Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


«ан€тие 10




ќбща€ вирусологи€. Ѕактериофаги.

ѕрименение бактериофагов в медицине

 

—тудент должен:

Х знать:

- принципы универсальной классификации вирусов;

- пон€тие о вирионе, ультраструктуре;

- методы культивировани€ вирусов;

- морфологию и ультраструктуру фагов; взаимодействие фагов с бактериальной клеткой, практическое применение фага;

Х уметь:

- идентифицировать микробы с помощью фага;

- определ€ть фаговар, выдел€ть бактериофаги из объектов.

 

¬опросы дл€ проверки исходного уровн€ знаний

1.  лассификаци€ вирусов. —труктура и химический состав вирусов.

2. ќсобенности репродукции –Ќ - и ƒЌ -содержащих вирусов, плюс –Ќ  - и минус –Ќ  вирусов.

3. “ипы взаимодействи€ вируса с клеткой. —тадии репродукции вирусов.

4. ћетоды культивировани€ вирусов. »ндикаци€, идентификаци€ вирусов.

5. ѕрирода и свойства бактериофагов (фагов), особенности химического состава. ќсновные морфологические группы фагов. јнатомическое строение -четного фага.

6. ¬ирулентные фаги, стадии их взаимодействи€ с бактериальными клетками (продуктивна€ инфекци€).  рива€ одиночного цикла размножени€ фага.

7. ”меренные фаги, особенности их взаимодействи€ с бактериальной клеткой. ѕрофаг, €вление лизогении. ‘агова€ конверси€.

8. ¬ыделение фага из окружающей среды. ќпределение титра фага методом √рациа.

9. ѕрактическое применение фага: фагодиагностика, фаготипирование, фагопрофилактика и терапи€.

 

—амосто€тельна€ работа студентов

 

«адание 22. –ассмотреть чашки с Ђнегативнымиї колони€ми вирулентных и умеренных фагов, отметить их отличи€.

 

ћетодические указани€ к выполнению работы

 

1. Ѕактериофаги Ц вирусы бактерий, способные в них размножатьс€ (продуцироватьс€), при этом бактериальные клетки лизируютс€. “акой тип взаимодействи€ с клеткой (продуктивна€ инфекци€) характерен дл€ вирулентных фагов. ”меренные фаги способны не только репродуцироватьс€ в бактериальных клетках и вызывать их лизис, но и переходить в скрытое состо€ние (профаг), при этом бактерии остаютс€ жизнеспособными и станов€тс€ лизогенными.

–ассмотреть на таблицах и электронограммах различные морфологические типы фагов, изучить анатомические строение -четного фага, зарисовать схему строени€, отметив детали анатомической структуры.

2. ¬ыделени€ бактериофага из испражнений, сточной воды, почвы. »следуемый материал внос€т в ћѕЅ. »нкубируют в термостате (иногда добавл€ют те бактерии, к которым хот€т выделить фаг), затем освобождаютс€ от бактерий фильтрованием. ‘ильтрат засевают на чашки с агаром совместно с бактери€ми (к которым хот€т получить фаг) и через сутки инкубации при 37 ∞— наблюдают на фоне роста культуры стерильные п€тна Ц Ђнегативныеї колонии фага.

3. ћетод агаровых слоев √рациа. явл€етс€ точным методом титровани€ бактериофага и незаменим в работе с фагами. “итром фага называетс€ количество фаговых частиц в 1 мл препарата фага. »спытуемый фаг и бактериальные клетки смешивают в пробирке с расплавленным 0,7 %-м агаром, смесь выливают в чашку с ћѕј, она застывает в виде второго верхнего сло€. ѕосле инкубации в термостате в этом слое размножаютс€ бактерии, дава€ сплошной, равномерный рост. Ќа месте попадани€ фаговых частиц происходит гнездный лизис и образуютс€ Ђнегативныеї колонии.  оличество образовавшихс€ Ђнегативныхї колоний соответствует количеству фаговых частиц, внесенных в слой агара, что дает возможность подсчитать титр фага.

ѕриготовление разведение фага (10Ц10):

0,7 %-й агар (45Ц50 ∞—) + 0,1 мл бактериальной культуры. ”чет: на чашке с разведением 10 образовалось 150 Ђнегативныхї колоний. “итр Ц 150 × 10 = 1,5 × 10, т.е. такое количество фаговых частиц содержитс€ в 1 мл фага.

ќпределить титр фага по готовым чашкам путем подсчета Ђнегативныхї колоний и умножени€ на указанное разведение.

4. ‘аготипирование примен€етс€ дл€ определени€ фаговара внутри идентифицируемого вида бактерий. ћетод имеет существенное значение при дифференциации брюшнотифозных бактерий, стафилококков; он позвол€ет установить источник инфицировани€. ќтметить результаты фаготипировани€:

а) стафилококков набором типовых фагов;

б) брюшно-тифозных бактерий Ц Vi -фагами.

ќпыт ставитс€ следующим образом: чашки с ћѕј по дну расчерчены на квадраты по числу использованных типовых фагов. »спытуема€ культура засе€на на поверхность ћѕј газоном. Ќа квадраты, соответствующие наименовани€м, нанесены капли типовых фагов. „ашки выдерживают в термостате в течение 24 ч. Ќа месте действи€ определенного бактериофага образовались п€тна лизиса. ќбозначени€ типовых фагов, давших лизис, соответствуют наименованию фаговара.

Ќапример, изучаема€ стафилококкова€ культура лизировалась фагами 29, 77 и 80. ‘аговар = 29/77/80. Ѕрюшнотифозные культуры подвергаютс€ фаготипированию только тогда, когда они лизируютс€ Vi- фагом. ќн наноситс€ на центральный квадрат чашки, засе€нной изучаемой культурой. “иповые фаги ¬, —, ƒ и другие нанос€тс€ на квадраты вокруг центрального. ‘аговар брюшно-тифозных бактерий записываетс€ по фагу, вызвавшему лизис.

–ассмотреть демонстрацию лечебно-профилактических препаратов бактериофага. ѕримеры препаратов занести в тетрадь.

 





ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-05-07; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 631 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

ƒаже страх см€гчаетс€ привычкой. © Ќеизвестно
==> читать все изречени€...

729 - | 589 -


© 2015-2023 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.008 с.