ВИК выделен у большинства кошек с выявленными титрами антител, поэтому определение титров антител является методом, наиболее часто используемым в диагностике ВИК-инфекции. Некоторые иммуно-концентрационные наборы и наборы ЭЛАЙЗА позволяют определять антитела, реагирующие с участком р24-антигена ВИК. Такие тесты особенно необходимы в практической лаборатории, особенно наборы, позволяющие производить одновременно исследование на ВИК-антитела и ВЛК-антигены в одном анализе.
Большинство анализов с помощью ЭЛАЙЗА часто дают ложноположительные результаты, поэтому большие диагностические лаборатории часто используют дополнительно иммунотесты для подтверждения диагноза. Часто используют иммуноблоты или Вестернблоты, но эти приемы достаточно сложны. Однако даже при использовании иммуноблотов возникают определенные трудности в интерпретации результатов пограничных реакций. Некоторые лаборатории используют флюоресцентный анализ, который также является достаточно специфичным. Наборы ЭЛАЙЗА для определения титров антител к вирусной оболочке антигена, также используются в некоторых лабораториях. Другие методики, такие как радиоиммунный анализ или реакция нейтрализации на вирусных частицах, чаще используются в исследовательских лабораториях, чем в диагностических.
Интерпретация ВИК-серологии
• Все серологические методы иногда могут давать явные ложноотрицательные результаты у ВИК-инфицированных кошек, а ЭЛАЙЗА иногда дает ложноположительные результаты.
• Хотя большинство кошек продуцирует антитела в течение нескольких недель после заражения ВИК, некоторые кошки могут оставаться серонегативными в течение года.
• В дальнейшем у некоторых серьезно больных кошек наблюдаются пониженные или неопределяемые титры антител, подобные явления иногда наблюдаются на последней стадии СПИДа у людей и могут быть результатом связывания всех антител вирусными антигенами или глубокой иммуносупрессией.
• Определение титров антител следует производить очень тщательно, имея в виду клиническое значение этого анализа.
• Определение титров антител у клинически здоровых кошек не имеет значения для прогноза заболевания, потому что, во-первых, инкубационный период может продолжаться несколько лет, и, во-вторых, некоторые кошки могут так и не проявить клинических симптомов заболевания. Многие исследователи считают, что у большинства кошек заболевание может прогрессировать до СПИД.
• Обнаружение у больной кошки вируса и антител к ВИК могут не иметь отношения к текущему заболеванию
Выделение вируса
Выделение вируса — достаточно дорогой и требующий затрат времени анализ, а так как большинство кошек с титрами антител одновременно и виремичны, то лабораторная диагностика инфекции в основном заключается в определении титров антител. Но иногда выделение вируса необходимо, особенно в случае свежеинфицированных кошек или кошек на терминальной стадии заболевания с неопределяемыми титрами антител.
У кошки берут один или несколько миллилитров крови, которые сразу помещают в культуры клеток или на транспортные среды. Лимфоциты и моноциты отделяют центрифугированием, а затем инкубируют в культурных средах с активатором митоза Т-клеток кошачьих, конкавалином А (конА) для стимуляции деления лимфоцитов. Через 2-3 дня клетки очищают и ресуспендируют в культурных средах, как было описано выше, но без конА, а с добавлением интерлейкина-2. Свежие, стимулированные, неинфицированные лимфоциты и среды добавляют каждые 10 дней, а культуру проверяют на наличие ВИК раз в неделю в течение 6 или более недель путем поиска цитопатических эффектов, электронной микроскопией, анализами на наличие обратной транскриптазы или продукции вирусных антигенов.
Другие методы, такие как полимеразная цепная реакция или тесты ЭЛАЙЗА на антигены, обычно используют в исследовательских лабораториях, а не в диагностических.
