Определение времени свертывания крови

Свёртывание крови in vitro обусловлено внутренним механизмом, запускаемым за счёт контактной активации фактора XII (Хагемана). В норме свёртывание капиллярной крови начинается через 0,5 – 2 минуты, заканчивается через 3 – 5 минут. Свёртывание крови, взятой из вены, составляет 5 – 10 минут. Удлинение времени свёртывания отмечается при гипокоагуляции (гемофилии, лечение антикоагулянтами), укорочение – при гиперкоагуляции.

ЦЕЛЬ: ознакомиться с определением времени свёртывания капиллярной крови визуальным методом.

ОСНАЩЕНИЕ: принадлежности для взятия крови, секундомер

ХОД РАБОТЫ: после прокола пальца, первая капля удаляется, в капилляр Панченкова набирается 25 мм крови, включается секундомер. Путём наклона капилляра на 45º кровь переводится на его середину, затем, через каждые 30 секунд, капилляр наклоняется на 45º в одну сторону, возвращается в горизонтальное положение, через 30 секунд наклоняется в другую сторону. Отмечается момент замедления движения крови и появления на стенке капилляра микросгустков. Окончание процесса свёртывания – момент полного прекращения движения крови.

Определение протромбинового времени.

Протромбиновый тест Квика характеризует процесс свёртывания крови при его запуске по внешнему механизму и имеет исключительное значение для определения активности фактора VII.

ЦЕЛЬ: ознакомиться с методикой.

ОСНАЩЕНИЕ: раствор тромбопластина (стандартный); 3,8% раствор цитрата натрия; 0,5% раствор хлорида кальция; капилляр Панченкова; пробирка, водяная баня или водяной термостат, поддерживающий температуру 37º С; секундомер.

ХОД РАБОТЫ: В капилляр Панченкова набирается раствор цитрата натрия до отметки «80», производится прокол пальца и в тот же капилляр (не удаляя цитрат натрия) набирается кровь, пока уровень набранной смеси не достигнет метки «0» («К»). Содержимое капилляра переносится в пробирку, которая помещается в водяную баню на 1 минуту. В пробирку с цитратной кровью вносится раствор тромбопластина капилляром Панченкова, заполненным до метки «0» («К»), и такое же количество раствора хлорида кальция. Включается секундомер. Пробирка в водяной бане осторожно покачивается. Секундомер останавливается в тот момент, когда образуется сгусток крови. Полученное значение – «протромбиновое время» (ПВ).

Зная ПВ испытуемого (ПВИ) и нормальное протромбиновое время (ПВН), которое зависит от активности стандартного тромбопластина (оно бывает указано на флаконе, обычно 12 – 18 секунд; проверяется на нескольких образцах донорской крови), можно рассчитать протромбиновый индекс (ПИ): ПИ = ПВН / ПВИ * 100.

В норме ПИ составляет 90-100%. Чем больше протромбиновое время, свидетельствующее о гипокоагуляции крови, тем меньше значения протромбинового индекса.

Тромбоэластография.

ЦЕЛЬ: ознакомиться с методикой.

ОСНАЩЕНИЕ: тромбоэластограф, секундомер, принадлежности для взятия крови.

Тромбоэластограф – прибор для регистрации процесса свёртывания крови по внутреннему механизму. Используется для динамического контроля лечения антикоагулянтами. Основной частью тромбоэластографа является кювета, в которую вносят исследуемую кровь. В кювету погружают стержень с диском или пластиной на конце, которая не касается ее стенок. Стержень связан с регистрирующим устройством тромбоэластографа. Специальное устройство придает кювете колебательно-вращательные движения, которые передаются на стержень и регистрирующее устройство только в том случае, когда в кювете, заполненной кровью, начнется образование нитей фибрина. По мере образования и уплотнения сгустка амплитуда колебаний стержня увеличивается и достигает максимума.

Тромбоэластография. А – схема прибора; Б – тромбоэластограмма (ТЭГ): В – начало реакции, r-показатель времени реакции, К – время образования сгустка, а – величина, определяющая эластичность сгустка в норме, аmax- максимальное расхождение между краями ТЭГ.

 

r – момент от начала записи до расхождения краев ТЭГ на 1мм. Характеризует I и II фазы процесса свертывания (9 – 14 мин.).

K - момент от конца времени реакции до расхождения краев линии ТЭГ на 20 мм. Зависит от концентрации образующегося тромбина и количества фибриногена (5 – 8 мин.).

r + K - общая (видимая) длительность свертывания.

t (константа свертывания крови) - измеряется от конца периода К до а_max и соответствует периоду от конца видимого свертывания крови до начала ретракции кровяного сгустка.

а_max -в этот момент сгусток обладает максимальной плотностью. На показатель влияют концентрация фибриногена, количество и качество тромбоцитов. При резком снижении числа тромбоцитов и выраженной гипофибриногенемии показатель уменьшается. (N = 41 – 55 мм).

Е (коэффициент эластичности) - вычисляется по формуле: Е = (100* а_max) / (100- а_max)

Для гиперкоагуляции крови характерно укорочение r, К и увеличение а_max; для гипокоагуляции - удлинение r и К и уменьшение а_max.

Рассмотреть и проанализировать несколько тромбоэластографических кривых, сделать вывод об их соответствии норме. Нормальные величины показателей ТЭГ устанавливают эмпирически для каждого тромбоэластографа.

 

Показатели ТЭГ	Нормальные величины ТЭГ	ТЭГ 1	ТЭГ 2	ТЭГ 3
r	21 – 35 мм
K	15 – 24 мм
t	50 – 83 мм
аmax	41 – 55 мм
Е	69 – 117 у.е.
Выводы по ТЭГ:

 

4-е практическое занятие. Программируемый контроль и устное собеседование по теме «физиология крови».

ФИЗИОЛОГИЯ КРОВООБРАЩЕНИЯ

1-е практическое занятие. Электрические явления в сердце.

Физиологические свойства и особенности сердечной мышечной ткани.
Современные представления о субстрате, природе и градиенте автоматии. Проводящая
система сердца и ее роль. Характеристика электрической активности клеток миокарда
предсердий, желудочков и проводящей системы. Соотношение возбуждения, сокращения
и возбудимости миокарда. Реакция сердечной мышцы на дополнительные раздражения
(экстрасистолы).

Методы исследования электрической активности сердца: электрокардиография,
векторкардиография, магнитокардиография. Анализ происхождения зубцов и
интервалов на ЭКГ. Клиническое значение ЭКГ.

Вопросы программированного контроля по теме занятия.

1. Свойства сердечной мышцы, особенности её сократимости?

2. Что характерно для потенциалов действия кардиомиоцитов?

3. Каково функциональное значение рефрактерности клеток миокарда?

4. Какие причины обуславливают фазу плато потенциалов действия в сердце?

5. Чем отличаются потенциалы действия в предсердиях и желудочках?

6. Каковы функции проводящей системы сердца?

7. Каковы основные причины спонтанной диастолической деполяризации?

8. Какие ионы обеспечивают электромеханическое сопряжение в миокарде?

9. О каких процессах и где позволяют судить данные электрокардиографии?

10. Какой процесс и где отображает каждый зубец, интервал, сегмент ЭКГ?