Дозатор 0,1 мл 5. Пробирки 3 шт. |
Ход определения.
| Реактивы. | Опыт, мл | Калибровка, мл | Контроль, мл |
| Сыворотка. | 0,01 | - | - |
| Монореагент. | 2,0 | 2,0 | 2,0 |
| Стандарт. | - | 0,01 | - |
Реакционную смесь тщательно перемешивают и через 5 минут опытную и калибровочную пробу фотометрируют против контрольной в кюветах на 5 мм при длине волны 460 – 490 нм.
Расчет концентрации хлоридов проводят по формуле:
Хлорид (ммоль/л) = 100 * Еопыт/Екалибровки
Нормальные величины (сыворотка крови): 97 – 108 ммоль/л
Клинико-диагностическое значение определения хлоридов в сыворотке крови.
Хлрид-ион – основной внеклеточный анион плазмы крови, компенсирующий влияние катионов. Присутствует в виде солей калия, натрия, кальция и магния. Вместе с перечисленными катионами анионы хлора являются наиболее важными осмотически активными ионами плазмы крови, лимфы, спиномозговой жидкости, клеточного содержимого.
Показатели нормы содержания хлорид-ионов в плазме крови составляют
95,0 – 110,0 ммоль/л.
Гиперхлоремия отмечается при:
· Нарушении водного баланса (обезвоживании, гипервентиляции);
· Заболеваниях почек (острая почечная недостаточность, нефропатия, воспалительные заболевания почек);
· Нарушении функции сердечно-сосудистой системы.
Гипохлоремия отмечается при:
· Пневмонии;
· Тяжелых инфекционных заболеваниях;
· Заболеваниях надпочечников (надпочечники продуцируют гормоны, которые контролируют баланс жидкости и электролитов в организме);
· Усиленном потреблении воды, задержке ее в организме вследствие нарушения выделительной функции почек;
· Повышенном выделении ионов хлора из организма (при избыточном потоотделении, поносе, длительной рвоте).
Задание для самостоятельной работы:
· Законспектируйте методику;
· Подготовьте рабочее место для исследования;
· Проведите определение содержания хлора в предложенной сыворотке;
· Оцените полученные результаты;
· Заполните бланки анализа;
· Сделайте выводы по работе и рисунки;
· Ответьте на дополнительные вопросы.
Ответьте на вопросы:
1. Распределения воды в организме.
2. Суточная потребность в воде, источники, пути выведения.
3. Роль минеральных веществ в организме.
4. Характеристика хлоридов: локализация, биологическая роль.
5. Патология обмена хлора.
6*.Регуляция обмена натрия, калия, хлора.
Практическая работа
Определение кальция в сыворотке крови.
Цели занятия:
- Усвоить представление о диагностическом значении определения электролитов в плазме крови;
- Знать функции кальция в организме, регуляцию кальция в организме, клинико-диагностическое значение определения кальция в сыворотке крови;
- Уметь определение содержания кальция в сыворотке крови.
Принцип метода: ионы кальция в кислой среде образуют с индикаторным реактивом Арсеназо-III комплекс синего цвета. Степень изменения окраски пропорциональна содержанию кальция и определяется фотометрически.
| Реактивы. 1. Рабочий реактив с Арсеназо-III 2. Калибровочный раствор кальция 2,5 ммоль/л. 3.Сыворотка крови | Оборудование. 1. Пробирки 2 шт. 2. Пипетки на 2 мл. 3. Дозатор на 0.02 мл. 4.ФЭК. |
Ход определения.
| Реактивы | Проба, мл | Стандарт, мл |
| Сыворотка | 0.02 | - |
| Рабочий раствор | 2,0 | 2,0 |
| Стандартный раствор | - | 0,02 |
Перемешивают и оставляют стоять на 2 минуты при комнатной температуре, измеряют оптическую плотность пробы (Е1) и стандарта (Е2) против рабочего раствора, при длине волны 620 - 660 нм, в кювете на 5 мм.
Расчет проводят по формуле:
Кальций (ммоль/л)= 2.5 * Еопыта/Естандарта
Нормальные величины (сыворотка крови) – 2.25 – 2.75 ммоль/л
Предупреждение:
Лабораторная посуда, применяемая при определении кальция, должна быть совершенно чистой. После обычного мытья посуду следует поместить на ночь в 2% раствор Комплексона 3 в аммиачной воде, потом тщательно промыть дистиллированной водой и высушить.
