Вирусологическая диагностика пикорнавирусных инфекций

Энтеровирусные инфекции

К энтеровирусам человека (род Enterovirus, семейство Picornaviridae) относятся вирусы полиомиелита (3 серотипа), Коксаки А (23 серотипа), Коксаки В (6 серотипов), ECHO (31 серотип) и энтеровирусы человека 68-—71-го серотипов. Род Hepatovirus семейства Picornaviridae представлен вирусом гепатита А.

Энтеровирусы вызывают у человека разнообразные поражения, в том числе центральной нервной системы (энцефалит, менингоэнцефалит, полиомиелит, менингит), желудочно-кишечного тракта (диарея, гепатит, панкреатит), дыхательных путей (ри­нит, фарингит, пневмония новорожденных и др.), сердечно-со­судистой системы (миокардит, перикардит). В ряде случаев раз­виваются герпетическая ангина, экзантема, везикулярный стоматит.

Материалом для исследования при энтеровирусных инфекциях являются фекалии, носоглоточные смывы, кровь, спинно-мозговая жидкость, моча, органы трупа. Применяются следующие методы лабораторной диагностики (схема 21).

Схема 21. Вирусологическая диагностика энтеровирусных инфекций

Вирусологический метод. Для выделения энтеровирусов, обладающих ЦПД (вирусы полиомиелита, ЕСНО, Коксаки В, некоторые вирусы Коксаки А), применяются культуры клеток почек обезьян, почек эмбриона человека, амниона человека и др. Вирусы Коксаки А удается выделить только при подкожном, внутрибрюшинном или внутримозговом заражении однодневных мышей-сосунков. Вирусы Коксаки А после инкубационного периода в 2-3 дня вызывают вялые параличи конечностей в результате поражения скелетной мускулатуры с развитием общей миопатии. Вирусы Коксаки В вызывают через 6-8 дней после заражения спастические параличи за счет поражения центральной нервной системы. Характер параличей должен быть подтвержден гистологическими методами.

Индикацию энтеровирусов проводят по ЦПД и бляшкообразованию под слоем агара или бентонита в культуре клеток, характеру развитию параличей у мышей-сосунков. Идентификация энтеровирусов проводится с помощью РН (в культуре клеток или на мышах-сосунках), РТГА (при наличии у вируса гемагглютинина), РСК, РПГ, РИФ с типоспецифическими сыворот­ками против соответствующих энтеровирусов.

Серологический метод -постановкаРН (на культуре ткани – обычно вариант «цветной» пробы или на мышах-сосунках), РСК (как правило, для диагностики полиомиелита; диагностический титр 1:32), реже РТГА с целью констатации нарастания титра антител к энтеровирусам в парных сыворотках больных.

Лабораторная диагностика ящура (вирус относится к роду Aphtovirus, семейству Picornaviridae), проявляющегося везикулезной сыпью на коже и слизистых оболочках в результате контакта с больными ящуром сельскохозяйственными животными, осуществляется с помощью экспресс-метода (РИФ для обнаружения специфического антигена вируса в содержимом везикул) и культурального метода. Вирус ящура выделяют в культуре клеток крупно­го рогатого скота, коз, хомяков, идентифицируя с помощью РН, РСК, РИФ. Для выделения вируса проводят также биопробу (заражение морских свинок внутрикожно или мышей-сосунков в мозг). Серологический метод диагностики ящура заключается в ис­следовании парных сывороток с целью определения наличия и нарастания титра специфических антител с помощью РН и РСК.