Цель: освоить методику испытания противомикробной активности антисептика профилактического назначения.
Материалы:
Стерильные чашки Петри – 8 шт., пробирки с 10 мл 1% пептонной воды – 8 шт., пробирки с 4,5 мл 1% пептонной воды – 24 шт., чашки с МПА – 8 шт., стерильные пипетки на 1-2 мл – 24 шт., пастеровские пипетки – 8 шт.
I этап:
1. Вымыть руки теплой водой с туалетным мылом (2 минуты).
2. Высушить руки на воздухе.
3. Провести смывы с кожи 2-х дистальных фаланг указательного, среднего и безымянного пальцев одной руки в чашке с 10 мл 1% пептонной воды путем втирания в дно чашки (контроль).
4. Выполнить обработку кожи рук антисептиком путем тщательного втирания препарата в кожу дважды по 5 мл в течение 5 минут.
5. Провести смывы с кожи дистальных фаланг пальцев другой руки в чашке с 10 мл 1% пептонной воды путем втирания в дно чашки (опыт).
6. Выполнить посевы смывов (рис.9).
0,5 мл смывной жидкости из чашки Петри перенести в пробирку с 4,5 мл 1% пептонной воды и далее приготовить разведения от 10-1 до 10-3.
Все разведения смывов посеять по 0,05 мл на соответствующие сектора чашек Петри с МПА.
II этап:
9. Подсчитать количество колоний на секторах чашек.
10.Определить концентрацию жизнеспособных бактерий (КОЕ/мл) в контрольных и опытных высевах и десятичные логарифмы числа выживших микробов.
Формула для определения концентрации жизнеспособных бактерий (КОЕ/мл):
N=n×20 ×10x,
где: n – число колоний на питательной среде; 20 – коэффициент перерасчета посевного объема; 10х – фактор разведения.
11.Рассчитать фактор редукции (разница между десятичными логарифмами КОЕ/мл в контроле и опыте).
Примеры расчета показателей:
Число колоний на секторе «10-3» в контроле 5 шт., КОЕ/мл – Nк=5×20×103=1 ×105; десятичный логарифм – lnк=5,0.
Число колоний на секторе «10-1» в опыте 4 шт., КОЕ/мл – Nо=4×20×101=0,8×103
десятичный логарифм – lnо=3,9.
RF (фактор редукции) = lnк- lnо= 6,0-3,9=2,1 ln
Значения десятичных логарифмов чисел определяются по таблицам или с помощью калькулятора.
По отношению к собственной микрофлоре рук фактор редукции должен быть > 2,0 ln.
Чашка Петри со 0,5 мл 0,5 мл
смывной жидкостью
0,5 мл 10-1 10-2 10-3
по 0,05 мл 
 |
МПА
Рис. 9. Схема выполнения посевов при испытании противомикробной активности антисептика профилактического назначения
