Лекции.Орг


Поиск:




Категории:

Астрономия
Биология
География
Другие языки
Интернет
Информатика
История
Культура
Литература
Логика
Математика
Медицина
Механика
Охрана труда
Педагогика
Политика
Право
Психология
Религия
Риторика
Социология
Спорт
Строительство
Технология
Транспорт
Физика
Философия
Финансы
Химия
Экология
Экономика
Электроника

 

 

 

 


Методы выявления геликобактеров(Л.И.Аруин.Хронический гастрит.Амстердам,1993,с.298




 

12а Метод Вартин-Старри

Фиксация в 10% формалине,проводка парафин.

Приготовление растворов:

1.Подкисленная вода-трижды дистиллированной воды 1000 мл

лимонной кислоты 10 г

2.Раствор нитрата серебра:нитрат серебра 2,0 г

подкисленная вода 100,0 мл

Для приготовления 1%-го раствора добавить равный объем подкисленной воды

3.Раствор гидрохинона:гидрохимнон 0,15г

подкисленная вода 100 мл

4.Раствор желатина:особо чистый желатин 10,0 г

подкисленная вода- 200 мл

5.Проявитель: 2% раствор нитрата серебра-1,5 мл

5% раствор желатина -3,75 мл

0,15% раствор гидрохинона -2,0 мл

 

растворы подогреть до 50-60 град.С,смешать в указанном порядке,использовать немедленно

 

Окраска:

1.Депарафинированные срезы довести до подкисленной воды

2.1% раствор нитрата серебра при 55-60 град.С-30 мин.

3.Проявитель-3-5 мин(срезы ставновятся коричневыми)

4.Промыть в теплой воде(55-60 град),затем в дистиллированной воде

5.Обезвоживание,просветление,бальзам.

РЕЗУЛЬТАТЫ:Геликобактеры черные,хорошо видна их изогнутая форма,фон-желтовыатый или кориневый

 

 

12б 2-й метод Вартин-Старри

1.Депарафинированные срезы помещают в раствор,содержащий 20,0 мл 5 г на л

азотнокислого серебра в ацетатном буфере рН 4 и облучают 1 мин микроволновым

процессором.

2.Без отмывания срезы переносят в свежеприготовленный проявитель(10 20 г на литр азотнокислого серебра + 50 г желатины+14 мл 1,5 г на литр гидрохинона в ацетатном

буфере в ацетатном буфере при рН 4 при 60 град.С,промывают в ацетатном буфере при 60 град.и в дистиллированной воде

3.Фиксируют в 30г на литр тиосульфата натрия

4.Промывают,фиксируют,обезвоживают,заключают в бользам

РЕЗУЛЬТАТЫ:геликобактеры окрашиваются в черный цвет

 

12в Метод Гимзы:

Растворы:

1 Основной раствор:Краска Гимзы-1,0г,глицерин-54 мл,спирт 96%-84 мл(профильтровать)

2.Рабочий раствор:основной раствор-1,0 мл,дистилл.вода -38,0 мл,0,1% раствор углекислого калия-2,0 мл

 

ОКРАШИВАНИЕ:

1.Депарафинированные срезы в дистилл.воду на 10-15 мин

2.Рабочий раствор 20 мин

3.Промывка в дистиллир.воде.Обезвоживание,просветление,бальзам

РЕЗУЛЬТАТЫ6геликобактеры окрашиваются в синий цвет

 

12г Метод с карболовым фуксином:

Реактивы:

Основной фуксин 0,4 г+фенол кристалл. 2,0 г,+абсолютный спирт 4,0 мл,+дистилл.воды 100,0 мл

Окрашивание:

1.Депарафинированные срезы в краситель на 5 мин

2.Ппромыть в проточной воде

3.Промыть в ацетоне

 

Срезы можно не заключать и просматривать под иммерсией

РЕЗУЛЬТАТЫ:геликобактеры темно-красные

 

 

12д Окраска толуидиновым синим:

Реактивы:

Натрия ацетат 1,943 г,натрия барбитурат 2,943 г,дистиллированной воды до 100 мл(основной раствор)

К 10 мл основного раствора добавить 22 мл М:10 раствора соляной кислоты,

18 мл дистиллированной воды и 1 мл 1%-го толуидинового синего О

А-двуосновной ацетат натрия(№ НСО)-9,465 г

дистиллир.воды до 1 л

Б-кислый фосфат калия(КН РО)-9,08

дистилл.воды до 1 л

К 25 мл раствора А добавить 25 мл раствора Б и 1 мл 1% толуидинового синего.

Продолжительность окрашивания 10-15 мин

РЕЗУЛЬТАТЫ:геликобактеры и ядра клеток в т.ч.,ПМЯ лейкоцитов окрашиваются в темно-синий цвет,фон слабый.

 





Поделиться с друзьями:


Дата добавления: 2015-09-20; Мы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 477 | Нарушение авторских прав


Поиск на сайте:

Лучшие изречения:

Надо любить жизнь больше, чем смысл жизни. © Федор Достоевский
==> читать все изречения...

2407 - | 2077 -


© 2015-2025 lektsii.org - Контакты - Последнее добавление

Ген: 0.013 с.