Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


ћетодика контрол€ стерильности противомикробных препаратов




÷елью контрол€ €вл€етс€ обнаружение живых микробов в √Ћ‘ противомикробных препаратов, которые отнесены к категории стерильных. »спытание на стерильность провод€т в асептических услови€х: в боксах, в стерильной одежде, обработанными антисептиками руками, использу€ стерильные инструменты, посуду и среды. ƒл€ малых объЄмов испытуемого препарата обычно используют метод пр€мого посева, дл€ больших объЄмов - метод мембранных фильтров. ¬ том и другом случае посев провод€т на одни и те же стандартные среды, которыми €вл€ютс€:

Ј жидка€ тиогликолева€ среда, рЌ 7,2 (дл€ аэробных и анаэробных бактерий)

Ј жидка€ среда —абуро, рЌ 5,6 (дл€ грибов).

ќбе среды стерилизуют 15 мин насыщенным паром при температуре 121о—.

ћетод пр€мого посева. »спытуемый лекарственный препарат засевают в стерильные колбы (пробирки) со средами в соотношении 1:10, исход€ из объЄма контролируемой единицы √Ћ‘: при объЄме менее 1 мл засевают весь объЄм, 1-4 мл - 1 мл; 5-19 мл - 2 мл; 20-100 мл - 2-4 мл; более 100 мл - 10 мл. ќдновременно став€т контроль на нейтрализацию противомикробного вещества разведением, дл€ чего в посевы таких же объЄмов и тех же сред внос€т по 0,1 мл взвеси суточных культур (посевна€ доза около 1000 бактерий) тест-штаммов золотистого стафилококка, кишечной палочки и сенной бациллы. ѕосевы инкубируют 14 дней: тиогликолевую среду - при 3-35о—, среду —абуро - при 20-25о—. ѕо мере помутнени€ среды или в конце инкубации (14 день) делают высев на среды с последующим приготовлением мазка и окраской его по методу √рама. ≈сли после 14-дневной инкубации в опытных колбах (пробирках) нет микроорганизмов, а в контроле нейтрализации есть рост, то испытуемый препарат считаетс€ стерильным; при наличии роста в опытных и контрольных посевах испытуемый препарат оцениваетс€ как нестерильный. ѕри испытании на стерильность мазей, паст, гелей, эмульсий на жировой основе, а также растворов препаратов в маслах, образец (0,1 мл (г)) асептически отобранного испытуемого препарата внос€т в колбы, содержащие стекл€нные бусы, 100 мл 1/15 ћ фосфатного буфера и эмульгатор твин-80 в концентрации 2,5%. —одержимое колб подогревают до 41о—, встр€хивают до получени€ однородной эмульсии, после чего по 5 мл полученной эмульсии внос€т в колбы с 40 мл тиогликолевой среды и среды —абуро. ƒальнейший ход исследовани€ и оценка такие же, как при испытании растворов. ћетодика санитарного и внутреннего контрол€ за микробной контаминацией нестерильных противомикробных препаратов. —огласно √осфармакопее, выпускаемые в Ћѕќ нестерильные лекарственные средства не должны содержать представителей семейства энтеробактерий, золотистых стафилококков и синегнойных бактерий в объЄме 10 мл. ¬ препаратах, предназначенных дл€ применени€ на коже, допускаетс€ присутствие не более 200 сапрофитических бактерий в 1 г (мл); в препаратах перорального применени€ - не более 1000 бактерий и 100 грибов в 1 мл (г). “акие же требовани€ предъ€вл€ютс€ при осуществлении текущего и санитарного контрол€. »меютс€ дополнительные требовани€ к √Ћ‘ дл€ детей.

ѕодготовка препарата к исследованию. ƒл€ испытани€ образец препарата готов€т в форме раствора, суспензии или эмульсии. “вЄрдые √Ћ‘ (порошки, таблетки, драже и др.) измельчают и развод€т в стерильном фосфатном буфере 1:10. ∆идкие √Ћ‘ (растворы, капли, настои, отвары, сиропы, лосьоны и др.) разбавл€ют стерильным фосфатным буфером также 1:10. ћ€гкие √Ћ‘ (мази, пасты, свечи, эмульсии и др.) готов€т к испытанию по такой же методике как при испытании на стерильность (см.).

ќпределение общего микробного числа. ѕри титрационном методе основное разведение развод€т в 10 раз фосфатным буфером или 0,5% раствором хлорида натри€ с 0,1% желатином. ѕо 1 мл основного (1:10) и дополнительного (1:100) разведений внос€т в 2 стерильные чашки, заливают 20 мл расплавленного и остуженного до 48-50о— сахарного ћѕј. ѕосевы инкубируют при 30- 35о— 48 часов, после чего подсчитывают число колоний и рассчитывают среднее число колониеобразующих единиц ( ќ≈) в 1 мл (г) цельного испытуемого препарата. —реднее число  ќ≈ в посеве основного разведени€ дл€ кожных антибиотиков и антисептиков должно быть не больше 10, дл€ пероральных - не больше 100, в дополнительном разведении - соответственно не больше 1 и 10. ” сильных антибиотиков и антисептиков в посеве основного разведени€ может наблюдатьс€ торможение роста или полное отсутствие роста, вызванное ингибирующим действием остаточной концентрации препарата. ¬ разведении 1:100 такое €вление мало веро€тно. “ем не менее, в таких случа€х лучше использовать метод мембранных фильтров. »спытание √Ћ‘ на общее содержание в них грибов провод€т также способом пр€мого посева, но на плотную среду —абуро, которую инкубируют 5 суток при 20-25о—. ќпределение присутстви€ в √Ћ‘ противомикробных препаратов энтеробактерий, стафилококков и синегнойных бактерий провод€т способами пр€мого посева или мембранных фильтров. ѕри способе пр€мого посева 10 г (мл) образца препарата засевают на 100 мл среды обогащени€. ƒл€ энтеробактерий такой средой €вл€етс€ бульон ’оттингера, дл€ стафилококков и синегнойных бактерий - 5% солевой бульон. ѕосевы инкубируют 48 часов при 30-35о—, после чего делают пересев со среды ’оттингера на среду Ёндо, из одной колбы солевого бульона - на ∆—ј (на стафилококки), из другой колбы с солевым бульоном - на среду  инг ј (дл€ вы€влени€ пигмента). »дентификаци€ выделенных культур проводитс€ по тем же тестам, как и в других случа€х выделени€ этих бактерий из объектов внешней среды. ѕри отсутствии в посевах 10 г образца препарата энтеробактерий, золотистых стафилококков и синегнойных бактерий делаетс€ вывод о пригодности препарата дл€ использовани€ в лечебных и профилактических цел€х. ћетод пр€мого посева на среды может дать искажЄнные результаты в случа€х, если разведение препарата в 10 раз недостаточно дл€ исключени€ противомикробного действи€ препарата. ¬ этих случа€х необходимо параллельно ставить контроль на нейтрализацию с типовыми тест-штаммами кишечной палочки, золотистого стафилококка и синегнойных бактерий. Ѕолее надЄжные результаты даЄт испытание методом мембранных фильтров.






ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-05-07; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 1129 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

¬ы никогда не пересечете океан, если не наберетесь мужества потер€ть берег из виду. © ’ристофор  олумб
==> читать все изречени€...

519 - | 495 -


© 2015-2023 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.012 с.