Додаток 5

Поживні середовища для культивування окремих видів

патогенних мікроорганізмів.

 

Висів мікроорганізмів різних родів, які належать до представників нормальної та умовно-патогенної мікрофлори здійснюється на спеціальних або елективних середовищах, переважно твердих. Середовища загального призначення (рідки і тверді) використовують для виділення чистих культур збудників хвороб.

 

Рідкі середовища загального призначення

1. М’ясо-пептонний бульон:

500 г нарізаного м’яса (без жиру, кісток) заливають 1л водопровідної водиз температурою 50^оС настоюють 1 годину при вищезазначеній температурі або 12 годин – при кімнатній. Фільтрують через марлю з ватою. Кипятять 30 хв. Потім – 2 рази фільтрують. Фільтрат доливають водою до 1 л.

Стерилізують автоклавуванням 20 хв при температурі, більшій 121^о С.

2. Печінковий бульйон:

500 г печінкового фпршу заливають 0,5л водопровідної води Кипятять 1годину. Нагрівають в автоклаві при 120 ^оС. Фільтрують.

Стерилізують автоклавуванням 20 хв при температурі, більшій 121^о С.

3. Середовище для клебсіел.

Глюкоза 1г, хлорид натрію 10 г, дріжджовий екстракт – 5 г

Кип’ятіння 1 хв. Стерилізація 15 хв при 121 ^оС

рН 7,0±0,2

Спеціальні середовища

1. М’ясо-пептонний бульон з глюкозою та гліцерином:

До м’ясо-пептонний бульону додають 2-3% глюкози, 3-5% гліцерину.

Стерилізують дробно (тиндалізацією).

2. Рідке середовище для аспорогенних дріжджів Candida аlbicans

Глюкоза 5 г, ацетат натрію 10 г, хлорид амонію 10 г, дріжджовий автолізат 3 мл, вода 1 л.

Підготовка автолізату. 200 г дріжджів + 100 мл водопровідної води, + 0,15 % NaС1 від маси дріжджів. Витримують при 50^оС 48 годин, потім кип’ятять, фільтрація – крізь паперовий фільтр. Стерилізація 30 хв при 121 ^оС.

Кип’ятіння середовища 1 хв. Стерилізація 15-20 хв при 121 ^оС.

рН для середовищ із дріжджами 5,7±0,2

2. Агар для бруцел:

Панкреатичний гідролізат казеїну – 10 г, пептичний гідролізіт тваринних тканин – 10 г, дріжджовий автолізат – 2 г, глюкоза -– 1 г, NaCl– 5 г, Na₂S – 0,1 г, агар -– 15 г, дистильована вода – 1 л. рН =7.

Стерилізують автоклавуванням 15 хв при 121^о С.

4. Шоколадний агар, варіант 1

Основа: Пептон 15 г, кукурузний крохмаль 1 г, NaCl 5 г, Na₂HPO₄ 4,0 г, NaH₂PO₄ 1,0 г, агар 10 г, вода дистилят 0,5 л. Кип’ятіння 1 хв. Стерилізація 15 хв при 121 ^оС

Додаток: Охолодження середовища, 45-50 ^оС, + 500 мл 2% гемоглобіна

рН 7,2±0,2

5. Шоколадний агар, варіант 2.

Кип’япять стерільний МПА і до нього додають 15% крові коня, змішують, знімають з вогню. Охолоджують до 60 ^оС, розмішують осад, розливають в чашки Петрі.

6. Агар з ацетатом талію:

Пептон – 10 г,дріжджовий автолізат – 10 г, глюкоза – 10 г, ацетат талію – 1 г, агар -– 13 г, дистильована вода – 1 л. рН =6.

Стерилізують автоклавуванням 15 хв при 121^о С. В охолоджений до 50-55^о С агар додають 10 мл 1% розчину трифенілтетразолію, стерилізованого фільтруванням.

Диференційно-діагностичні середовища.

1. Агар для сальмонел та шигел:

М’ясний екстракт – 5 г, пептон -– 5 г, лактоза – 10 г,суміш жовчних солей, цитрат натрію, цитрат заліза, тіосульфат натрію. Бриліантовий зелений, нейтральний червоний, агар -– 15 г, дистильована вода – 1 л. рН =7.

Автоклавування не проводять, нагрівають до кипіння.

2. Агар для стрептококів:

Триптон – 10 г, пептон -– 10 г, сахароза – 50 г, глюкоза – 1 г, K₂HPO₄ – 4 г, трипановий синій– 0,075 г, кристалічний фіолетовий– 0,0008 г, агар -– 15 г, дистильована вода – 1 л. рН =7.

Стерилізують автоклавуванням 15 хв при 121^о С. В охолоджений до 50-55^о С агар додають 1 мл 0,1% розчину телуріту калію, стерилізованого фільтруванням.