Когда назначается иммунограмма

Перечень заболеваний и состояний,когда действительно должно назначатся иммунологическое исследование невелик.Прежде всего это так называемые иммунодефициты,при которых поражается одно или несколько звеньев иммунной системы.Различают:

Первичные иммунодефициты - Носят наследственный (врожденный) характер.Чаще всего встречаются нарушения,связанные с отсутствием или сниженной выроботкой антител - наследственная гипогаммаглобулинемия.

Приобретенные иммунодефициты - Возникают при тяжелых заболеваниях органов иммунной системы (заболевание селезенки,костного мозга,крови,вилочковой железы).Чаще всего это злокачественные заболевания - лимфомы,лейкозы и.т.д.Приобретенные иммунодефициты возникают вследствии применения некоторых лекарственных средств(например иммуносупрессоров),при радиационных поражениях (лучевая болезнь) и при вирусном поражении иммунной системы (ВИЧ -инфекция)

Также иммунограмма назначается при наличии или подозрении на так называемые аутоиммунные заболевания - когда организм начинает вырабатывать антитела к собственным клеткам. Это заболевания крови (например гемолитические анемии, тромбоцитопеническая пурпура),эндокринологические заболевания (некоторые формы сахарного диабета,аутоиммунный тиреодит),заболевания кожи (пузырчатка,красная волчанка)
Несомненным показанием для исследования иммунитета является и трансплантация (пересадка органов),особенно при пересадке костного мозга (реакция трансплантант против хозяина)

Лейкоцитарная формула (лейкограмма) — процентное соотношение различных видов лейкоцитов, определяемое при подсчёте их в окрашенном мазке крови под микроскопом. Лейкоциты в зависимости от плотности распределяются в мазках неравномерно: нейтрофилы, базофилы, эозинофилы — по периферии, ближе к краям; моноциты, лимфоциты — ближе к середине. Лейкоцитарная формула имеет возрастные особенности, поэтому ее сдвиги должны оцениваться с позиции возрастной нормы (это особенно важно при обследовании детей).

Некоторые варианты изменения (сдвига) лейкоцитарной формулы Сдвиг влево (в крови присутствует увеличенное количество палочкоядерных нейтрофилов, возможно появление метамиелоцитов (юных), миелоцитов) может указывать на: Острые инфекционные заболевания; Физическое перенапряжение; Ацидоз и коматозные состояния. Сдвиг вправо (в крови появляются гиперсегментированные гранулоциты) может указывать на: Мегалобластную анемию; Болезни почек и печени; Состояния после переливания крови.

Цель исследования лейкоцитарной формулы оценить состояние иммунитета; диагностика и дифференциальная диагностика лейкозов; определить стадию и тяжесть инфекционного заболевания; диагностика аллергических реакций и паразитарных инвазий и оценка их тяжести (количество эозинофилов); дифференциальная диагностика вирусных и бактериальных инфекций; диагностическое значение заключается в том, что она дает представление о тяжести заболевания и эффективности проводимого лечения

Методы определения Микроскопия мазка крови врачом-лаборантом с подсчетом лейкоцитарной формулы на 100 клеток. Проточная цитометрия с лазерной детекцией (автоматический гематологический анализатор) - автоматический анализатор выдает результаты в виде процентного содержания нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов, эозинофилов (при наличии отклонений от нормы выполняется просмотр мазка крови под микроскопом врачом-гематологом с дополнительным уточнением лейкоцитарной формулы и описанием морфологии клеток). При подсчёте лейкоцитов используют методы Шиллинга или Филиппченко. По Шиллингу определяют количество лейкоцитов в четырёх участках мазка (четырёхпольный метод). Всего в мазке подсчитывают 100—200 клеток

Нейтрофилы В норме представлены тремя или двумя группами: могут присутствовать в малом количестве либо отсутствовать юные (ю) 1-5%; палочкоядерные (п/я) 1-5% и сегментоядерные (с/я) 40-68%. Более молодые клетки нейтрофильного ряда – юные (метамиелоциты), миелоциты, промиелоциты – появляются в периферической крови в случае патологии и являются свидетельством стимуляции образования клеток этого вида. В норме содержание в крови: 48-78

Увеличение (нейтрофилия) вызывают: воспалительные процессы; инфаркт миокарда, легкого; злокачественные новообразования; многие инфекционные процессы. К уменьшению (нейтропения) приводят: вирусные инфекции (гепатит, корь, краснуха, грипп, ветряная оспа, полиомиелит); инфекции, вызванные простейшими (малярия); постинфекционные состояния; апластические анемии; грибковые инфекции; хронические бактериальные инфекции (стрепто- или стафилококковые, туберкулез, бруцеллез); проведение лучевой терапии.

Эозинофилы Обладают фагоцитарными свойствами, но это свойство используют прежде всего для участия в аллергическом процессе. Они фагоцитируют комплекс антиген-антитело, образованные преимущественно Ig E. Эозинопения (снижение количества эозинофилов в крови менее 1%) часто наблюдается в начале воспаления. Эозинофилия (рост числа эозинофилов >5%) соответствует началу выздоровления.

Увеличение (эозинофилия) наблюдается при: аллергических состояниях (бронхиальная астма, аллергические поражения кожи); глистной инвазии (аскаридоз, эхинококкоз, лямблиоз, трихинеллез); инфекционных заболеваниях (в стадии выздоровления); после введения антибиотиков; коллагенозах. Уменьшение (эозинопения) встречается при: некоторых острых инфекционных заболеваниях (брюшной тиф, дизентерия); остром аппендиците; сепсисе; травмах; ожогах; хирургических вмешательствах; в первые сутки развития инфаркта миокарда.

Базофилы Участвуют в воспалительных и аллергических процессах в организме. В норме: 0 — 1 %. Увеличение базофилов бывает при: аллергических состояниях; заболеваниях системы крови; острых воспалительных процессах в печени; эндокринных нарушениях; хронических воспалениях в желудочно-кишечном тракте; язвенном воспалении кишечника; лимфогранулематозе. Уменьшение базофилов встречается при: длительной лучевой терапии; острых инфекциях; остром воспалении легких; гиперфункции щитовидной железы; стрессовых состояниях.

Моноциты. В норме содержание моноцитов в крови: 3-11 %. Увеличение (моноцитоз) встречается при: инфекционных заболеваниях (туберкулез, сифилис, протозойные инфекции); некоторых заболеваниях системы крови; злокачественных новообразованиях; коллагенозах; хирургических вмешательствах; в период выздоровления после острых состояний. Уменьшение (моноцитопения) встречается: после лечения глюкокортикоидами; тяжелых септических процессах; брюшном тифе.

Лимфоциты Лимфоциты - это популяция лейкоцитов, обеспечивающая иммунный надзор (распознавание "свое-чужое"), формирование и регуляцию гуморального и клеточного иммунного ответа, обеспечение иммунной памяти. Лимфоциты составляют 20 - 40% от всего числа лейкоцитов. Бывают трёх видов: Т-, В- и NK-лимфоциты. Они участвуют в распознавании антигенов. Т-лимфоциты участвуют в процессах клеточного иммунитета, а В-лимфоциты — в процессах гуморального иммунитета. NK-лимфоциты - естественные или натуральные киллеры.

По данным лейкоцитарной формулы можно судить о ходе патологического процесса, появлении осложнений и прогнозировать исход болезни. Данные лейкоцитарной формулы необходимо сопоставлять с клиническим проявлением болезни

 

 

БИЛЕТ

1. Иммунодефициты системы комплемента, этиология, патогенез, клин проявления.

1. Иммунодефициты вследствие недостаточности и ослабления функции белков системы комплемента.

А. Первичные

- селективный дефицит компонентов комплемента и их ингибиторов (ангионевротический отек; волчаночный синдром; инфекция, вызванная Neisseria; повторные пиогенные инфекции, ночная пароксизмальная гемоглобинурия)

В. Вторичные

- вследствие быстрой активации компонентов комплемента и последующего их разрушения

- снижение синтеза отдельных компонентов (цирроз печени, нарушение питания)

Иммунодефициты вследствие недостаточности и ослабления функции белков системы комплемента.

Недостаточность комплемента составляет не более 2% всех первичных иммунодефицитов. Большинство первичных дефектов одного или нескольких компонентов системы комплемента наследуются по аутосомно-рецессивному признаку и проявляется нарушением опсонизации, фагоцитоза и разрушения микроорганизмов. Сопровождается тяжелыми инфекциями, вплоть до сепсиса. Недостаточность комплемента часто наблюдается при аутоиммунных заболеваниях, например СКВ.

Лица с дефектом С2 компонента являются восприимчивыми к заболеваниям, вызываемым инкапскулированными бактериями (например, S. Pneumoniae).

Лица с дефектом С3 компонента предрасположены к инфекциям, вызываемых пиогенными бактериями, активирующими систему комплемента через лектин-опосредованный и альтернативный пути (инкапсулированные бактерии, S. aureus и др.), а также вследствие дефекта опсонизации объекта фагоцитоза.

Лица с дефицитом конечных компонентов активации комплемента (С5- С9) а также компонентов альтернативного пути - фактора D и пропердина являются восприимчивыми к инфекциям, вызываемыми двумя видами Neisseria - N. gonorrhoeae и N. meningitidis. Лица с данной патологией очень восприимчивы к воспалению мозговых оболочек, вызываемых N. meningitidis. Это также свидетельствует о том, что наличие мембрано-атакующего комплекса является крайне важным для защиты от бактерий, находящихся вне клеток-мишеней. Подтверждением этого является факт 10 000-кратного возрастания частоты заболеваемости менингитом у лиц, имеющих генетические дефекты мембрано-атакующего комплекса.

Наиболее тяжелые клинические проявления имеет нарушение функций комплемента, связанных с недостаточностью ингибитора C1, что приводит к наследственному ангионевротическому отеку; заболевание это передается как аутосомно-доминантный признак. Ингибитор C1 блокирует не только классический путь активации комплемента, но подавляет также активность связанных с ним элементов кининовой и плазминовой систем, а также системы свертывания крови. Развитие ангионевротического отека обусловлено накоплени­ем пептидов С5а и СЗа, которые обладают сильным вазотропным дейст­вием и способствуют повышению проницаемости капилляров. Накоп­ление крупных фрагментов, участвующих в каскаде реакций комплемен­та, нейтрализуется благодаря активной работе системы контроля компле­мента.

Следует отметить, что дефект ряда компонентов комплемента не приводит к клиническим проявлениям, так как перекрывается за счет других компонентов данной системы. Например, дефект компонентов С1 и С4 не приводит к повышению восприимчивости к бактериальным инфекциям, так как система комплемента может быть также активирована по альтернативному и лектин-опосредованному путям.

Методы диагностики:

1) Гемолитическая активность комплемента определяется в реакции гемолиза с использованием гемолитической системы. Определение комплемента основано на способности продуктов его активации вызывать лизис эритроцитов, покрытых антителами. По степени гемолиза судят о гемолитической активности комплемента. В качестве единицы измерения комплемента используется 50% единица (СН50) — количество комплемента, вызывающее 50%-ный лизис 0,5 мл стандартной суспензии сенсибилизированных эритроцитов при температуре 370С в течение 60 мин.

2) Выявляют продукты активации С4а,С3а, С5а и др.

3) Оценивают количество компонентов комплемента (норма в сыворотке крови в мг/л: С1q-190, C1s-120, С2–30, С4–430, С3–1300, С5–75, С6–60, С7–55, С8–60, С9–160, пропердин-25, фактор В-240, С1-ингибитор-180).

4) С помощью антител выявляют отложения комплемента с иммунными комплексами в биоптатах тканей.

5) Определяют рецепторы на лейкоцитах, свя- зывающие С3 и другие компоненты комплемента.

Оценка общей гемолитической активности комплемента по СН50 позволяет выявить большинство нарушений в этой системе. Однако этот метод не выявляет недостаточность В, D и пропердина — факторов альтернативного пути. При недостаточности С1-С8 уровень СН50 близок к нулю, а С9 — снижен в 2 раза. Снижение уровня СН50 при ИД зависит от тяжести дефицита. При ангионевротическом отеке снижаются С4 и С2 понижается и уровень СН50. С4 и С3 можно определять метождом радиальной иммунодиффузии. Их одновременное снижение указывает на активацию комплемента иммунными комплексами, а снижение только С3 — на активацию альтернативного пути. Это важно для диагностики нефрита, вызванного IgG-антителами против С3 (NeF-нефретический фактор).

2 Классификация вакцин По назначению вакцины делятся на профилактические и лечебные.
По характеру микроорганизмов, из которых они созданы, вакцины бывают:

 бактериальные,

 вирусные,

 риккетсиозные.
Существует моно - и поливакцина - приготовленные соответственно из одного или нескольких возбудителей.
По способу приготовления различают вакцины:

 живые вакцины;

 убитые вакцины;

 комбинированные.
Для повышения иммуногенности к вакцинам иногда добавляют различного рода адъюванты (алюмо-калиевые квасцы, гидроксид или фосфат алюминия, масляную эмульсию), создающие депо антигенов или стимулирующие фагоцитоз и таким образом повышающие чужеродность антигена для реципиента.
2. Живые вакцины Живые вакцины содержат живые аттенуированные штаммы возбудителей с резко сниженной вирулентностью или штаммы непатогенных для человека микроорганизмов, близкородственных возбудителю в антигенном отношении (дивергентные штаммы). К ним относят и рекомбинантные (генно-инженерные) вакцины, содержащие векторные штаммы непатогенных бактерий/вирусов (в них методами генной инженерии введены гены, ответственные за синтез протективных антигенов тех или иных возбудителей).
Примерами генно-инженерных вакцин могут служить вакцины против гепатит В - Энджерикс В и вакцина против коревой краснухи - Рекомбивакс НВ.
Поскольку живые вакцины содержат штаммы микроорганизмов-возбудителей с резко сниженной вирулентностью, то, по существу, они воспроизводят в организме человека легко протекающую инфекцию, но не инфекционную болезнь, в ходе которой формируются и активируются те же механизмы защиты, что и при развитии постинфекционного иммунитета. В связи с этим, живые вакцины, как правило, создают достаточно напряженный и длительный иммунитет. С другой стороны, по этой же причине применение живых вакцин на фоне иммунодефицитных состояний (особенно у детей) может вызвать тяжелые инфекционные осложнения, например, заболевание, определяемое клиницистами как БЦЖит после введения вакцины БЦЖ,
Живые вакцины применяют для профилактики:

 туберкулеза,

 особо опасных инфекций (чумы, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза),

 гриппа, кори, бешенства (антирабическая),

 паротита, оспы, полиомиелита (вакцина Сейбина-Смородинцева-Чумакова),

 желтой лихорадки, коревой краснухи,

 Ку-лихорадки.
Между введениями живых вакцин рекомендован интервал не менее 1 месяца, в противном случае возможны тяжелые побочные реакции, иммунный ответ может быть пониженным.
3. Убитые вакцины Убитые вакцины содержат убитые культуры возбудителей (цельноклеточные, цельновирионные). Их готовят из микроорганизмов, инактивированных прогреванием (гретые), УФ-лучами, химическими веществами (формалином - формоловые, фенолом - карболовые, спиртом - спиртовые и другие) в условиях, исключающих денатурацию антигенов.
Иммунногенность убитых вакцин ниже, чем у живых. Поэтому вызываемый ими иммунитет кратковременный и сравнительно менее напряженный. Убитые вакцины применяют для профилактики:

 коклюша, лептоспироза,

 брюшного тифа, паратифа А и В,

 холеры, клещевого энцефалита,

 полиомиелита (вакцина Солка), гепатита А.
К убитым вакцинам относят и химические вакцины, содержащие определенные химические компоненты возбудителей, обладающие иммуногенностью (субклеточные, субвирионные). Поскольку они содержат только отдельные компоненты бактериальных клеток или вирионов, непосредственно обладающих иммуногенностью, то химические вакцины менее реактогенны и могут использоваться даже у детей дошкольного возраста. Известны еще и антиидиотипические вакцины, которые также относят к убитым вакцинам. Это антитела к тому или иному идиотипу антител человека (анти-антитела). Их активный центр аналогичен детерминантной группе антигена, вызвавшего образование соответствующего идиотипа.
4. Комбинированные вакцины К комбинированным вакцинам относят искусственные вакцины. Они представляют собой препараты, состоящие из микробного антигенного компонента (обычно выделенного и очищенного или искусственно синтезированного антигена возбудителя) и синтетических полиионов (полиакриловая кислота и другие) - мощных стимуляторов иммунного ответа. Содержанием этих веществ они и отличаются от химических убитых вакцин.
Первая такая отечественная вакцина - гриппозная полимер-субъединичная ("Гриппол"), разработанная в Институте иммунологии МЗ РФ, уже внедрена в практику российского здравоохранения.
Для специфической профилактики инфекционных заболеваний, возбудители которых продуцируют экзотоксин, применяют анатоксины. Анатоксин - это экзотоксин, лишенный токсических свойств, но сохранивший антигенные свойства. В отличии от вакцин, при использовании которых у человека формируется антимикробный иммунитет, при введении анатоксинов формируется антитоксический иммунитет, так как они индуцируют синтез антитоксических антител - антитоксинов. В настоящее время применяются:

 дифтерийный,

 столбнячный,

 ботулинический,

 стафилококковый анатоксины,

 холероген-анатоксин.
Вакцины, содержащие антигены бактерий и анатоксины, называются ассоциированными. Примерами ассоциированных вакцин являются:

 вакцина АКДС (адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина), в которой коклюшный компонент представлен убитой коклюшной вакциной, а дифтерийный и столбнячный - соответствующими анатоксинами,

 вакцина ТАВТе, содержащая О-антигены брюшнотифозных, паратифозных А и В бактерий, и столбнячный анатоксин,

 брюшнотифозная химическая вакцина с секстаанатоксином (смесь анатоксинов клостридий ботулизма типов А, В, Е, клостридий столбняка, клостридий перфрингенс типа А и эдематиенс - два последних микроорганизма - наиболее частые возбудители газовой гангрены), и другие.
В то же время АДС (дифтерийно-столбнячный анатоксин), часто используемый вместо АКДС при вакцинации детей, является просто комбинированным препаратом, а не ассоциированной вакциной, так как содержит только анатоксины.

Инактивированные (убитые) вакцины. Убитые вакцины готовят из инактивированных вирулентных штаммов бактерий и вирусов, обладающих полным набором необходимых антигенов. Для инактивации возбудителей применяют нагревание, обработку формалином, ацетоном, спиртом, которые обеспечивают надежную инактивацию и минимальное повреждение структуры антигенов.
Химические вакцины. Химические вакцины состоят из антигенов, полученных из микроорганизмов различными способами, преимущественно химическими методами.
Основной способ получения химических вакцин заключается в выделении протективных антигенов, обеспечивающих развитие надежного иммунитета, и очистки этих антигенов от балластных веществ. В настоящее время молекулярные вакцины получают методом биосинтеза или путем химического синтеза.
Анатоксины. Анатоксины готовят из экзотоксинов различных видов микробов.Токсины подвергают обезвреживанию формалином, при этом они не теряют иммуногенные свойства и способность вызывать образование антител (антитоксинов).
Анатоксины выпускают как в виде монопрепаратов (моновакцины), так и в составе ассоциированных препаратов, предназначенных для одновременной вакцинации против нескольких заболеваний (ди- тривакцины).

Ослабленные (аттенуированные) вакцины изготавливают из микроорганизмов с пониженной патогенностью, но выраженной иммуногенностью. Введение вакцинного штамма в организм имитирует инфекционный процесс: микроорганизм размножается, вызывая развитие иммунных реакций. Наиболее известны вакцины для профилактики сибирской язвы, бруцеллёза, Ку-лихорадки, брюшного тифа. Однако большая часть живых вакцин — противовирусные. Наиболее известны вакцина против возбудителя жёлтой лихорадки, противополи-омиелитная вакцина Сэйбина, вакцины против гриппа, кори, краснухи, паротита и аденовирусных инфекций.

Векторные (рекомбинантные) вакцины Вакцины,полученные методами генной инженерии. Суть метода: генывирулентного микроорганизма, отвечающий засинтез протективных антигенов,встраивают в геном какого - либо безвредного микроорганизма, который прикультивировании продуцирует и накапливает соответствующий антиген. Примером

может служить рекомбинантная вакцина против вирусного гепатита Bвакцина против ротавирусной инфекции. Наконец, имеся положительныерезультаты использования т.н. векторных вакцин, когда на носитель - живойрекомбинантный вирус осповакцины (вектор) наносятся поверхностные белки

двух вирусов: гликопротеин D вируса простого герпеса и гемагглютинин вирусагриппа А. Происходит неограниченная репликация вектора и развивается Адек им ответ против вир инф об ти

ВОПРОС

На мембране клеток организма присутствуют продукты генов всех локусов, размещенных на обеих нитях 6-й хромосомы. Это означает, что HLA-гены наследуются по кодоминантному типу, т. е. одну хромосому ребенок наследует от матери, а другую – от отца. Как уже упоминалось, совокупность генов, расположенных на одной хромосоме, составляет гаплотип. Таким образом, у человека два гаплотипа и каждая клетка организма несет на себе диплоидный набор антигенов системы HLA, один из которых кодируется HLA-генами матери, а другой – отца. Исключение составляют половые клетки (яйцеклетка и сперматозоид), каждая из которых содержит в своем ядре только по одному гаплотипу.

Антигены гистосовместимости, выявляемые на клетках конкретного человека, составляют HLA-фенотип. Для его определения необходимо произвести фенотипирование клеток индивида. Как правило, “типируются” лимфоциты периферической крови. В данном случае не известно, какие именно HLA-антигены каким из двух гаплотипов родителей кодируются. Чтобы это определить, необходимо произвести типирование родителей, после чего можно установить гаплотипы обследуемого и, соответственно, его генотип – последовательность расположения генов на хромосоме. На практике HLA-фенотип записывают, соблюдая числовой порядок HLA-антигенов, согласно номенклатура

Задачи при HLA типировании могут стоять самые разные - биологическая идентификация (HLA-тип наследуется вместе с родительскими генами), определение предрасположенности к различным заболеваниям, подбор доноров для пересадки органов - при этом производится сравнение результатов HLA типирования тканей донора и реципиента. С помощью HLA типирования определяют, и насколько супруги сходны или различимы по антигенам тканевой совместимости, чтобы диагностировать случаи бесплодия.

HLA типирование предполагает анализ полиморфизма HLA и проводится двумя методами - серологическим и молекулярно-генетическим. Классический серологический метод HLA типирования основан на микролимфоцитотоксическом тесте, а молекулярный метод использует проведение ПЦР (полимеразную цепную реакцию).

Серологическое HLA типирование проводится на выделенных клеточных популяциях. Антигены главного комплекса гистосовместимости несут на себе в основном лимфоциты. Поэтому суспензию Т лимфоцитов используют в качестве основных носителей антигенов I класса, и суспензию В лимфоцитов для определения антигенов HLA II класса. Для выделения необходимых клеточных популяций из цельной крови используют либо центрифугирование, либо иммуномагнитную сепарацию. Считается, что первый способ может привести к ложноположительным данным, так как при этом происходит гибель части клеток. Второй способ признан более специфичным - при этом более 95% клеток остаются жизнеспособными.

Но основой постановки лимфоцитотоксического теста HLA типирования является специфическая сыворотка, содержащая антитела к различным аллельным вариантам антигенов HLA I и II классов. Серологический тест позволяет определить HLA-тип путем изучения того, какие из сывороток реагируют с лимфоцитами, а какие - нет.

Если между клетками и сывороткой происходит реакция, в результате на поверхности клетки образуется комплекс антиген-антитело. После добавления раствора, содержащего комплемент, происходит лизис и гибель клетки. Оценивают серологический тест HLA типирования с помощью флуоресцентной микроскопии по оценке позитивной (красная флуоресценция) и негативной (зеленая флуоресценция) реакций, или фазово-контрастной микроскопии по окраске ядер погибших клеток. Результат HLA типирования выводят с учетом специфичности прореагировавших сывороток и перекрестно реагирующих групп антигенов, интенсивности реакции цитотоксичности.

Недостатками серологического HLA типирования являются наличие перекрестных реакций, слабое сродство антител или низкая экспрессия HLA-антигенов, отсутствие белковых продуктов у ряда HLA-генов.

Более современные, молекулярные методы HLA типирования используют уже стандартизованные синтетические образцы, которые реагируют не с антигенами на поверхности лейкоцитов, а с ДНК и прямо указывают на то, какие антигены присутствуют в пробе. Молекулярные методы не требуют живых лейкоцитов, любая человеческая клетка может быть подвержена изучению, и для работы достаточно несколько микролитров крови или можно ограничиться соскобом со слизистой оболочки рта.

Молекулярно-генетическое HLA типирование использует метод ПЦР, первым этапом которой является получение чистой геномной ДНК (из цельной крови, лейкоцитарной суспензии, тканей).

Затем образец ДНК копируется - амплифицируется в пробирке с использованием праймеров (коротких одноцепочечных ДНК), специфичных к определенному HLA -локусу.

После ПЦР, в ходе многократного копирования, получается большое количество фрагментов ДНК, которое можно оценить визуально. Для этого реакционные смеси подвергают электролизу или гибридизации, и определяют, произошла ли специфическая амплификация, при помощи программы или таблицы. Результат HLA типирования представляется в форме всестороннего отчета на генном и аллельном уровнях. Из-за стандартизованности используемых образцов, молекулярное HLA типирование точнее серологического. Кроме того, оно дает больше информации (больше новых аллелей ДНК) и более высокий уровень ее детализации, поскольку позволяет идентифицировать не только антигены, но и сами аллели, обуславливающие, какой именно антиген присутствует на клетке.

 

БИЛЕТ

1)Определение и понятие аллергена. Классификация аллергенов. Факторы риска аллергических заболеваний.

Аллергены — это антигены, вызывающие у чувствительных к ним людей аллергические реакции. При попадании в организм они вызывают ответную реакцию со стороны иммунной системы, однако эта реакция неадекватна и влечет за собой воспалительные явления. Аллергены: чужеродные белки, липиды, мукополисахариды жив-ого или раст. происхождения, соедин. небелковой природы и низкомолекулярные вещ-ва - гаптены, приобретающие свойства аллергена после взаимодействия с белками крови или тканей человека. Аллергены: эндо- и экзоаллергены(инфекц. и неинфекц.). Экзоаллергенами, поступают в организм из окруж. среды. Это: пыльцевые, эпидермальные (перхоть, слюна и шерсть), бытовые, лекарственные, инсектные (яд и частицы тела пчел, ос, клещей), пищевые, химические (никель, хром,полимеры, лаки, краски), инфекцион.(микроорганизмы, частицы бактерий, вирусов, грибов и продуктов их жизнедеятельности, вакцины), паразитарные(возбудители паразитарных инфекций). Различные по своей природе аллергены могут иметь одинаковые антигенные детерминанты-возникает перекрестная сенсибилизация. Эндоаллергены, образуются в организме и представляют собой собственные, но видоизмененные белки. Эндоаллергенами: элементы физиологически изолированных тканей (хрусталик, щитовидная железа, яички, нервная ткань) при нарушении целостности барьеров, а также ткани, поврежденные инфекцион агентами, радиацией.

Факторы риска аллергических заболеваний: 1. генетически обусловленная предрасположенность к IgE-ответу, причем передается по наследству не болезнь, а совокупность генет. факторов, способствующих форм-ию аллергии. При наличии аллергии у одного из родителей вероятность развития ребенка составляет 30%, у обоих родителей – 60–70%. 2. Бытовые и профессиональные антигены-аллергены. В составе пыли есть весьма сильные антигены. Длительно воздействуя на иммунную систему, они ломают ее защитные механизмы и провоцируют развитие аллергии. Аналогичная ситуация складывается и в отношении профессиональных антигенов-аллергенов. Люди, имеющие по своей профессии длительный контакт с лекарствами, лаками и красками, металлами, самыми разнообразными химическими 3. Курение и злоупотребление алкоголем. П овреждение клеток слизистой оболочки дыхательной системы, приводит к формир. входных ворот для микробов, несущих на своей поверхности множество антигенов-аллергенов. Курение и алкоголь приводят к загрязнению организма токсинами, что вызывает большое количество сбоев в иммунной системе вплоть до формирования аутоаллергии, когда иммунная система перестает отличать свое от чужого. 4. Инфекции верхних дыхательных путей, приводят к тому, что в организме постоянно присутствуют патогенные микроорганизмы, наличие которых держит нашу иммунную систему в состоянии длительного напряжения. 5. Нерациональное, необдуманное использование парфюмерных и косметических средств, т.к. эти средства часто вступают в тесный контакт с нашей кожей, попадают в глаза, вдыхаются. Многие производители парфюмерии и косметики вводят в состав продукции большое количество вещ-в, которые, обладают свойствами сильных антигенов-аллергенов. 6. Употребление в пищу в большом количестве продуктов, содержащих в своем составе вещества, обладающие свойствами мощных антигенов-аллергенов( цитрусы, красных ягод, куриных яиц, консерванты, красители, эмульгатор) 7. Неправильно проведенная вакцинация или необдуманное введение сывороток. При вакцинации всегда необходимо строго соблюдать все сроки и дозир-ку.

2)Реакция «трансплантат против хозяина», меры профилактики. Условия, определяющие успешную трансплантацию клинике. В некоторых случаях сильнее оказывается трансплантат, т.е. до­нор, который своими лимфоидными клетками действует против реципиента. Этот феномен получил название реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ). Такая ситуация возникает при трансплантации костного мозга реципиенту, организм которого не способен отторгнуть трансплантатную ткань. Т-клетки донора при этом взаимодействуют с АТ-ми реципиента, вызывая РТПХ, которые вызывают болезни трансплантат против хозяина: болезни рант (малорослости) - у новорожденных животных после пересад­ки им взрослого костного мозга. Помимо малорослости, отставание психического и физического развития (у людей), а иногда и гибели реципиента.Чтобы трансплантат прижился необходимо подобрать пару, совместимую по главным АГ-енам гистосовместимости, по группе крови АВО и по Rh. Но такую пару сложно найти, идеальная пара - однояйцовые близнецы. В большинстве случаев сущность различия между донором и реципиентом по АГ МНС. Т.к. существует более 60 молекул АГ-енов МНС I и более 40 МНС II, то обеспечить совместимость по всем известным АГ практически невозможно, но наиболее лучшим результатом получится при совпадении МНС АГ-енов класса II, которые активируют Т-хелперы реципи­ента. В настоящее время существует 2 формы иммунодепресивной обработки реципиента: АГ-неспецифическая и АГ-специфическая. АГ- I неспецифическая обработка связана с подавлением или ослаблением активной иммунной системы по отношению ко всем АГ, в том числе и трансплантату. Чтобы вызвать неспецифическую иммунодепрессию организм реципиента облучают или вводят иммунодепрессивные препараты: стероиды, азатиоприн.

Специфическая иммуннодепрессия включает следующие приемы:

1.Индукция (выработка) толерантности в эмбрионный период раз­вития (для всех животных, кроме человека). 2Актиеное усиление толерант­ности. 3.Пассивное усиление толерантности.

Активное усиление толерантности заключается в предварительном внутривенном введении реципиента АГ-енов донора, что повышает выжи­ваемость трансплантата. Этот феномен носит название активного иммунно­го усиления толерантности, т.к. обусловлен активным иммунным ответом реципиента. Пассивное усиление толерантности обусловлено введением реципиенту антидонорских АТ. Активное и пассивное усиления подавляют реакцию лишь на АГ-ены данного донора и служат продлению выживаемости трансплантата.

Плод является наполовину чужеродным к организму матери, т.к. несет половину АГ от отце. Но при нормальном протекании беременности плод не отторгается, когда вне организма плацента и плацента отторгается. Существует ряд механизмов, которые защищают плод от отторжения:

1.Особенность строения плаценты, у человека это наличие трафабластов, которые омываются материнской кровью и окружен слоем кислого мукопротеида, который защищает плаценту от материнских Т-кпеток. 2.Материнские AT нейтрализуются в плаценте благодаря наличию в ней FC рецепторов, которые нейтрализуют материнские AT. 3.В плаценте образуется ряд веществ (а-глобулины и т.д.), которые тормозят активный иммунный ответ плаценты. 4.Клетки плода характеризуются низкой плотностью АГ гисто­совместимости, поэтому, хотя плод и является чужеродным АГ транспланта­та. Однако комплекс различных механизмов предотвращает конфликт между иммунными системами матери и плода.

3)Первичные ИДС фагоцитарной системы(ФС) комплемента- это врожденные нарушения иммунной системы, связанные с генетическими дефектами фагоцитарной системы. Дефекты продукции и функ. клеток ФС предрасполаг. к развитию пиогенных и грибковых инфекций. Клиника:1. Рецидивирующие и хронические инфекции верхних дыхательных путей, кожи, слизистых оболочек,ЖКТ.2 Гематологические дефициты: лейкоцитопении3. Аутоиммунные расстройства 4.Опухоли. Лечение:коррекции генетич. дефекта методами генной инженерии,профилактике инфекций, трансплантации костного мозга, замещения иммуноглобулинов, переливания нейтрофилов, заместительной терапии ферментами, терапия цитокинами, лечение сопутствующих инфекций. Дефициты ФС: 1. Синдром Чедиака-Хигаси – аутосомно-рецессивное заболевание, которое проявляется частичным альбинизмом кожи и глаз из-за неправильного распределения меланосом и плохого распределения пигмента, фотофобией, рецидивирующими клетками, склонностью к кровотечениям. Патогенез-нарушение подвижности фагоцитов и дефицит ферментов. Ярким признаком наличия этой болезни являются огромные цитоплазматические гранулы в нейтрофилах и эозинофилах. Также часто они бывают в цитоплазме нейронов и в циркулирующих лимфоцитах. Причиной заболевания является мутация гена, который отвечает за синтез лизосомальных белков, после чего наблюдается нарушение хемотаксиса, то есть под удар попадает цитотоксическая активность лимфоцитов. Также у больных детей наблюдается склонность аутофагоцитозу. Впервые о ней было упомянуто в 1943 году.В основном ею заболевают дети младшего возраста, их смерть часто наступает до 10 лет из-за злокачественных опухолей. Лаб.обследование:гранулоцитопения,дефектохемотаксиас нейтрофилов, ↓бактерицидности. 2. Гипер - IgE-синдром — это заб-ие, харак. резким повышением в сыворотке крови IgE (белков-иммуноглобулинов (белков, вырабатываемых клетками иммунной системы с целью защитить организм от чужеродных агентов)), осуществляющих иммунную защиту). Патогенез-нарушение хемотаксиса нейтрофилов и нарушение их переваривающей способности. IgE может способствовать развитию аллергической реакции, а значит, и возникновению воспаления, характеризующегося частыми инфекционными заболеваниями, грубыми чертами лица и аномалиями (нарушениями) скелета, развитием атопического дерматита. Симптомы: абсцессы, рецидивирующие пневмонии, отиты, дерматита, кандидоз, переломы костей после незначительных травмах,характерные черты лица: глубоко посаженные глаза, широкая переносица, выступающий массивный подбородок и широкий нос. Лаб.исследование: эозинофилия,+ кожные пробы с аллергенами, резкое ↑ IgD IgE, Содер-ие Т- и В-лимфоцитов норм,↓РБТЛ,фагоцитоз-норм,хемотаксис-нарушен 3. Хронический лимфогранулематоз - развивается вследствие врожденного дефекта бактерицидной функции нейтрофилов из-за дефектов ферментов, участвующих в образовании активных форм О2,ефицит НАД-НАДФ-оксидазы. Проявляется в течение 2лет в виде проявляющихся тяжелых инфекц.поражений кожи слизистых, гнойнички вокруг рта,ушей. При лаб.обследовании: лейкоцитоз,анемия, ↑СОЭ. В иммунограмме относит.норм показатели клеточн. и гумор.иммунитета,↑IgA IgM IgG.Фагоцитоз норм,↓показатели спонтанного и индуциров. НСТ-теста, Гистохимически в лейкоцитахвыявляется дефицит окислит-восстан.ферментов.

 

БИЛЕТ

1.Роль цитокинов в противоопухолевом иммунитете (ИЛ-1,ИЛ-2,ИЛ-12,ING- α, INF-ᵝ) Цитокины-это общее название медиаторов, являющихся белковыми или полипеетидными продуктами активированных клеток иммунной системы, опосредующих широкое и сложное вз-вие м/у клетками иммунно системы и другими клетками организма в процессах иммунного ответа и неспецифической защиты от антигенов самой разной природы. Цитокины подразделяются на: интерлейкины(факторы вз-вия м/у лейкоцитами), интерфероны(цитокины м противовирусной активностью), факторы некроза опухолей(цитокины с цитотоксической активностью), колониестимулирующие факторы(гемопоэтические цитокины) и хемокины(медиаторы, вызывающие хемотаксис).

ИЛ-1 - продуцируются моноцитами и макрофагами.оказывает прямое цитотоксическое д\ие на опухолев клетки, он стимулирует регенеративн процессы в костном мозге, индукцию иммунного ответа. Под его влиянием повыш-ся специф-ая цитотоксичность моноцитарно-макрофагальных клеток, стимулир-ся продукция вторичных цитокинов, стимулирует адгезию раковых клеток к эндотелию кровеносных сосудов-тем самым-развитие метастазов.

ИЛ-2 -прудоцируются Тх1. широкое применение при лечении рака (меланомы, рак легких, карцинома почек). Но полное исчезновение опухоли-редко. Применение высоких доз-ограничено, т.к. почечные токсич эфф-ты. Чаще в иммунотерапии ЛАК-клетками (в комбинации с интерферонами и ИЛ-12).

ИЛ-12 - синтез-ся макрофагами. Индуцирует развитие Т-хелперов1и увеличивает пролиф-ию, продукцию цитокинов и цитотоксич-ую активность Т-лимфоцитов. Высок.противоопух.акт-ть-при раке почек, меланома, карцинома толст кишечника.

IFN-α - явная антипролиферативная акт-ть. Обладает иммуномодулир-ей активность,оказ-ет стимулир-ее д-ие на NK-клетки.

IFN-γ- антипролиферативная акт-ть, т.к стимулирует их к диффер-ке, повышает экспрессии. HLA-антигенов 1,2 класса на клетках опухоли- повыш-ся возможность распознания их Т-лимфоцитами.

TNF-α- вызывает апоптоз опух клеток и развитие геморрагич-го некроза в ткани опухоли.Оказ-етиммуномодулир-ее д-ие: стимулирует выработку макрофагами ИЛ-1, способствует активации Т-киллеров и секреции ими IFN-γ, активации Тх1, а также активации NK-клетки.

2. Аутоиммунные заб-ия, механизм аутоиммунизации, клинические проявления, методы диагностики. Аутоиммунные заб-ия -в патогенезе ведущую роль играют аутореактивные лимфоциты, которые распознают антигены собств.организма как чужеродные и запускают патологические процессы, харак-ся деструкцией клеток-мишеней и тканей мишений,нарушение их функции,развитие хронического воспаления. Механизмы: 1антигенная мимикрия патогенов индуцирует иммунный ответ с перекрестной реактивностью с собственными антигенами(вирусы-постепенно вкл. в состав своего генома какие-то из генов этого организма) 2микробные суперантигены - вызывают поликлональную активацию лимфоцитов,какие то из клонов лимфоцитов могут войти в режим эффекторного иммунного ответа. 3. деструкция тканей патогеном проводит к попаданию ткан.антигенов в активированные ДК. ДК утрачивают способность к индукции толерантности к собственным антигенам и вместо этого запускать иммунный ответ. 4. Два ТКР на одном лимфоците - 30% перифер.лимфоцитов несут 2ТКР(специф. к патогену и аутоантигену). Активация патогеном приведёт к созданию клона лимфоцитов,которые будут работать в качестке эффекторов против обоих антигенов. 5. Нарушение функ.регуляторных Т-лимфоцитов. 6.нарушение баланса м/у пролиферацией и апоптозом лимфоцитов 7.ассоциация аутоиммунных заб-ий с определенными антигенами МНС. Для аутоиммун.заб-ий хар-но длит.хронич. течение с периодами ремиссий и обострений. Имеются конкретные аллели МНС 1-2 классов с которыми ассоциированы определенные аутоимм.заб-ия(тиреоидит Хашимото-аллель-dr5,СКВ-dr3,ревматоидный артрит- dr4).

Диагностика аутоимм. заб-й основывается на определении иммунного фактора, вызывающего повреждение органов и тканей организма.В диагностике ревматизма проводят определение ревматоидного фактора, в диагностике системной волчанки – LES клеток, антител против ядра и против ДНК, склеродермии антител Scl-70. Клиническое развитие болезни и симптомы заболевания могут служить источником полезной информации для установки

диагноза аутоиммунной болезни. Для развития склеродермии хар-но поражение кожи (очаги ограниченного отека, которые медленно подвергаются уплотнению и атрофии, формирование морщин вокруг глаз, сглаживание рельефа кожи), поражение пищевода с нарушением глотания, утончение концевых фаланг пальцев, диффузные поражение легких, сердца и почек. Для СКВ хар-но появление на коже лица (на спинке носа и под глазами) специфического покраснения в виде бабочки, поражение суставов.

 

3. Значение лабораторной диагностики состояния Т-и В-систем иммунитета и фагоцитарной системы в выборе метода иммунокоррекции. Иммунокорректоры – средства и воздействия (в том числе и лекарственные), обладающие иммунотропностью, которые нормализуют конкретное нарушенное то или иное звено иммунной системы (компоненты или субкомпоненты Т–клеточного иммунитета, В–клеточного иммунитета, фагоцитоза, комплемента). Таким образом, иммунокорректоры – это иммуномодуляторы «точечного» действия.

Для оценки состояния гуморального статуса используют определение основных классов иммуноглобулинов в сыворотке крови и в секретах слизистых.

Для оценки клеточного иммунитета, определяют содержание лимфоцитов и их субпопуляций.

Для оценки фагоцитарной системы чаще всего используется определение фагоцитарного индекса нейтрофилов и моноцитов;хемотаксиса;бактерицидности нейтрофилов и моноцитов

Пептиды костного мозга. Иммунорегуляторные пептиды костного мозга были впервые обнаружены в середине 1970-х годов российскими исследователями (авторы Р.В.Петров и А.А.Михайлова). Они получили название миелопептидов (МП). Был разработан и внедрен в медицинскую практику миелопептидный иммуномодулятор I поколения Миелопид.

Следствием иммунорегуляторного действия МП являются такие конечные эффекты, как усиление сниженного под влиянием вредных факторов иммунного ответа (МП-1), торможение роста разных типов опухолей (МП-2, МП-5), противобактериальный эффект (МП-3), индукция терминальной дифференцировки лейкозных клеток (МП-4, МП-6). Применяют Миелопид при вторичных иммунодефицитных состояниях с преимущественным поражением гуморального звена иммунитета, в том числе для предупреждения инфекционных осложнений после хирургических вмешательств, травм, остеомиелита и других патологических процессов, сопровождающихся воспалительными осложнениями, при неспецифических легочных заболеваниях, хронических заболеваниях дыхательных путей в стадии обострения (ларингиты, трахеиты, бронхиты, пневмонии); при хронических пиодермиях, атопическом дерматите и др., при острых лимфобластных и миелобластных лейкозах и неходжкинских Т- и В-клеточных лимфомах. У детей препарат применяется с 3- летнего возраста для профилактики ОРВИ – внутримышечно или подкожно по 1 инъекции через 1 день № 6.

На основе МП разрабатываются миелопептидные ИМ нового поколения с известной химической структурой и механизмом действия.

Серамил – ИМ с противобактериальным эффектом на основе МП-3, относится к группе ИМ с противобактериальной активностью. Препарат направленно действует на макрофагальное звено иммунитета и показан для антибактериальной терапии при лечении и профилактике инфекций, вызванных разными патогенными микроорганизмами. Зарубежных аналогов Серамила не существует. Стадия разработки – опытное производство.

Бивален – ИМ с противоопухолевым действием на основе МП-2.

Иммунокоррекция при недостаточности Т-клеточного звена иммунитета проводится, как правило, с применением препаратов-тимомиметиков (Тактивин, Тималин, Тимоген, Имунофан, Иммуномакс). Показаниями к их назначению являются: устойчивая лимфопения;
- уменьшение процентного содержания и/или числа общих Т-лимфоцитов CD3+, Т-хелперов CD4+;- наличие вирусной и/или грибковой инфекции (что косвенно может свидетельствовать о дисфункции Т-звена иммунитета);- повышение содержания Т-нулевых, двойных CD4+, CD8+ лимфоцитов;- снижение содержания активированных лимфоцитов или отсутствие их повышения при наличии ИВЗ. При Т-клеточной недостаточности в сочетании с активацией нейтрофилов/фагоцитов, преобладанием свободнорадикальных процессов и избыточной продукцией провоспалительных цитокинов (ФНО-альфа, ИЛ-1 и др.) препаратом выбора является Имунофан (обладающий, кроме того, антиоксидантной активностью). Возможно также сочетание тимомиметиков с антиоксидантами (Глутоксим, Мексидол).

Иммунокоррекция при недостаточности фагоцитарной системы и гуморальной недостаточности. Фагоциты являются первой линией защиты организма от всего чужеродного и от разрушенного и аномального «своего». Реакция фагоцитов на экзо- и эндогенные раздражения почти мгновенна. Препараты, которые используют для стимуляции фагоцитоза (Полиоксидоний, Миелопид, Ликопид, Метилурацил, Галавит и др.), часто активируют и анителообразование. Показаниями к применению стимуляторов фагоцитоза и анителообразования, по данным иммунологического обследования, являются:
- гипореактивность фагоцитов, с недостаточностью бактерицидности и нарушением других функций (синтез ИЛ, фагоцитоз, переваривание, хемотаксис);- недостаточность В-звена иммунитета — продукции антител (IgG) — при содержании IgG в сыворотке крови не ниже 800 мг%;- лейкопения и нейтропения.

 

 

БИЛЕТ

1.Основные функции Т-системы иммунитета. Антигензависимая и антигеннезевисимая дифференцировка Т-лимфоцитов. Строение антигенраспознающих рецепторов Т-лимфоцитов. Т-система иммунитета включает: тимус -место дифференцировки костномозговых предшественников Т-клеток (пре-Т-клеток) до потенциально зрелых форм, различные субпопуляции собственно Т-клеток (Т-хелперы, Т-киллеры); группу цитокинов, продуцируемых этими клетками. Основная функция системы связана с обеспечением клеточной формы иммунного реагирования — цитотоксическим (киллерным) разрушением генетически отличающихся клеток и тканей (чужеродных трансплантатов, раковых и вирустрансформированных клеток), а также с участием в регуляции как клеточного, так и гуморального иммунного ответа посредством включения в иммунный процесс Т-хелперов, Т-супрессоров и Т-клеточных цитокинов. Т-клетки имеют следующие особенности: 1) клональная организация Т-клеточного пула — способность потомков одной клетки (клона) реагировать только на один из множества антигенных пептидов: данное свойство Т-клеток является общим с В-клетками; 2) характер распознавания чужеродного антигена — в отличие от поверхностных иммуноглобулинов В-клеток, которые распознают собственно антигенный эпитоп, антигенраспознающий рецептор Т-клеток (TCR — Т-клеточный рецептор) взаимодействует с комплексом антигенный пептид (эпитоп) — молекулы МНС; 3) деление Т-клеток на субпопуляции: Т-киллеры/супрессоры и Т-хелперы/Т-клетки воспаления. Дифференцировка: антигензависимая- она вкл.:распознование антигена функ-но незрелыми т-лимфоцитами,ответнаяреакция на антигенв виде пролиферации и дифферен.зрелых тимоцитов-формир.распознающих рецепторов-селекция клонов-формир.субпопуляций,формир.Т-клеток памяти. Антигеннезависима я- предшественники т-лимфоцитов мигрируют в тимус и заселяют его корковую зону.Затем происходит стадии дифференцировки-размножение и 3% т-лимфоцитов выходят и заселяют органы. Строение антиген распознающих рецепторов- гетеродимер, состоит из двух цепей,ковалентно связанных м/у собой. Каждая цепь сост. из V- C-доменов.Вариабельные домены контактируют с антигенными детерминантами. Помимо основных V- и C-доменов в структуре ТКР имеется шарнирная область с цистеиновым остатком, образующим ковалентную связь между альфа- и бета-цепями, а также трансмембранный и короткий хвостовой участки. На клеточной мембране ТКР удерживается гидрофобной трансмембранной последовательностью аминокислотных остатков. Характерной чертой трансмембранного домена является присутствие в нем положительно заряженных аминокислотных остатков, имеющих весьма существенное значение при сборке и внутриклеточном транспорте рецепторного комплекса T-клеток. Короткие цитоплазматические хвосты погруженны в цитоплазму.

2.Механизмы взникновения аутоиммунных процессов(роль первичных и вторичных аутоантигенов,перекрестно-реагирующих и комплексных антигенов).. Аутоиммунные заб-ия -в патогенезе ведущую роль играют аутореактивные лимфоциты, которые распознают антигены собств.организма как чужеродные и запускают патологические процессы, харак-ся деструкцией клеток-мишеней и тканей мишений,нарушение их функции,развитие хронического воспаления. Механизмы: 1антигенная мимикрия патогенов индуцирует иммунный ответ с перекрестной реактивностью с собственными антигенами(вирусы-постепенно вкл. в состав своего генома какие-то из генов этого организма) 2микробные суперантигены - вызывают поликлональную активацию лимфоцитов,какие то из клонов лимфоцитов могут войти в режим эффекторного иммунного ответа. 3. деструкция тканей патогеном проводит к попаданию ткан.антигенов в активированные ДК. ДК утрачивают способность к индукции толерантности к собственным антигенам и вместо этого запускать иммунный ответ. 4. Два ТКР на одном лимфоците - 30% перифер.лимфоцитов несут 2ТКР(специф. к патогену и аутоантигену). Активация патогеном приведёт к созданию клона лимфоцитов,которые будут работать в качестке эффекторов против обоих антигенов. 5. Нарушение функ.регуляторных Т-лимфоцитов. 6.нарушение баланса м/у пролиферацией и апоптозом лимфоцитов 7.ассоциация аутоиммунных заб-ий с определенными антигенами МНС. Для аутоиммун.заб-ий хар-но длит.хронич. течение с периодами ремиссий и обострений. Имеются конкретные аллели МНС 1-2 классов с которыми ассоциированы определенные аутоимм.заб-ия(тиреоидит Хашимото-аллель-dr5,СКВ-dr3,ревматоидный артрит- dr4). Причины ведущие к срыву естественной толерантности и возникновению аутоиммунных процессов. Внутренние – передающиеся по наследству генные мутации. Есть два типа мутаций. Одни нарушают балансировку иммунной системы. При воздействии некоторых факторов человек заболевает аутоиммунным заболеванием, охватывающим многие органы и системы. В другом случае по наследству передаётся сама болезнь и у каждого поколения будут поражены одинаковые органы. К внешним причинам относят физические воздействия (излучение, радиация), либо возбудителей инфекционных заболеваний.

3.Интерпретация данных лейкограммы и иммунограммы. Лейкограмма- процентное соотношение различных видов лейкоцитов, определяемое при подсчёте[подсчете] их в окрашенном мазке крови под микроскопом. Лейкоциты в зависимости от плотности распределяются в мазках неравномерно: нейтрофилы, базофилы, эозинофилы — по периферии, ближе к краям; моноциты, лимфоциты — ближе к середине. При подсчёте[подсчете] лейкоцитов используют методы Шиллинга или Филиппченко. По Шиллингу определяют кол-во лейкоцитов в четырёх[четырех] участках мазка (четырёхпольный[четырехпольный] метод). Всего в мазке подсчитывают 100 — 200 клеток. Метод Филиппченко состоит в том, что мазок мысленно делят на 3 части: начальную, среднюю и конечную (трёхпольный[трехпольный] метод). Подсчёт[Подсчет] ведут по прямой линии поперёк[поперек] мазка от одного его края к другому. В каждой части подсчитывают одинаковое кол-во клеток. Всего учитывают 100—200 лейкоцитов. Обнаруженные клетки записывают в спец. таблицу дифференциального подсчёта[подсчета] (сетка Егорова). Для более быстрого и удобного определения Л. ф. применяют спец. 11-клавишный счётчик[счетчик]. Л. ф. зависит от вида животного, возраста, пола, конституции, породы, характера кормления и др. факторов.

↑лейкоцитов: Гнойно-воспалительные процессы (абсцесс, флегмона, бронхит, гайморит, аппендицит, и т.д.), ожоги и травмы, После операции, В период обострения ревматизма, При онкологическом процессе,При лейкозах или при злокачественных опухолях различной локализации происходит стимуляция работы иммунной системы.↓лейкоцитов: вирусные и инфекционные заболевания (грипп, брюшной тиф, вирусный гепатит, сепсис, корь, малярия, краснуха, эпидемический паротит, СПИД) Ревматические забол, лейкозы, Гиповитаминозы, Применение противоопухолевых препаратов (цитостатики, стероидные препараты)

Лейкоциты, или белые кровяные клетки, в свежей крови бесцветны, что отличает их от окрашенных эритроцитов. Число их составляет в среднем 4 — 9 x 10⁹ в 1 литре крови (т.е. в 1000 раз меньше, чем эритроцитов). Лейкоциты способны к активным движениям, могут переходить через стенку сосудов в соединительную ткань органов, где они выполняют основные защитные функции. По морфологическим признакам и биологической роли лейкоциты подразделяют на две группы: зернистые лейкоциты, или гранулоциты, и незернистые лейкоциты, или агранулоциты.

По другой классификации, учитывающей форму ядра лейкоцита, различают лейкоциты с круглым или овальным несегментированным ядром – т.н. мононуклеарные лейкоциты, или мононуклеары, а также лейкоциты с сегментированным ядром, состоящим из нескольких частей – сегментов, - сегментоядерные лейкоциты.

В стандартной гематологической окраске по Романовскому — Гимзе используются два красителя: кислый эозин и основной азур-II. Структуры, окрашиваемые эозином (в розовый цвет) называют эозинофильными, или оксифильными, или же ацидофильными. Структуры, окрашиваемые красителем азур-II (в фиолетово-красный цвет) называют базофильными, или азурофильными.

У зернистых лейкоцитов при окраске азур-II – эозином, в цитоплазме выявляются специфическая зернистость (эозинофильная, базофильная или нейтрофильная) и сегментированные ядра (т.е. все гранулоциты относятся к сегментоядерным лейкоцитам). В соответствии с окраской специфической зернистости различают нейтрофилъные, эозинофильные и базофильные гранулоциты.

Группа незернистых лейкоцитов (лимфоциты и моноциты) характеризуется отсутствием специфической зернистости и несегментированными ядрами. Т.е. все агранулоциты относятся к мононуклеарным лейкоцитам

Иммунограмма - это анализ крови, в котором исследуются компоненты иммунной системы. В нем учитывается количество клеток (лейкоцитов, макрофагов или фагоцитов), их процентное соотношение и функциональная активность, а также "вещества", которые эти клетки вырабатывают - иммуноглобулины (Ig) классов A, M, G, E, компоненты системы комплемента. Иногда в иммунограмме определяют "патологические антитела" - антинуклеарный фактор, ревматоидный фактор, антитела к фосфолипидам и другие.Назначают при аллергии,иммунодефицитных состояниях, гриб. Заб-ия. Иммунограмма состоит из оценки трех основных составляющих: 1-системы клеточного иммунитета; Т-лимфоциты принимают участие в регуляции иммунного ответа, в основном они обеспечивают защиту от грибов, вирусов, некоторых бактерий.В-лимфоциты после встречи с чужеродным агентом преобразуются в плазматические клетки, которые вырабатывают антитела (иммуноглобулины) против чужеродного агента. Нормальный показатель Т-лимфоцитов - 50-70%, В норме В-лимфоцитов - 6-20%. 2-уровня иммуноглобулинов в сыворотке крови; IgA защищает слиз оболочки, нейтрализует вирусы и бакт-ые токсины. IgM – эти антитела вырабатываются у плода. Они активируют комплемент, усиливают фагоцитоз. Это ранние антитела против грамотрицательных бактерий и вирусов. Повышенное содержание IgM указывает на наличие острого воспалительного процесса. IgG – поздние антитела. Они способны проникать через плаценту, нейтрализуют токсины, усиливают фагоцитоз. IgE – антитела этого класса участвуют в аллергических реакциях, анафилаксии, защищают организм от паразитов. Повышение уровня IgE бывает при аллергических реакциях, глистных инвазиях. Если в организме при инфекционном процессе нарастает содержание иммуноглобулинов класса IgG и IgM – это свидетельствует о том, что организм адекватно реагирует на инфекционный процесс, вырабатывает антитела для борьбы с чужеродными агентами. 3-фагоцитарной активности нейтрофилов. Снижение фагоцитарной активности нейтрофилов свидетельствует о том, что нейтрофилы плохо справляются со своей функцией захвата чужеродных агентов.Чаще всего иммунограмму выполняют для диагностики иммунодефицита. Методика- Кровь обрабатывают лизирующим раствором для разрушения эритроцитов или с помощью градиентного центрифугирования выделяют фракцию мононуклеарных клеток. Суспензию клеток инкубируют в темноте 15–30 мин с соответствующими флюоресцентно мечеными моноклональными АТ. Результаты регистрируют на проточном цитометре или с помощью люминесцентного микроскопа в течение не более 6 ч. Лимфоциты, фиксированные 1% параформальдегидом, можно хранить при +2–8 °С не более 24 ч. Анализ позволяет оценить количество лимфоцитов в субпопуляции, результаты сопоставляют с нормативными показателями, рассчитывают соотношение Тхелперов и Тцитотоксических лимфоцитов (иммунорегуляторный индекс), содержание активированных Тлимфоцитов и др. Определение процентного соотношения Тлимфоцитов, Влимфоцитов и NKклеток используют для характеристики иммунодефицитных и аутоиммунных состояний, опухолевых и вирусных заболеваний. Фенотипирование лимфоцитов применяют для подтверждения диагноза и мониторинга состояния иммунной системы пациентки в процессе лечения. Чувствительность и специфичность метода зависит от качества используемых реагентов.

 

 

БИЛЕТ

1)Понятие антигенной детерминанты (эпитопы) и носителя антигенов. Виды антигенной специфичности –видовая, групповая, типоспецифичность,тканевая,органоидная,стадиоспецифичность

Эпитопы - это часть молекулы антигена обычно характ химич и структурной индивид,которая обеспеч специфич антител и эффекторных Т-лимфоцитов,образ в процессе иммунного ответа. По структуре эпитопы бывают-линейные (состоят из непрерывных цепей аминокислотных остатков) и конформационные –предст более сложные трехмерные структуры.Т-лимф распознают линейниые,В-лимф конфлормационные детермин. Те эпитопы,которые распознают в-лимф и против которых синтезируются антитела назыв В-клеточными эпитопами или гаптенами.

Осн часть молекулы антигена называют носителем. Носитель антигена может содер свои собвственные антиген детерминанты.Они назыв детерминантами носителя.Они распознают Т-лимф и против них направлены реакции клеточного иммунитета.

Видовая специф-это специф благодаря которой представители одного вида организмов отличаются от особей другого вида.;Типоспецифичность-понятие,аналогичное видоспециф,но применяемое по отношению к микробным видам;Групповая-специфичность,которая обусловливает различие между различными группами внутри особей одного вида.Примером может быть системы изоантигеногв эритроцитов человека;Тканеспецифичность-антигенныеразличия между отдельными видами тканей одного и того же организма;Стадиоспецифичность-обусловлена антигенными различиями между клетками находящимися на разных стадиях дифференцировки.Пример:эмбриональные антигены.;Органоидная специфичность- понятие,отражающее антигенные различия между различными клеточными органоидами (ядрами,митох)

Основы трансплантационного иммунитета.Роль клеточного и гуморальных механизмов в отторжении трансплантанта.Подбор донора и реципиента по антигенам гистосовместимости.

.Трансплантация как термин используемый в иммунологии имеет отношениек переносу клеток тканей органов от одного к другому.

Основной феномен трансплант иммунитета заключается в том, что при пересадк генетически чужеродной ткани развивается реакция со стороны организма хозяйна направленная на отторжение трансплатанта. При этом степень выраженной иммунорлогической реакции отторжния тем больше, чем меньше ген.совместимость донора и реципиента. Она зависит также от типапересаживаемойткани.Виды трансплант (Аутотрансплантант,Изотрансплотант(обычно не отторгаются),Аллотрансплантант,Ксенотрансплант(алло и ксено всегда отторгаются)

. Осн проблема несовместимости такней, пусковой механизм трансплант иммунитета-это взаимодействие генетически различ клеток. Все остальные процессы являются следствием этого первичного события.Основными антигенами,ответственными за отторжение чужеродных тканей яв-ся антигены гистосовместимости,которые кодируются генами,называемыми генами совместимости.Ткани с идентичными антигенами назыв гистосовместимыми, они не вызывают иммунного отв,ведущего к отторжению.Ткани со значит антигенными различиями являются гистонесовместимыми,такие ткани вызывают иммунный ответ, то есть отторжение трансплант. Антигены, которые опред гистосовместим кодированы более чем в 40 различных ген.локусах,но локусы ответственные за выраженность отторжения локализованы внутри MHC-комплекса. Наибольшее кол-во трансплантацион антигенов содржится на лимфоцитах и на клетках кожи. (в меньшей поверх легких,печени,сердца и тд.). HLA антигены имеются на всех ядерных клетках и на тромбоцитах.Отсутствуют на эритроцитах и на клетках трофобласта пациента. К сильным трансплантационным антигенам вызывающим острую реакцию отторжения относятся HLA –антигены локусов А и В,при этом гистосовместимость в большей степени определяется локусом В.

При исследованиях клеточных механизмов отторжения было установлено, чо в реакции отторжения пересаженной ткани учавствуют и CD4 I CD8 популяции Т-клеток. Осн клетками –эффекторами в реакции отторжения яв-ся Тх-1 и цитотоксические Т-киллеры. Процесс отторжения можно разд на 2 стадии: 1) Стадия сенсибилизации,при которой наблюдается пролиферация клонов лимфоцитов,специфичных к антигенам пересаженной ткани.Во время этой стадии CD4 I CD8 клетки распознают антигены,экспрессированные на клетках трансплантанта и в ответ пролиферируют.Для активации Т-хелпера не