В две одинаковые колбы емкостью 100 мл вливают по 10 мл спирта, подщелоченного по тимолфталеину 0,1 н раствором натрия гидроксида до устойчивого голубого окрашивания. В одну из колб вносят около 0,5 г препарата (точная навеска), в другую колбу прибавляют 20 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды. Раствор препарата титруют 0,1 н раствором натрия гидроксида до получения окраски, одинаковой с окраской эталонного раствора.
1 мл 0,1 н раствора натрия гидроксида соответствует 0,01842 г барбитала или 0,02322 г фенобарбитала или 0,03363 г бензонала.
Гексенал
Идентификация
0,3 г препарата растворяют в 20 мл воды, прибавляют 1 мл кислоты хлористоводородной разведённой и перемешивают. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают и сушат. Температура плавления диметил-циклогексенилбарбитуровой кислоты 143 - 147 °С.
чистота
Свободная щёлочь. К 40 мл 95% спирта прибавляют 10 капель раствора тимолфталеина и подщелачивают 0,05 н раствором натрия гидроксида до устойчивого голубого окрашивания. Раствор делят на две равные части и помещают в две одинаковые пробирки с притёртыми пробками. В одну из них вносят 0,5 г препарата, энергично встряхивают и титруют 0,05 н раствором кислоты хлористоводородной до окраски контрольного опыта.
1 мл 0,05 н раствора раствора кислоты хлористоводородной соответствует 0,002 г щёлочи.
Количественное определение
Около 0,5 г препарата растворяют в 30 мл воды и титруют раствором кислоты хлористоводородной до появления розового окрашивания (индикатор метиловый оранжевый). 1 мл 0,1 н раствора кислоты хлористоводородной соответствует 0,02582 г гексенала. Из найденного процентного содержания гексенала вычитают процентное содержание натрия гидроксида, умноженное на коэффициент 6,46.
ТЕМА: АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ, ПРОИЗВОДНЫХ ПИРИМИДИНО-ТИАЗОЛА
Вопросы для самоконтроля
1. Латинские и химические названия производных пиримидин-тиазола: тиамина хлорид и бромид, кокарбоксилаза, фосфотиамин, бенфотиамин.
2. Описание веществ, их растворимость и химические свойства
3. Реакции определения подлинности перечисленных лекарственных средств с написанием уравнений химических реакций.
4. Определение общих и специфических примесей в изучаемых препаратах.
5. Гравиметрия и титриметрические методы количественного определения изучаемых веществ (кислотно-основное титрование в неводных средах, нейтрализация, аргентометрия) с уравнениями соответствующих химических реакций.
6. Физико-химические методы (флуориметрия, спектрофотометрия в УФ области) количественного определения изучаемых веществ.
7. Условия хранения, формы выпуска, метаболизм и применение веществ.
Рекомендуемая литература
1. Арзамасцев А.П., Печенников В.М., Родионова Г.VI. и др. Анализ лекарственных смесей. - М.: Компания Спутник+, 2000. - 275 с.
2. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия. В 2 ч. Ч. 2. Специальная фармацевтическая химия. - Пятигорск, 1996. - С. 434-442.
3. Аксенова Э.Н., Андрианова О.П., Арзамасцев А.И. и др. Руководетво к лабораторным занятиям по фармацевтической химии. - М.: Медицина, 2000.
Тиамина бромид или тиамина хлорид
Идентификация
1. 0,05 г препарата растворяют в 25 мл воды. К 5 мл раствора приливают 1 мл раствора феррицианида калия, 1 мл раствора натрия гидроксида, 5 мл бутилового или изоамилового спирта хорошо встряхивают и дают отстояться. В верхнем слое возникает наблюдаемая в УФ-свете синяя флюоресценция, исчезающая при подкисленни и вновь возникающая при подщелачивании.
2. 5 мл того же раствора дает положительную реакцию на хлориды или бромиды.
3. К 2 - 3 мг препарата добавляют 3 - 4 капли реактива Несслера, появляется желтое окрашивание, переходящее в черное.
4. К 3 - 5 мг препарата добавляют 1 каплю воды, реактива Драгендорфа, появляется красный осадок.
Фосфотиамин
Идентификация
1. 0,1 г порошка растертых таблеток взбалтывают с 10 мл воды и фильтруют. 5 мл фильтрата дают тиохромную пробу.
2. 0,2 г порошка растертых таблеток растворяют в 5 мл разведенной азотной кислоты. К раствору прибавляют 0,5 г нитрата аммония и 2 мл раствора молибдата аммония и нагревают, раствор окрашивается в желтый цвет, затем выделяется желтый осадок.
Количественное определение
Методика 1. 1. К 1,0 мл раствора соли тиамина добавляют 1 - 2 капли раствора бромфенолового синего, по каплям кислоту уксусную разведённую до зелено-желтого окрашивания и титруют 0,02 н раствором серебра нитрата до фиолетового окрашивания. 1 мл 0,02 н раствора нитрата серебра соответствует 0,004352 г тиамина.
Методика 2. 2,0 мл раствора препарата титруют 0,02 н раствором натрия гидроксида до розового окрашивания в присутствии фенолфталеина. 1 мл 0,02 н раствора натрия гидроксида соответствует 0,008704 г препарата.
Содержание тиамина хлорида должно быть 0,024 - 0,026 г в мл или 0,0475 – 0,0525 г в мл.
ТЕМА: АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ПРОИЗВОДНЫХ КСАНТИНА
Вопросы для самоконтроля
1. Строение и химические свойства гетероцикла пурина, классификация лекарственных средств, производных пурина.
2. Латинские и химические названия производных ксантина: кофеин, теобромин, их соли (кофеин-бензиат натрия), дипрофиллин, ксантинола никотинат, пентоксифиллин.
3. Описание веществ, их растворимость и химичские свойства.
4. Реакции определения подлинности перечиленных лекарственных средств с написанием уравнений химических реакций;
5. Определение общих и специфических примесей изучаемых препаратов, применение тонкослойной хроматографии для обнаружения примесей.
6. Титриметрические методы количественного определения изучаемых веществ (кислотно-основное титрование в неводных средах, нейтрализация, метод Кьельдаля),уравнения химических реакций.
7. Физико-химические методы количественного определения лекарственных средств.
8.Условия хранения, формы выпуска, метаболизм.
Рекомендуемая литература
1. Арзамасцев А.П., Печенников В.М., Родионова Г.VI. и др. Анализ лекарственных смесей. - М.: Компания Спутник+, 2000. - 275 с.
2. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия. В 2 ч. Ч. 2. Специальная фармацевтическая химия. - Пятигорск, 1996. - С. 434-442.
3. Аксенова Э.Н., Андрианова О.П., Арзамасцев А.И. и др. Руководетво к лабораторным занятиям по фармацевтической химии. - М.: Медицина, 2000.
Общегрупповая реакция
Мурексидная проба. 0,01 г препарата помешают в фарфоровую чашку, прибавляют 10 капель кислоты хлористоводородной разведённой, 10 капель пергидроля и выпаривают на водяной бане досуха. Остаток смачивают 1-2 каплями раствора аммиака, появляется пурпурно-красное окрашивание.
Кофеин
Идентификация
1. 0,01 г препарата растворяют в 10 мл воды. К 5 мл полученного раствора прибавляют по каплям 0,1% раствор танина, образуется белый осадок, растворимый в избытке реактива.
2. 0,05 г препарата растворяют в 5 мл горячей воды, охлаждают, добавляют 10 капель 0,1 н раствора йода, не должно появляться ни осадка, ни помутнения. При прибавлении нескольких капель кислоты хлористоводородной разведённой образуется бурый осадок, растворимый в избытке щелочи.
Кофеин-бензоат натрия
Идентификация
1. 0,5 г препарата растворяют в 3 мл воды, добавляют 1 мл раствора гидроксида натрия, 10 мл хлороформа и взбалтывают 1 - 2 минуты. Хлороформный раствор фильтруют через фильтр с безводным сульфатом натрия и выпаривают хлороформ на водяной бане. Остаток дает реакции подлинности кофеина, имеет температуру плавления 234-237°С.
2. Раствор препарата (1:100) дает характерную реакцию на бензоаты. Количественное определение
1. Около 0,3 г препарата (точная навеска) растворяют в 30 мл воды в мерной колбе емкостью 100 мл. К раствору прибавляют 10 мл кислоты серной разведённой, 50 мл 0,1 н раствора йода, доводят объем водой до метки и тщательно перемешивают. После отстаивания в течение 15 минут раствор быстро фильтруют через небольшой комок ваты в сухую колбу, прикрыв воронку часовым стеклом. Первые 10 - 15 мл фильтрата отбрасывают. В 50 мл фильтрата избыток йода оттитровывают 0,1 н раствором тиосульфата натрия (индикатор - крахмал). Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл 0,1 н раствора йода соответствует 0,004855 г кофеина.
2. Около 1,5 г препарата (точная навеска) растворяют в 20 мл воды в колбе с притертой пробкой емкостью 250 мл, прибавляют 45 мл эфира, 3 - 4 капли смешанного индикатора (1 мл раствора метилового оранжевого и 1 мл раствора метиленового синего) и титруют 0,5 н раствором кислоты хлористоводородной до появления сиреневой окраски водного слоя. 1 мл 0,5 н раствора раствором кислоты хлористоводородной соответствует 0,07205 г бензоата натрия.
Теобромин
Идентификация
1. Мурексидная проба.
2. К 0,1 г препарата прибавляют 2 мл 0,1 раствора натрия гидроксида, встряхивают в течение 2 - 3 минут и фильтруют. К фильтрату прибавляют 3 капли 2% раствора хлорида, кобальта и перемешивают, появляется быстро исчезающее интенсивное фиолетовое окрашивание серовато-голубого цвета.
3. 0.05 г препарата растворяют в смеси 3 мл воды и 6 мл гидроксида натрия, добавляют 1 мл раствора аммиака и 2 мл 5% раствора серебра нитрата. После встряхивания образуется густая желатинообразная масса, которая разжижается при нагревании до 80 °С и застывает при охлаждении.
Количественное определение
Около 0,3 г помешают в коническую колбу емкостью 250 - 300 мл, прибавляют 100 мл кипящей воды (предварительно прокипяченной в течение 5 минут) и кипятят на сетке до полного растворения препарата. К горячему раствору прибавляют 25 мл 0,1 н раствора серебра нитрата, перемешивают, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 1-1,5 мл раствора фенолового красного и титруют 0,1 н раствором гидроксида натрия до появления фиолетово-красного окрашивания.I
Теофиллин
Идентификация
1. Мурексидная проба.
2. К 0,5 г препарата прибавляют 2 мл 0,1 н раствора гидроксида натрия, встряхивают 2 минуты и фильтруют. К фильтрату прибавляют 3 капли 2% раствора хлорида кобальта и перемешивают, образуется белый с розоватым осадок.
Количественное определение
Около 0,4 препарата (точная навеска) растворяют в 100 мл кипящей воды. К охлаждённому раствору прибавляют 25 мл 0,1 н раствора нитрата серебра, 1 - 1,5 раствора фенолового красного и титруют 0,1 н раством гидроксида натрия до появления фиолетово-красного окрашивания. 1 мл 0,1 н раствора гидроксида натрия соответствует 0,01802 г теофиллина.
Эуфиллин
Идентификация
1. Мурексидная проба.
2. 0,1 г препарата растворяют в 4 мл воды, прибавляют 5 капель сульфата меди, появляется яркое фиолетовое окрашивание.
3. Раствор 1 г препарата в 10 мл воды нейтрализуют разбавленной соляной кислотой по универсальному индикатору до рН 4 – 5. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат при 100 – 105 °С. Температура плавления полученного осадка 269-274°С.
4. УФ-спектр 0.001% раствора препарата в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной в области от 250 до 300 нм имеет максимум поглощения при 270 нм.
чистота
Прозрачность раствора. 0,25 г препарата растворяют в 10 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды и встряхивают до растворения. Полученный раствор, проверенный тотчас после приготовления, должен быть прозрачным (ГФ X).
Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на прозрачность должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном №7 б.
рН - От 9.0 до 10,0 (4% водный раствор, потенциометрически).
Посторонние примеси. 0,2 г препарата растворяют при нагревании в 2 мл воды, прибавляют 8 мл метанола и перемешивают (испытуемый раствор). 0,5 мл испытуемого раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора метанолом до метки (раствор свидетеля).
На линию старта пластинки "Silufol UV 254" размером наносят 0,01 мл (200 мкг) испытуемого раствора препарата, рядом наносят 0,01 мл (1 мкг) и 0,005 мл (0.5 мкг) раствора свидетеля. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, затем помещают в камеру со смесью н-бутанол-ацетон-хлороформ-аммиака раствор конц. (40: 30:30: 10) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы дойдет до конца пластины, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе 30 минут и просматривают в УФ свете при 254 нм.
На хроматограмме испытуемого раствора, кроме основного пятна, допускается одно дополнительное пятно, которое по величине и интенсивности поглощения не должно превышать пятно на хроматограмме их 0,01 мл раствора свидетеля (не более 0,5%).
Результаты анализа считаются достоверными, если выполняются требования теста "Проверка пригодности хроматографической системы" (Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора свидетеля из 0,005 мл четко видно пятно).
Сульфаты. 0,5 г препарата растворяют в 7,5 мл воды, прибавляют 2,5 мл кислоты хлористоводородной разведенной и сильно взбалтывают. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают водой до получения 10 мл фильтрата. Фильтрат должен выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,02% в препарате, ГФ XI, вып. 1, с. 165).
Количественное определение
Методика 1. Около 0,3 г препарата (точная навеска) растворяют в 25 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды и титруют 0,1 н раствором кислоты хлористоводородной до оранжево-розовой окраски (индикатор-метиловый оранжевый).
1 мл 0,1 н раствора соляной кислоты соответствует 0,003005 г этилендиамина, которого должно быть 18,0-22,0%.
Методика 2. Около 0,4 г препарата (точная навеска) помещают в широкогорлую коническую колбу емкостью 250 мл и сушат в сушильном шкафу при 125-130 ºС до исчезновения запаха аминов (около 2,5 часов). Высушенную навеску растворяют в 100 мл горячей воды и кипятят в течение 1 минуты. К охлажденному раствору прибавляют 25 мл 0,1 н раствора серебра нитрата и титруют 0,1 н раствором гидроксида натрия до появления фиолетово-красного окрашивания (индикатор - феноловый красный).
1 мл 0,1 н раствора гидроксида натрия соответствует 0,01802 г безводного теофиллина, которого должно быть 75,0 - 82,0%.
Количественное определение эуфиллина в таблетках 0,15
Около 0,125 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, прибавляют 20 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и 60 мл воды, взбалтывают в течение 10 минут, доводят объем раствор водой до метки, перемешивают и фильтруют. 5 мл фильтрата переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объем раствора 0,01 М раствором натрия гидроксида до метки и перемешивают. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при 275 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения 0,01 М раствор натра едкого. Параллельно в тех же условиях измеряют оптическую плотность раствора РСО теофиллина безводного.
Приготовление раствора РСО теофиллина безводного. Около 0,08 г (точная навеска) теофиллина, высушенного до постоянной массы при температуре 105 °С. помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, прибавляют 20 мл 0,1 М раствора натра едкого, взбалтывают в течение 10 минут, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 5 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объем раствора 0,01 М раствором натра едкого до метки и перемешивают.
Содержание теофиллина безводного в таблетке должно быть 0,1169-0,1355 г, считая на среднюю массу одной таблетки.
Темисал
Идентификация
1. Мурексидная проба.
2. 3% раствор препарата, подкисленный кислотой уксусной разведённой, дает характерную реакцию на салицилаты.
Количественное определение
1. Натрий, не связанный с салицилатом. Около 0,5 г предварительно высушенного препарата (точная навеска) растворяют в 75 мл горячей воды и точно 20 мл 0,1 н раствора кислоты серной, кипят до удаления углекислоты 15 - 20 минут. Охлаждают, избыток кислоты серной оттитровывают 0,1 н раствором натрия гидроксида (индикатор - феноловый красный). 1 мл 0,1 н раствор серной кислоты соответствует 0,0023 г натрия.
2. В раствор, в котором проводилось определение натрия, прибавляют 20 мл 0,1 н раствора серебра нитрата и титруют 0,1 н раствором гидроксида натрия (индикатор - феноловый красный). 1 мл 0,1 н раствора гидроксида натрия соответствует 0,0 1802 г теобромина
Пентоксифиллин
Идентификация
1. Уф спектр 0,0015% раствора препарата в воде в области от 220 до 320 нм имеет максимум поглощения при 274 нм (удельный показатель поглощения 360-376) и минимум при 246 нм.
2. Мурексидная проба.
ТЕМА: АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ, ПРОИЗВОДНЫХ ПУРИНА
Вопросы для самоконтроля
1. Латинские и химические названия производных гуанина: ацикловир (зовиракс), ганцикловир (цимевен).
2. Латинские и химические названия производных пурина: рибоксин, меркаптопурин, азатиоприн, аллопуринол.
3. Описание веществ, их растворимость и химические свойства.
4. Реакции определения подлинности перечисленных лекарственных средств с написанием уравнений химических реакций.
5. Определение общих и специфических примесей в изучаемых препаратах, применение тонкослойной хроматографии для обнаружения специфических примесей.
6. Титриметрические методы количественного определения изучаемых веществ (кислотно-основное титрование в неводных средах, нейтрализация, аргентометрия, йодометрия) с уравнениями соответствующих химических реакций.
7. Применение физико-химических методов (спектрофотометрия, фото-электроколориметрия) для количественного определения.
8. Условия хранения, формы выпуска, метаболизм и применение веществ.
Рекомендуемая литература
1. Арзамасцев А.П., Печенников В.М, Родионова Г.М. и др. Анализ лекарственных смесей. - М.: Компания Спутник+, 2000. - 275 с.
2. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия. В 2 ч. Ч. 2. Специальная фармацевтическая химия. - Пятигорск, 1996. - С. 527 -533.
3. Аксенова Э.Н., Андрианова О.П., Арзамасцев А.П. и др. Руководство к лабораторным занятиям по фармацевтической химии. - VI.: Медицина. 2000.
Аллопуринол
Идентификация
0,01 г препарата растворяют в 2 мл раствора натрия гидроксида, прибавляют 0,5 мл реактива Несслера, нагревают до кипения и оставляют, выпадает желтоватый осадок.
Меркаптопурин
Идентификация
1. 0,01 г препарата растворяют в 0.5 мл раствора натрия гидроксида, разбавляют водой и прибавляют 0,5 мл свежеприготовленного раствора нитропруссида натрия. Пробирку встряхивают, появляется желтовато-зеленое окрашивание, переходящее при подкислении разв. соляной кислотой в темно-зеленое.
2. 0,01 г препарата растворяют в 5 мл раствора аммиака и прибавляют по каплям свежеприготовленную смесь равных объемов раствора хлорида окисной меди и 20% раствора гидроксиламина гидрохлорида, выпадает оранжево-желтый осадок.
Количественное определение
Около 0,5 г (точная навеска) растворяют в 5 мл диметилсульфоксида в мерной колбе вместимостью 500 мл, добавляют 0,1 н раствор кислоты хлористоводородной и доводят до метки. 25 мл полученного раствора развести до 1000 мл 0,1 н раствором кислоты хлористоводородной.
Определяют зависимость оптической плотности от длины волны (максимум - при 325 нм). Расчет количественного содержания вещества проводят по величине удельного показателя поглощения = 165.
В случае анализе меркаптопурина в таблетках по 0,05 г содержание вещества должно быть 0,046-0,054 г в пересчете на среднюю массу одной таблетки.
Азатиоприн
Идентификация
1. 0,01 г препарата нагревают с 10 мл воды и фильтруют. К 5 мл фильтрата прибавляют 1 мл кислоты хлористоводородной,0,01 г цинковой пыли и выдерживают 5 минут, раствор желтеет. Полученный раствор фильтруют, охлаждают во льду, добавляют 2 капли раствора нитрита натрия и 0,01 г мочевины и встряхивают до исчезновения пузырьков, прибавляют 0,5 мл щелочного раствора β-нафтола, образуется розовый осадок.
2. Тонкослойная хроматография. На пластинку "Silufol UV 254" наносят растворы азатиоприна, меркаптопурина и метилнитрохлоримидазола, хроматографируют в системах растворителей 1. Ацетон – хлороформ –концентрированный аммиак (10: 1: 2). 2. Н-бутанол-этанол-вода 4:1:1. Вещества проявляют в УФ свете или в йодной камере, рассчитывают значения Rf.
Рибоксин
Идентификация
0,5 мл 2% раствора рибоксина разводят водой до 100 мл. Спектр поглощения имеет максимум при 249-250 нм. Рассчитывается отношение оптической плотности при 250 нм к поглощению при 260 нм, которое должно быть.
