чина, чечевица; для Rh. phaseoli – фасоль; Rh. japonicum – соя; Rh. trifolii –
клевер; Rh. vigna – вигна, маис, арахис и др. Процесс азотфиксации проте-
Кает только в клубеньках на корнях бобовых растений, которые образуют-
Ся в результате проникновения бактерий через корневые волоски в корень.
Взаимоотношение бактерий с растениями зависит от комплекса условий,
Включая физиологическое состояние и условия роста растений, а также
Физиологическую активность и вирулентность бактерий. Под вирулентно-
Стью понимают способность бактерий проникать внутрь корня растений и
Вызывать образование клубенька. Существенное влияние на процесс обра-
Зования клубеньков, следовательно, эффективность последующего про-
Цесса азотфиксации, оказывают температура и влажность почвы, наличие
В ней необходимых для развития бактерий и растений биогенных элемен-
Тов.
Первая коммерческая разновидность культуры для инокуляции семян
(товарное название «Nitragin») была запатентована в Великобритании
Ноббе и Хилтнером в 1896 г. Для разных бобовых в то время выпускали
Вариантов культуры. В 20-е годы выпускалось много разновидностей
Инокулятов, среди них были чистые культуры азотфиксирующих микро-
Организмов, смеси бактерий с песком или торфом, а также культуры, вы-
Ращенные на агаре или в жидкой среде.
Бактерии выращивали на агаризованных средах, далее соскабливали с
Поверхности плотной среды и суспендировали в молоке. Суспензию бак-
Терий выливали на кучу семян, перемешивали и далее семена высушивали
В тени. Вскоре семена высевали. Данный метод пригоден для инокуляции
Сравнительно небольших объемов семян и применялся во многих странах
С конца тридцатых до начала семидесятых годов. Затем с сокращением
Площадей, засеваемых люцерной в ряде европейских стран объемы ис-
Пользования метода сократились. Кроме этого, такие препараты азотфик-
Сирующих бактерий после высушивания быстро погибают, то есть не мо-
Гут использоваться в течение длительного времени. Этого недостатка ли-
Шены препараты инокулята на торфяной основе. Бактерии выращивают
Обычным способом в глубинной культуре в стерильных условиях до дос-
тижения достаточно высокой плотности культуры (108–109 клеток/мл); в
Качестве основы среды используют дрожжевой экстракт или маннитол.
Далее просушенный (остаточная влажность около 10 %), измельченный
(200 меш) торф доводят до рН 6.5–7.0, добавляя CaCO3, и смешивают с
жидкой культурой (40 % по массе). Препарат бактерий на торфяной осно-
Ве в течение нескольких суток созревает. Затем его вновь перемешивают и
Фасуют в полиэтиленовые мешочки, которые герметизируют. При хране-
Нии препарата в условиях пониженной температуры жизнеспособность
Инокулята сохраняется достаточно долго, до 90 недель. При благоприят-
Ных условиях культуру можно хранить в течение года.
В качестве носителя для бактерий были опробованы различные компо-
зиции: смеси торфа с почвой, добавки люцерны и соломы, перегнившие
Опилки, бентоит и активированный уголь. В настоящее время для поддер-
Жания жизнеспособности симбиотических азотфиксирующих бактерий ис-
Пользуют разнообразные носители, но лучшим считается торф. Сухие пре-
Параты азотфиксаторов, приготовленные на основе клубеньковых бактерий
Рода Rhizobium и предназначенные для повышения урожайности бобовых
Растений (гороха, фасоли, сои, клевера, люцерны, люпина и др.) в настоящее
время выпускаются под товарным названием «Нитрагин». Помимо поч-
венного нитрагина, выпускают также сухой нитрагин – препарат бактерий с
содержанием в 1 г не менее 9 млрд. жизнеспособных клеток, в качестве на-
Полнителя используют мел, каолин, бентоит. Препараты сухого нитрагина с
остаточной влажностью 5–7 % фасуют по 0.2–1.0 кг и хранят при 15°С в
