Получали из частей молодых листьев с верхушки дерева. Далее культиви-

Ровали каллусы до получения целого растения. Каллусы формировались в

Течение трех месяцев, при переносе во вторую и третью культуры из них

формировались «эмбриоиды», аналогичные эмбрионам, получаемым при

Половом процессе. Эмбрионы быстро размножаются в четвертой культу-

Ре, в течение месяца их количество может утроиться. В течение одного

Года из 10 эмбрионов можно получить до 500 000 растений. В пятой куль-

Туре эмбрионы развиваются в молодые проростки с листочками; а в шес-

той – седьмой – происходит образование корней. Полный цикл развития

растений от «эмбриоидной» стадии до проростка с высотой надземной

Части около 12 см происходит в течение трех месяцев. Этот метод на ост-

Ровах Новой Гвинеи в полупромышленных масштабах применяют с нача-

Ла девяностых годов. В настоящее время проводятся испытания клониро-

Ванного материала в полевых условиях. Благодаря применению техники

Клонирования страны Западной Африки смогут интенсифицировать про-

цесс создания новых пальмовых плантаций, что позволит увеличить объ-

Емы производства масла и со временем устранить имеющийся дефицит

Жиров.

Техника слияния протопластов: гаплоидные растения

Гибридные формы высших растений можно получать с использовани-

Ем приема клеточной инженерии, на основе парасексуальной гибридиза-

Ции в результате слияния протопластов. Техника слияния протопластов

Позволит генетикам расширить разнообразие гибридных растений. Это

Перспективная техника гибридизации не зависит от обычного полового

Размножения, посредством которого с достаточно большим трудом уда-

Лось получить гибриды пшеницы и ржи (тритикале), репы и капусты (ра-

Фанобрасика).

Метод заключается в том, что в качестве родительских используют не

Половые клетки (гаметы), а клетки тела (сомы) растения. Изолированные

Протопласты, выделенные из родительских организмов, в определенных

Условиях сливаются. Из полученных гибридных клеток в дальнейшем раз-

виваются целые растения – гибриды. Применение этой технологии стало

Возможным в результате разработки двух новых экспериментальных мето-

дов – метода культуры клеток и тканей и метода изолированных протопла-

Стов. Метод изолированных протопластов позволяет с помощью фермента-

Тивного гидролиза разрушать клеточные стенки и получать растительные

Клетки, лишенные клеточной оболочки, покрытые только плазмолеммой.

Протопласты могут сливаться друг с другом с образованием единого целого,

Способного регенерировать в целое гибридное растение, с помощью поли-

этиленгликоля или под воздествием электрического поля (рис. 6.6).

Применение протопластов для генетических экспериментов стало воз-

Можным после того, как было обнаружено, что эффективным индуктором

Их слияния является полиэтиленгликоль (ПЭГ). Поверхности раститель-

Ных клеток и протопластов окружены водным слоем и имеют отрицатель-

Ный заряд. Эти обстоятельства препятствуют слиянию. Действие ПЭГ,

Видимо, заключается в снижении поверхностных зарядов и отнятии воды.

После обработки клеток ПЭГ создаются условия для контакта клеточных

Мембран. В местах контакта происходит разрыв мембран, и содержимое

Двух протопластов объединяется. Образующиеся гибридные структуры

Сохраняют способность к восстановлению клеточной стенки, в результате

Появляются гибридные клетки. Универсальность и простота метода дела-

Ют его доступным для селекции промышленно важных продуцентов. Ге-

Нетическая рекомбинация в сочетании с индуцированным мутагенезом

Создает огромное разнообразие форм, увеличивая материал для отбора.

Техника дает возможность для получения межвидовых и межродовых

Гибридов и открывает пути для скрещивания филогенетически отдален-

Ных форм.