Цель: Освоить методику контроля качества стерилизации.
Задания:
1. Подготовить к стерилизации и простерилизовать стеклянные пипетки,
2. Провести контроль качества стерилизации.
Материалы: суховоздушный стерилизатор, пипетки стеклянные, бумага плотная (крафт), бульон Хоттингера, тиогликолевая среда, бульон Сабуро, реактивы для окраски по Граму.
Методика стерилизации:
1. Провести предстерилизационную очистку и дезинфекцию пипеток: а) погрузить пипетки на 15 минут в 3% раствор перекиси водорода с 0,5% препарата типа «Лотос»; б) промыть пипетки струёй тёплой воды в течение 1 минуты; в) просушить;
2. Завернуть пипетки в плотную (крафт) бумагу;
3. Простерилизовать пипетки в суховоздушном стерилизаторе при режиме: температура 180оС, экспозиция 60 минут;
4. После охлаждения на свободном конце упаковки указать дату и способ стерилизации.
Методика контроля качества стерилизации (рис.4):
1. В асептических условиях над пламенем спиртовки втянуть стерильные среды Сабуро, Хоттингера, тиогликолевую среду до половины пипетки и выдуть её обратно в пробирку (на каждую среду отдельная пипетка);
2. Среды Хоттингера и тиогликолевую поместить в термостат при температуре 32оС, бульон Сабуро оставить при температуре 20-22 оС;
3. Наблюдать за помутнением среды в течение 8 дней;
4. В случае помутнения сделать препарат-мазок, окрасить его по Граму, микроскопировать для констатации наличия бактерий.
5. Сделать заключение: стерилизация считается качественной, если во всех средах при восьмидневной инкубации не появился рост бактерий.
Рекомендации по выполнению задания:
1. Подготовка и стерилизация проводится в первый день, на следующем занятии проводится контроль качества стерилизации.
2. Наблюдение за средами вести до появления помутнения. В случае помутнения одной из сред делают препарат-мазок и при обнаружении в нем бактерий дают заключение. При отсутствии помутнения в течение 8 дней наблюдение прекращают и дают заключение.
3. Выполнение задания оформляется в виде протокола в альбоме.
Пипетки втянуть и выдуть пипетками среды
 | |||
 | |||
Стерилизованные Бульон Тиогликолевая Бульон
пипетки Хоттингера среда Сабуро
 | |||
 | |||
инкубация инкубация
32оС– 8 сут. комн. t оС– 8 сут.
 | |
по Граму
Рис. 4. Методика контроля качества стерилизации предметов из стекла
