Мета роботи: Вивчити морфологію бактерій та актиноміцетів за допомогою мікроскопа
Теоретичні основи: Бактерії належать до надцарства прокаріотів. Більшість бактерій - одноклітинні організми, рідше зустрічаються багатоклітинні форми з низьким рівнем диференціації клітин.
За способом живлення бактерій поділяють на авто- та гетеротрофи, за способом отримання енергії на фото- та хемотрофи. За відношенням до кисню - на аероби та анаероби.
Розмножуються бактерії неперервним поділом клітини. Як правило, поділ відбувається в результаті кострикції або шляхом утворення перегородки. У багатьох бактерій клітини після поділу розходяться, у деяких представників залишаються разом, утворюючи різні сполучення.
Ряд форм мають складні цикли розвитку.
Серед бактерій є рухливі організми. Рух більшості бактерій здійснюється за допомогою джгутиків. Рідше зустрічаються форми, які володіють повзаючим рухом зв'язаним з нерівномірним виділенням слизу усією поверхнею тіла (міксобактерії) або такі, що мають поступово-обертальний рух, який забезпечується скороченням фібріл (спірохети).
При несприятливих умовах деяким бактеріям властиве утворення ендоспор. Спори бактерій не зв'язані з розмноженням, а призначені для збереження виду в умовах, несприятливих для розвитку вегетативних клітин.
Порівняно з морфологічною різноманітністю багатоклітинних організмів бактерії морфологічно мало диференційовані. Звичайно розрізнюють три основні форми бактерій:
- сферичні клітини;
- паличковидні клітини;
- звиті форми.
Сферичні бактерії - коки (від грецького - зерно). Діаметр кокових форм коливається від 1,0 до 2,5 мкм. Переважна більшість кокових клітин не утворюють спор та є нерухомими. Морфологічно розрізнюють коки правильної сферичної форми, овальні, конічні та еліпсовидні утворення. У залежності від способів ділення коки поділяються на декілька груп:
- мікрококи - поодинокі коки. При поділі клітин розходяться.
- диплококи - коки, які діляться в одній площиніта утворюють пари клітин.
- стрептококи - ділення клітин відбувається в одній площині з утворенням ланцюжків з трьох та більше клітин.
- тетракоки - клітини діляться у двох взаємно перпендикулярних площинах з утворенням групи, яка складається з чотирьох клітин.
- сарцини - клітини діляться в трьох взаємно перпендикулярних площинах та утворюють скупчення кубічної форми з 8, 16, 32 клітин.
- стафілококи — діляться у декількох площинах та утворюють скупчення, які нагадують формою гроно винограду.
Паличковидні бактерії — це найбільш численна група прокаріотів. Довжина паличковидних бактерій у середньому складає 2 - 5, іноді 10 - 12 мкм. Довжина клітин одного виду залежить рід ряду факторів та визначається віком культури і умовами вирощування. Більш стійкою ознакою є ширина клітин, яка коливається у межах від 0,5 до 1 мкм. Більшість паличковидних бактерій не утворюють ендоспор, але є і спороутворюючі форми. У класификації спороутворюючі палички називаються бацилами (від латинського bacillum - паличка), неспороутворюючі палички отримали назву бактерії (від грецького bacteria).
Як і сферичні клітини, палички можуть бути з'єднані попарно або в ланцюжки (диплобацили і дипдобактерії, стрептобацили і стрептобактерії). При визначенні систематичного положення паличковидних бактерій важливою ознакою є форма кінців клітини (округлі, загострені, тупі).
Звиті бактерії мають спіралевидну форму та розрізнюються за довжиною, товщиною нитки та за кількістю та характером звитків. Серед звитих бактерій відомі негнучкі та звивисті форми. До негнучких бактерій відносять вібріони, які мають форму коми, та спірилли. Спірилли мають великі та рідкі завитки, кількість яких не більше шести. Звивисті форми мають велику кількість дрібних завитків, які мають діагностичне значення. Звивисті форми представлені спірохетами.
Актиноміцети - це особлива група Г+ мікроорганізмів, яку слід розглядатияк перехідну форму між бактеріями та грибами. Клітини актиноміцетів дуже розгалуджені та нагадують міцелій цвільових грибів. Проте міцелій актиноміцетів тонший та в діаметрі не більший 1,2 мкм. У переважній більшості випадків міцелій актиноміцетів не має перегородок, виняток складають деякі види вищих актиноміцетів.
На щільному поживному середовищі інші актиноміцети утворюють щільні корковидні або бархатисті колонії різного розміру та забарвлення. Частина колонії занурюється у субстрат та щільно з ним зростається, з другої частини формується повітряний міцелій, на кінцях якого утворюються спороносні гілки або спороносці. Форма спороносців та спор (рисунок 8.1) постійна для кожного виду та використовується для діагностики актиноміцетів.
Спороносці актиноміцетів
а)—прямі; б) — звивисті; г) — пучкоподібні; г)— первинні спіралі;
д) - відкриті спіралі; е)- закриті спіралі; ж)- міцелій актиноміцету.
Рисунок 8.1 - Спороносці актиноміцетів
У менш організованих представників актиноміцетівміцелійвідносно швидко розпадається на окремі фрагменти, даючи дуже різнорідну мікроскопічну картину. На поверхні щільних середовищ вони утворюють щільні колонії, які майже не зрощуються з субстратом. Повітряний міцелій утворюється рідко. Розмноження здійснюється фрагментами міцелію. Спори не утворюються. Оскільки діаметр міцелію дуже малий, то звичайно для вивчення цих організмів готують препарати-відбитки. Для цього предметне скельце кладуть на поверхню міцелію та злегка притискують для отримання чіткого відбитку. Препарат фіксують жаром, забарвлюють та мікроскопують, використовуючи об'єктив 90х.
Матеріали, реактиви й устаткування:
Предметні скельця, водний розчин фуксину, імерсійна олія, стерильна водопровідна вода, бактеріологічні петлі, мікроскопи, дезінфікуючий розчин, марлеві тампони, готові препарати культур Spirochaeta dentium, Vibrio El-tor добові культури мікроорганізмів Sarcina flava, Staphilococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Streptococcus lactis.
Хід роботи:
1. Приготувати фіксовані препарати культур Sarcina flava, Staphilococcus аureus, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Streptococcus lactis.
2. Приготувати препарат-відбиток з культури актиноміцетів. Розглянути будову міцелію та спороносців зі спорами.
Контрольні питання:
1. На які групи поділяються бактерії за способом живлення?
2. На які групи поділяються бактерії за способом отримання енергії?
3. Як відбувається розмноження бактерій?
4. На які групи можна поділити коки?
Форма звітного бланка до лабораторної роботи № 8.
Група | Курс | Лабораторна робота №8 | ||||
Морфологія бактерій та актиноміцетів | ||||||
Прізвище студента | ||||||
1) Рисунок культури мікроорганізмів …………………………………… при збільшенні (назва препарату мікроорганізмів латинською) а) 40х б) 90х 2) Відповідь на контрольні питання 3) Висновки по лабораторній роботі № 8 | ||||||
Роботу прийняв | Дата | Підпис | ||||
Лабораторна робота № 9