Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


‘ормоловое титрование (по серенсену)




 

ѕ–»Ќ÷»ѕ –јЅќ“џ:

ѕри гидролизе белка вследствие разрыва пептидных св€зей в нем происходит нарастание одновременно карбоксильных и аминных групп в эквивалентных количествах. ƒл€ определени€ количества карбоксильных групп используетс€ метод —еренсена.

јминокислоты в водных растворах образуют внутримолекул€рные соли, поэтому без предварительного блокировани€ аминогрупп формальдегидом непосредственно титровать карбоксильные группы аминокислот щелочью невозможно. ¬ процессе реакции с формальдегидом аминогруппа тер€ет свои основные свойства.

ќбразующеес€ метиленовое соединение (метиленаминокислота) легко может быть оттитровано щелочью.

ќпредел€€ количество карбоксильных групп титрованием, одновременно можно судить и о содержании аминных групп, так как количество титруемых карбоксильных групп эквивалентно количеству св€занных формальдегидом аминных групп. ћетод формолового титровани€ позвол€ет следить за ходом гидролиза белка и изучать действие протеолитических ферментов.

 онец гидролиза белка совпадает с моментом, когда количество аминных и карбоксильных групп в гидролизате перестанет увеличиватьс€ и наблюдаетс€ отрицательна€ биуретова€ реакци€.

–≈ј “»¬џ и ќЅќ–”ƒќ¬јЌ»≈:

1) животный уголь, тщательно измельченный; 2) CH3COOH, 1 %; 3) формалин нейтральный, 20 %; 4) фенолфталеин; 5) NaOH, 0,005 н.; 6) HCl или CH3COOH, 1 %; 7) конические колбы на 50 мл; 8) пипетки на 1 и 2 мл; 9) микробюретки; 10) цилиндр мерный на 25 мл.

’ќƒ –јЅќ“џ:

1. “итрование карбоксильных групп в растворе белка до гидролиза. ќтмеривают в колбочку 1 мл раствора €ичного белка, приливают 5 капель 20 % нейтрального раствора формалина и 3 капли 0,5 % раствора фенолфталеина. “итруют из микробюретки 0,005 н. раствором NaOH до устойчивой бледно-розовой окраски.

2. “итрование карбоксильных групп после гидролиза белка (т.е. в гидролизате). „ерез 45 или 90 минут гидролиз прерывают, а в колбочку всыпают (на кончике ножа) животный уголь дл€ обесцвечивани€ буроватого раствора, взбалтывают и кип€т€т 5 минут. «атем гидролизат охлаждают, выливают в цилиндр, довод€т объем жидкости до 25 мл дистиллированной водой и фильтруют.

ќтмеривают в колбочку 1,25 мл гидролизата, добавл€ют 3 капли раствора фенолфталеина и нейтрализуют 10 % раствором NaOH из макробюретки до слабо-розовой окраски. ≈сли при нейтрализации окраска делаетс€ €рко-красной, то добавл€ют до обесцвечивани€ по капл€м 1 % раствор уксусной кислоты, избыток которой нейтрализуют 1 % раствором NaOH до слабо-розовой окраски. «атем приливают 5 капель нейтрального 20 % раствора формалина и обесцвеченный раствор титруют 0,005 н. раствором NaOH до бледно-розового цвета и точно отмечают количество затраченной щелочи.

3. –асчет азота аминогрупп производ€т по количеству затраченной щелочи, исход€ из ее нормальности.

«аполнить таблицу 5.

“аблица 5

’од работы  оличество мл щелочи (до гидролиза белка)  оличество мл щелочи (после 45 минут гидролиза белка)  оличество мл щелочи (после 90 минут гидролиза белка) –асчет азота аминогрупп по количеству затраченной щелочи
           

 

¬џ¬ќƒ:

 

 ќЌ“–ќЋ№Ќџ≈ ¬ќѕ–ќ—џ:

 

„то такое гидролиз белка и как его производ€т?

 ак установить конец гидролиза белка?

 акое значение имеет определение карбоксильных групп методом формолового титровани€?

 аков принцип и химизм формолового титровани€?

 ак различаютс€ белки по форме их молекул?

„то понимают под первичной структурой белка?  акие св€зи формируют эту структуру?

„то представл€ет собой вторична€ структура белка?  акие св€зи ее формируют?

„то такое водородна€ св€зь?

„то понимают под третичной структурой белка?  акие св€зи формируют эту структуру?

„ем различаютс€ структуры молекул глобул€рных и фибрилл€рных белков?

„то понимают под четвертичной структурой белка?

 акими методами изучают структуру белковой молекулы?

 

“ема 5





ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2016-11-23; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 2849 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

—амообман может довести до саморазрушени€. © Ќеизвестно
==> читать все изречени€...

788 - | 641 -


© 2015-2023 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.009 с.