Дней протопласты формировали клеточные стенки, начинали деление
И образовывали каллус. После этого их переносили в культуральную среду,
Делая три пассажа; в последней культуре были получены целые растения.
Полученное огромное количество клонов (около 60 000) было проанализи-
Ровано, при этом установили их неоднородность. Техника открывает огром-
Семена
Проросток
II пассаж
Растения-регенераты
Растение в горшке Растение в почве
В аранжерее
I пассаж III пассаж
Верхушка побега
Проростка
С гипокотилем
Рис. 6.3. Схема клонального микроразмножения Catharanthus roseus
(по Н. Оледзка и др., 1991).
Ные перспективы для эффективной селекции растений в лабораторных ус-
Ловиях. Такая работа проведена на протопластах табака, петунии и ряде
Других видов с целью получения форм, устойчивых к пестицидам. Появи-
Лась реальная возможность использовать технику регенерации целых расте-
Ний их клеточных культур и каллусов для выведения новых сортов ряда
Важных культур (сои, маниока), для изменения сортов хлебных злаков, ко-
Торые ранее не удавалось регенерировать из тканевых культур.
Культура растительных тканей, аналогично культуре клеток, позволяет
Достаточно быстро получать здоровые растительные клоны и на этой ос-
нове – перспективный рассадочный материал. После того, как было уста-
Новлено, что апикальная меристема (небольшой участок недифференци-
Рованных клеток на кончике стебля) способна к росту с образованием це-
Лого растения, эта техника стала применяться для клонирования линий
растений (рис. 6.4–6.5).
Рис. 6.4. Меристемные регенеранты гороха посевного (слева)
И клевера лугового (справа) на разных средах.
а – с добавлением биологически активных веществ; б – без экзогенных регуляторов роста
(по Х. Каллаку и А. Кыйвеэру, 1991).
Рис. 6.5. Регенерация растений in vitro.
Регенерация Citrullus vulgaris из листовых дисков и сегментов гипокотиля.
Сверху – инициация каллусообразования, снизу – регенерация корней.
Рис. 6.5 – продолжение.
Сверху – регенерация побегов Citrullus vulgaris, снизу – регенерация полноценного растения арбуза
(по Э. С. Пирузян, 1988).
Клетки меристемы при перенесении в питательную среду делятся, об-
Разуя маленькое растение с пятью-шестью листиками. Через несколько
Недель выросший стебель разрезают на пять-шесть микрочеренков, кото-
Рые в благоприятных условиях вырастают в целые растения. При культи-
Вировании растительных меристем за сравнительно короткий срок удается
Получить большое здоровое потомство (миллионы растений в год). Тех-
Нология эффективна при использовании для размножения однолетних
Культур, так как позволяет получать молодые растения. Апикальная мери-
Стема ______свободна от вирусов. Растения, полученные при ее размножении,
Также не заражены вирусами. В результате применения этой техники сна-
Чала были получены безвирусные сорта георгинов, а затем восстановлен
Сорт картофеля (бель-де-фонтоне), практически исчезнувший из-за вирус-
Ного заражения, затем и сорта многих других растений.
Особые успехи применения данной технологии были достигнуты при
Размножении масличной пальмы методами культуры ткани in vitro. Гви-
Нейская масличная пальма является вторым после сои источником полу-
Чения масла. Специфика эксплуатации масличной пальмы такова, что эф-
фективное ее применение возможно в течение 25–30 лет; после этого пе-
риода плантации приходится обновлять. Для этого требуются миллионы
Молодых проростков. Усовершенствование и размножение растений ме-
Тодом скрещивания сопряжено с огромными затратами труда и времени.
В связи с тем, что масличная пальма не образует побегов и боковых вет-
Вей в природных условиях, пришлось обратиться к культуре ткани in vitro.
В ходе исследований от культивирования меристемы отказались; каллус
