Ция, дифференцировка, в результате чего снижается активность

Этих недостатков лишены процессы с использованием иммобилизо-

Ванных растительных клеток. Такие биологические системы более устой-

Чивы к механическим повреждениям, при этом фаза роста клеток совпада-

Каллус

Фундаментальные исследования

Вегетативное размножение

Оздоровление

Искусственные семена

Замена органелл

Селекция, мутации, вариации

Гибридизация: половая, соматическая

Гибридизация: андрогенная,

Гиногенная

Вторичные продукты

И биотрансформация

Молекулярно-генетическая

Инженерия растений

Биотехнологическое

Применение

Соматические

Эмбриоиды

Клетки

Протопласты

Мерисистемы, яйцеклетки,

Эмбрионы,

Микроспоры,

Пыльники

Рис. 6.2. Биотехнологическое использование культуры клеток и тканей растений.

Длина стрелок указывает относительную легкость или трудность взаимных переходов

(по Х. Борман, 1991).

Ет с фазой образования продукта; клетки легко переносятся в новую среду

Или иные культивационные условия. Основные трудности данной техно-

Логии связаны с недостаточной изученностью регуляции метаболизма у

Эукариотических растительных клеток.

Особенностью клеточных культур растений является их способность к

тотипотенции, – в определенной среде и определенных условиях можно

Регенерировать целое растение из одной клетки. Подобное свойство от-

Сутствует у животных. Таким образом, в любой растительной клетке за-

Ложена генетическая информация, необходимая для дифференцировки

Клеток в процессе деления. Этот феномен используют при микроразмно-

Жении растений. Данная технология имеет существенные преимущества,

Так как позволяет быстро получать материал для размножения растений,

Включая системы, не содержащие возбудителей болезней, круглогодично

Иметь рассадочный материал и повышать его однородность, длительно

Хранить генетический материал и создавать новые генотипы.

С тех пор, как впервые удалось индуцировать из одной клетки регене-

Рацию целого растения, техника культуры клеток стала широко приме-

Няться для клонирования. Тотипотенция была продемонстрирована на

культурах тканей ряда растительных видов, а позднее – на соматических и

Половых клетках, изолированных из различных растений.

На рис.6.3 представлена схема клонального размножения растений

Catharanthus roseus из верхушечных меристем. После проращивания сте-

Рильных семян C. roseus через 7 дней кончики побегов проростков срезали

И проращивали в темноте, затем кончики проростков помещали на по-

Верхность агаризованной среды Нича и культивировали на свету. Спустя 8

Недель из апикальных меристем формировались прорости с развитой кор-

Невой системой. Эти проростки использовали для второго этапа размно-

жения, в ходе которого эксплантанты, состоящие из одного узла и одной

пары листьев формировали проростки с корнями и 4–5 парами листьев.

После третьего пассажа развивались проростки с тем же числом узлов.

Укоренившиеся проростки пересаживали в горшки со стерильной почвой.

После 14-дневного периода акклиматизации проростки высаживали в поч-

ву; выживаемость проростков при этом составила 90 %.

В 1971 г. Табеке с сотрудниками, обрабатывая листья табака с целью

Растворения клеточных стенок сочетанием целлюлозы и пектиназы, доби-

Лись успеха в получении протопластов. Протопласты при культивирова-

Нии в жидкой среде в процессе деления формировали каллус, способный к

регенерации целого растения. При этом свыше 90 % протоклонов (клонов,

Полученных из протопластов) были удивительно сходны с родительскими

Видами как по фенотипу, так и по генотипу. Протопласты позволили пре-

Одолеть обычную изменчивость, свойственную другим способам получе-

Ния клонов. В конце 80-х годов в США была разработана техника регенера-