Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


√енетические рекомбинации




Ёто обмен генетического материала мужду бактери€ми путем встраивани€ фрагмента хромосомы бактерии донора в хромосому бактерии рецепиента в процессе трансформации, трансдукции или коньюгации. ќбразующиес€ рекомбинанты несут хромосому рецепиента, в которую включаютс€ только отдельные фрагменты хромосомы донора (в этом существенное отличие от полового процесса эукариотов, потомство которых получает полный хромосомный набор обоих родителей).

I.  онъюгаци€ Ц передача генетического материала от бактерий доноров к реципиентам путем их непосредственного контакта.

ѕоставить опыт коньюгации по передаче маркеров pro, thr-leu в скрещивании типа Hfr × F у кишечной палочки, дл€ этого в опыт берут:

1) E.coli с Hfr Ц донор с генотипом pro+, thr+, leu+, str чувствительный;

2) культуру-рецепиент с генотипом pro-, thr-, leu-, str thr-leu.

ѕолучение бактериальных культур. —уточные культуры пересевают на бульон и выращивают при хорошей аэрации в течение 3 часов.

ќпыт коньюгации провод€т в чашках с селективной средой Ц минимальным агаром с добавлением глюкозы и стрептомицина.

ѕостановка опыта коньюгации:

1. ¬ опытную пробирку в отношении 1:10 внос€т культуру донора (0,1 мл) и реципиента (0,9 мл). —крещиваемую смесь инкубируют при 37 ∞— в течение 30 мин. Ётого времени достаточно дл€ вхождени€ проксимальных маркеров pro, thr, leu. ѕри необходимости передачи всех хромосом смесь выдерживают 2 ч.

2. —тав€т два контрол€: донора и рецепиента. ќбе культуры развод€т в 100 раз (0,1 мл культуры + 9,9 л физиологического раствора) и высевают по 0,1 мл на чашки с селективной средой, на которой они расти не могут, так как культура-донор чувствительна к стрептомицину, а рецепиент €вл€етс€ ауксотрофом.

3. ѕосле инкубации скрещиваемую смесь развод€т на 100 раз физиологическим раствором и засевают в обьеме 0,1 мл на селективную среду, на которой будут расти только прототрофные рекомбинанты. ќпыт коньюгации учитывают через 24Ц48 ч. Ќа контрольных чашках роста быть не должно, на опытной чашке вырастут рекомбинанты, число которых подсчитывают.

II. “рансдукци€ Ц перенос генетического материала от бактерий-доноров к реципиентам с помощью трансдуцирующего фага. –азличают неспецифическую (общую) трансдукцию и специфическую. ѕри неспецифической фаг (–1, –22) может включать различные фрагменты бактериальной хромосомы и передавать их клеткам-реципиентам. ѕри специфической трансдукции возможен перенос только строго определенных генов. —пецифически трансдуцирующим фагом €вл€етс€ фаг Ђл€мбдаї, который способен переносить гены gal и bio.

ќпыт по передаче gal маркера кишечной палочке. Ѕерут:

1) трансдуцирующий фаг Ђл€мбдаї, выделенный из лизогенной культуры донора E.coli gal+ путем индукции ”‘-светом;





ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-05-07; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 655 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

ѕобеда - это еще не все, все - это посто€нное желание побеждать. © ¬инс Ћомбарди
==> читать все изречени€...

2015 - | 1870 -


© 2015-2024 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.009 с.