Поживні середовища для культивування окремих видів
патогенних мікроорганізмів.
Висів мікроорганізмів різних родів, які належать до представників нормальної та умовно-патогенної мікрофлори здійснюється на спеціальних або елективних середовищах, переважно твердих. Середовища загального призначення (рідки і тверді) використовують для виділення чистих культур збудників хвороб.
Рідкі середовища загального призначення
1. М’ясо-пептонний бульон:
500 г нарізаного м’яса (без жиру, кісток) заливають 1л водопровідної водиз температурою 50оС настоюють 1 годину при вищезазначеній температурі або 12 годин – при кімнатній. Фільтрують через марлю з ватою. Кипятять 30 хв. Потім – 2 рази фільтрують. Фільтрат доливають водою до 1 л.
Стерилізують автоклавуванням 20 хв при температурі, більшій 121о С.
2. Печінковий бульйон:
500 г печінкового фпршу заливають 0,5л водопровідної води Кипятять 1годину. Нагрівають в автоклаві при 120 оС. Фільтрують.
Стерилізують автоклавуванням 20 хв при температурі, більшій 121о С.
3. Середовище для клебсіел.
Глюкоза 1г, хлорид натрію 10 г, дріжджовий екстракт – 5 г
Кип’ятіння 1 хв. Стерилізація 15 хв при 121 оС
рН 7,0±0,2
Спеціальні середовища
1. М’ясо-пептонний бульон з глюкозою та гліцерином:
До м’ясо-пептонний бульону додають 2-3% глюкози, 3-5% гліцерину.
Стерилізують дробно (тиндалізацією).
2. Рідке середовище для аспорогенних дріжджів Candida аlbicans
Глюкоза 5 г, ацетат натрію 10 г, хлорид амонію 10 г, дріжджовий автолізат 3 мл, вода 1 л.
Підготовка автолізату. 200 г дріжджів + 100 мл водопровідної води, + 0,15 % NaС1 від маси дріжджів. Витримують при 50оС 48 годин, потім кип’ятять, фільтрація – крізь паперовий фільтр. Стерилізація 30 хв при 121 оС.
Кип’ятіння середовища 1 хв. Стерилізація 15-20 хв при 121 оС.
рН для середовищ із дріжджами 5,7±0,2
2. Агар для бруцел:
Панкреатичний гідролізат казеїну – 10 г, пептичний гідролізіт тваринних тканин – 10 г, дріжджовий автолізат – 2 г, глюкоза -– 1 г, NaCl– 5 г, Na2S – 0,1 г, агар -– 15 г, дистильована вода – 1 л. рН =7.
Стерилізують автоклавуванням 15 хв при 121о С.
4. Шоколадний агар, варіант 1
Основа: Пептон 15 г, кукурузний крохмаль 1 г, NaCl 5 г, Na2HPO4 4,0 г, NaH2PO4 1,0 г, агар 10 г, вода дистилят 0,5 л. Кип’ятіння 1 хв. Стерилізація 15 хв при 121 оС
Додаток: Охолодження середовища, 45-50 оС, + 500 мл 2% гемоглобіна
рН 7,2±0,2
5. Шоколадний агар, варіант 2.
Кип’япять стерільний МПА і до нього додають 15% крові коня, змішують, знімають з вогню. Охолоджують до 60 оС, розмішують осад, розливають в чашки Петрі.
6. Агар з ацетатом талію:
Пептон – 10 г,дріжджовий автолізат – 10 г, глюкоза – 10 г, ацетат талію – 1 г, агар -– 13 г, дистильована вода – 1 л. рН =6.
Стерилізують автоклавуванням 15 хв при 121о С. В охолоджений до 50-55о С агар додають 10 мл 1% розчину трифенілтетразолію, стерилізованого фільтруванням.
Диференційно-діагностичні середовища.
1. Агар для сальмонел та шигел:
М’ясний екстракт – 5 г, пептон -– 5 г, лактоза – 10 г,суміш жовчних солей, цитрат натрію, цитрат заліза, тіосульфат натрію. Бриліантовий зелений, нейтральний червоний, агар -– 15 г, дистильована вода – 1 л. рН =7.
Автоклавування не проводять, нагрівають до кипіння.
2. Агар для стрептококів:
Триптон – 10 г, пептон -– 10 г, сахароза – 50 г, глюкоза – 1 г, K2HPO4 – 4 г, трипановий синій– 0,075 г, кристалічний фіолетовий– 0,0008 г, агар -– 15 г, дистильована вода – 1 л. рН =7.
Стерилізують автоклавуванням 15 хв при 121о С. В охолоджений до 50-55о С агар додають 1 мл 0,1% розчину телуріту калію, стерилізованого фільтруванням.
