Работа № 2. Определение кальция фотометрическим методом

ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ. Кальций является составным компонентом костной ткани, участвует в функционировании свёртывающей системы крови, в мышечном сокращении, в проведении нервного импульса, как вторичный посредник в реализации гормонального сигнала внутри клетки-мишени.

 

ПРИНЦИП МЕТОДА. Кальций в щелочной среде с глиоксальбис-(2-гидроксианилом) (ГБОА) образует окрашенное соединение. Интенсивность окраски раствора прямо пропорциональна концентрации кальция в сыворотке крови и определяется фотометрически.

 

ХОД РАБОТЫ: взять три пробирки.

 

ВНЕСТИ	ОПЫТ	СТАНДАРТ	КОНТРОЛЬ
Н2О, мл	-	-	0,01
Сыворотка крови мл	0,01	-	-
Стандарт Са, мл	-	0,01	-
NaOH, мл	0,75	0,75	0,75

 

Перемешать, инкубация 5-10 мин. Добавить в каждую пробирку по 1 мл раствора ГБОА и сразу же перемешать. Измерить оптическую плотность в интервале 5-12 мин при λ = 540 нм, кювета 0,5 см.

 

РЕЗУЛЬТАТ: Е_оп =

Е_ст =

 

Е_оп

РАСЧЁТЫ: С_оп = · 25 = ммоль/л

Е_ст

 

Стандарт кальция = 25 ммоль/л.

КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.

 

Содержание кальция в сыворотке крови у взрослых составляет в норме 2,2 - 2,75 ммоль/л, у новорожденных 2,25 – 2,45 ммоль/л, у детей 2-14 лет 2,5 – 2,87 ммоль/л.

Физиологическая гиперкальцемия бывает у новорожденных, у недоношенных, а также у некоторых лиц после принятия пищи.

Патологическая гиперкальцемия наблюдается при гиперпаратиреозе (мобилизация ионов кальция из костей), акромегалии, злокачественных опухолях с поражением костей, миеломной болезни, саркоидозе, тиреотоксикозе, раке легкого, почки, поджелудочной железы, печени.

Гипокальцемия отмечается при дефиците витамина D, гипопаратиреозе, хронической почечной недостаточности, нефротическом синдроме, циррозе печени, остром панкреатите.

 

ВЫВОД:

Дата: ________________

ЗАНЯТИЕ № 35

 

РАБОТА: БИОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ МОЧИ

 

ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ. К компонентам мочи, которые у здорового человека не обнаруживаются обычными качественными реакциями, относятся: белок, сахар, кетоновые тела, желчные пигменты, кровь. Они появляются в моче при нарушениях обмена веществ или нарушении функции органов. Поэтому их определение в моче используют для диагностики заболеваний и контроля за ходом лечения.

 

1. КАЧЕСТВЕННАЯ РЕАКЦИЯ НА БЕЛОК

ПРИНЦИП МЕТОДА: с помощью азотной (или сульфосалициловой) кислоты при наличии белка в моче образуется белый осадок (денатурированный белок).

ХОД РАБОТЫ: взять две пробирки - контроль и опыт.

 

 

ОТМЕРИТЬ	КОНТРОЛЬ	О П Ы Т
М О Ч А Н2О Сульфосалициловая кислота 20% ------------------------------------- (или наслоение мочи на концентрированную азотную кислоту - НNО3)	- 1,0 мл 3 капли	1,0 мл - 3 капли

РЕЗУЛЬТАТ:

КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.

Белок появляется в моче при нефрите, сердечной декомпенсации, воспалении мочевыводящих путей (цистите), повышении артериального давления, иногда при беременности, нефрозах.

В Ы В О Д: