Количественный анализ желудочного сока. Определение свободной, связанной, общей соляной кислоты и общей кислотности желудочного сока

 

Желудочный сок представляет собой бесцветную жидкость с сильнокислой реакцией (рН 1,5 – 2,0). За сутки у человека выделяется около 1,5 л желудочного сока; в его состав входят вода, неферментативные белки, ферменты (пепсин, гастриксин), муцин, фактор Касла, соляная кислота, гидрофосфаты и некоторые другие соединения.

Кислая реакция желудочного сока обусловлена присутствием соляной кислоты, гидрофосфатов, а при патологических процессах – молочной кислоты и жирных кислот. Совокупность всех веществ, способных быть донорами протонов, желудочного сока, составляют общую кислотность. Соляную кислоту, связанную с белками и продуктами их переваривания, называют связанной соляной кислотой, а находящуюся в несвязанном виде - свободной соляной кислотой. Содержание последней подвержено значительным колебаниям, тогда как количество связанной соляной кислоты достаточно постоянно.

В характере секреции желудочного сока различают следующие патологические изменения: 1) гиперхлоргидрию – увеличение содержания свободной соляной кислоты и общей кислотности. Такое состояние преимущественно наблюдается при язвенной болезни желудка; 2) гипохлоргидрию – уменьшение количества свободной соляной кислоты и общей кислотности; 3) ахлоргидрию – полное отсутствие соляной кислоты, общая кислотность при этом значительно снижена; 4) ахилию – отсутствие секреции желудочного сока.

Уменьшение или отсутствие соляной кислоты в желудке может наблюдаться при хроническом гастрите, раке желудка, злокачественном малокровии.

В клинике используют рН-метрию желудочного сока, однако полезную информацию можно получить простым, изящным способом, предложенным ниже.

Цель работы

Последовательно оттитровать один из трех образцов желудочного сока раствором NaOH в присутствии двух индикаторов и на основании расчетов сделать вывод о кислотности желудочного сока: нормальная, повышенная или пониженная. Сравнить с другими образцами и отметить характер изменения общей кислотности, а также общей, свободной и связанной соляной кислоты.

 

Принцип метода

Пользуясь различными индикаторами (диметиламиноазобензол и фенолфталеин) в одной и той же пробе желудочного сока определяют как общую кислотность, так и содержание общей, свободной и связанной соляной кислоты.

Общую кислотность желудочного сока выражают количеством миллилитров 0,1 М раствора NaOH, пошедших на титрование 100 мл желудочного сока в присутствии индикатора фенолфталеина (интервал перехода окраски pH 8,2 – 10). В норме общая кислотность составляет 40-60 титрационных единиц (ед.).

Свободную соляную кислоту выражают количеством миллилитров 0,1 М раствора NaOH, пошедших на титрование 100 мл желудочного сока в присутствии индикатора диметиламиноазобензола (интервал перехода окраски рН 1,0 – 3,0). В норме содержание свободной соляной кислоты составляет 20-40 ед.

Общая соляная кислота составляет сумму свободной и связанной с белками соляной кислоты (последнюю находят по разности между общей и свободной соляной кислотой).

Выполнение работы

В колбу для титрования вносят из бюретки 5 мл исследуемого желудочного сока. Добавляют 1 каплю раствора диметиламиноазобензола и 2 капли раствора фенолфталеина. Образуется розово-малиновое окрашивание. Пробу титруют 0,1 М раствором NaOH до оранжевого окрашивания и отмечают количество миллилитров щелочи, пошедших на титрование свободной соляной кислоты (условно называется I пункт титрования).

Далее титрование продолжают до появления лимонно-желтой окраски и отмечают общее количество миллилитров NaOH, пошедших на титрование от начала общего титрования (II пункт титрования). Затем титрование продолжают до появления малинового окрашивания и отмечают количество миллилитров щелочи, пошедших на титрование вновь от начала общего титрования (III пункт титрования).

Расчеты

Допустим, что на титрование 5 мл желудочного сока до I пункта пошло от 0 до 1,5 мл 0,1 М раствора NaOH, до II от 0 до 2 мл и до III пункта – от 0 до 3 мл. Тогда общая кислотность составит 3 ^. 100/5 = 60 ед., количество свободной соляной кислоты - 1,5 ^. 100/5 = 30 ед., количество общей соляной кислоты (среднее арифметическое между II и III пунктом титрования) - (2+3)/2 ^. 100/5 = 50 ед., а количество связанной соляной кислоты находят по разнице между содержанием общей и свободной соляной кислоты: 50-30 = 20 ед.

Данные титрования и расчета вносят в таблицу (см ниже).

 

Оформление результатов

Пункт титрования	NaOH от 0 до соответ-ствующего пункта титрова- ния, мл	Окраска	Количество соляной кислоты (ед.)	Общая кислотность, ед.
свобод-ной	общей	связан-ной
I
II
III

 

Выводы

Тестовые задания по теме: «Превращение белков и дезаминирование аминокислот»

 

1) Ответить на каждый вопрос однозначно: «да» или «нет»

 

1. Протеиназы, амилазы и липазы относятся к классу гидролаз.

2. Таурин является продуктом превращения цистеина.

3. Скатол и индол образуются в кишечнике из аминокислоты тирозина.

4. Соляная кислота в желудке способствует активации пепсиногена.

5. При дезаминировании аминокислот в организме образуются биогенные амины.

6. Пепсин относится к эндопептидазам.

7. Можно ли заменить НАД⁺ на НАДФ⁺ в качестве кофермента глутаматдегидрогеназы?

8. Происходит ли неокислительное дезаминирование цистеина у человека?

9. Участвует ли трипсин в активации химотрипсиногена?

10. Возможно ли самопереваривание пепсина в желудке?

11. Относятся ли карбркси- и аминопептидазы к эндопептидазам?

12. Участвует ли уридиндифосфоглюкуроновая кислота в обезвреживании индола?

 

2) Выбрать один правильный ответ:

 

Коферментом дезаминирования аминокислот не может быть: 1. НАД+ 2. ФАД 3. ФМН 4. ТПФ 5. ПФ

Заменимой аминокислотой для человека является: 1. фенилаланин 2. тирозин 3. триптофан 4. треонин 5. метионин

 

3) Найти соответствие профермента и соответствующего катализатора

 

1. пепсиноген 2. трипсиноген 3. химотрипсиноген

А. трипсин Б. этеропептидаза В. НСl