Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


ћетодические указани€ к практическому заданию 30




 

ћетод определени€ гиалуронидазы

√отовитс€ гиалуронова€ кислота из пупочных канатиков. ƒл€ этого свежие пупочные канатики очищаютс€ от крови, разрезаютс€, освобождаютс€ от сосудов, измельчаютс€ ножницами, взвешиваютс€, заливаютс€ двойным количеством воды и вар€тс€ до оседани€ кусочков на дно (до кипени€ не доводить). –аствор пропускают через марлевый фильтр. ‘ильтрат €вл€етс€ гиалуроновой кислотой.

2-миллиардна€ взвесь суточной агаровой культуры бактерий разливаетс€ в пробирки, добавл€етс€ рабочее количество гиалуроновой кислоты. ќбъем жидкости довод€т до 1 мл физратвором. ƒобавл€етс€ по 3 капли 15 %-й уксусной кислоты. »нгредиенты осторожно смешивают и учитывают результат.

— уксусной кислотой гиалуронова€ кислота должна давать сгусток.

≈сли штамм продуцирует гиалуронидазу высокой активности, муциновый комочек образуетс€ только в шестой пробирке (контроль). ¬ опытных пробирках жидкость будет равномерно мутной. ≈сли активность фермента невелика, то образование сгустка наблюдаетс€ только в первых 2 или 3 пробирках. ѕри отрицательной реакции во всех пробирках образуютс€ сгустки.

«адание 31. ќпределение нейраминидазной активности микробов:

- культуральную жидкость 72-часовой бульонной культуры синегнойной палочки залить по 0,2 мл в пробирки, добавить по 0,4 мл смеси овомуцина (€ичный белок) пополам с фосфатным буфером 0,1 ћ рЌ 6,0;

- после одночасового инкубировани€ в термостате при t 37 ∞— в пробирки внести по 0,4 мл 4,0 %-го арсенита Na в 0,5 н растворе серной кислоты. —месь встр€хнуть до исчезновени€ желтой окраски;

- затем добавить по 0,3 мл 0,1 ћ раствора тиобарбитуровой кислоты, рЌ 9,0 и пробирки поместить в кип€щую вод€ную баню на 5Ц7 мин, охладить на льду и в каждую из них внести по 5 мл бутанола;

- по€вл€ющеес€ интенсивное окрашивание смеси свидетельствует о наличии нейраминидазы;

- сделать заключение по заданию.

 

«адание 32. ќпределение про€влени€ действи€ микробных токсинов:

- демонстраци€ и определение гемолитического действи€, вызываемого стафилококками, стрептококками, кишечной палочкой на кров€ном агаре;

- столбн€чного, ботулинического экзотоксина на мышах (на таблицах и слайдах);

- сделать заключение по заданию.

«адание 33. ќпределение лизоцимной активности бактерий:

- взвесь миллиардной суточной культуры Micrococcus 0,2 мл засеить в слой 0,7 %-го питательного агара в чашке ѕетри;

- на поверхность подсушенного агара (с микрококком) петлей в виде бл€шек нанести суточные культуры исследуемых штаммов. Ќа одну чашку засеить до 9 исследуемых штаммов;

- посевы инкубировать в термостате в течение 24 ч при 37 ∞—;

- учесть наличие зон лизиса микрококка вокруг колонии исследуемой культуры с помощью бинокул€рной лупы в мм;

- сделать заключение.





ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-05-07; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 430 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

Ћогика может привести ¬ас от пункта ј к пункту Ѕ, а воображение Ч куда угодно © јльберт Ёйнштейн
==> читать все изречени€...

515 - | 525 -


© 2015-2023 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.012 с.