Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


ƒиагностика эймериозов и изоспорозов




ƒл€ вы€влени€ наличи€ ооцист эймерий и изоспор из фекалий, содержимого кишечника и другого материала исполь≠зуетс€ несколько методов.

ћетод нативного мазка наиболее простой и легко выпол≠нимый в любых услови€х, не требующий специальной аппара≠туры и реактивов дл€ обнаружени€ ооцист.

Ќа чистое предметное стекло пипеткой нанос€т 2-4 кап≠ли чистой воды (дистиллированной, водопроводной), к ним добавл€ют небольшое количество фекалий и перемешивают. ћазок накрывают покровным стеклом и исследуют под малым (х 8,10) и средним (х 40) объективом. ¬место фекалий можно исследовать таким же образом соскобы оболочек кишечника.

ѕри небольшой степени заражени€ ооцист вы€вить таким методом трудно, однако при высоком заражении он дает возможность сравнительно достоверно определить интенсив≠ность инвазии.

Ѕолее точные результаты получают при использовании различных растворов, имеющих большой удельный вес. ¬ та≠ких растворах ооцисты через некоторое врем€ всплывают на поверхность.

Ќаиболее распространенными флотационными методами €вл€ютс€ следующие: методы ‘юллеборна, ƒарлинга, ўербовича,  отельникова и ’ренова и др. (см. √ельминтоовоскопи€).

»сследование эймериид в пораженных органах. ƒл€ ис≠следовани€ на наличие эймериид у животных отбирают ку≠сочки тонкого и толстого кишечника, у кроликов, кроме того, печень, у гусей также почки. ћатериал помещают в фиксиру≠ющую жидкость Ц 10%-ный раствор формалина или 96%-ный этиловый спирт. Ћучше всего использовать нейтральный формалин, дл€ приготовлени€ которого используют порошок углекислого кальци€ (мел), 10% его добавл€ют к объему фор≠малина и дают отсто€тьс€ 5-6 дней, затем хран€т с осадком.

‘иксацию материала лучше производить в стекл€ннойпосу≠де. ¬ зимнее врем€ в качестве фиксирующей жидкости лучше использовать этиловый спирт. ≈е, независимо от времени года, рекомендуетс€ через сутки замен€ть. ≈сли в одну банку поме≠щают кусочки органов от разных животных, их рекомендует≠с€ завернуть в марлевые мешочки. ¬нутрь банки с фиксиру≠ющим материалом помещают бумажную этикетку, на которой графитным карандашом указывают вид животного, его номер и дату вз€ти€ материала.

ѕриготовленные гистологические срезы лучше всего окра≠шивать гематоксилин-эозином.

ѕри необходимости сохранени€ ооцист эймериид на дли≠тельное врем€ используют 5%-ный раствор формалина, 0,1%-ный раствор кали€ двухромовокислого, жидкость Ѕарбагалло (3%-ный раствор формалина на изотоническом растворе натри€ хло≠рида).

“оксоплазмы

ƒл€ выделени€ токсоплазм используют органы павших животных: головной мозг, лимфатические узлы, печень, селезенку, легкие, плаценту и органы абортированного плода. ¬начале готов€т мазки-отпечатки из пораженных органов, которые фиксируют метиловым спир≠том (этиловым) и окрашивают по –омановскому-√имзе. ќтбор органов и приготовление мазков производ€т не позже 2-3 часов после убо€ или падежа животных. ”казанным способом выделить токсоплазм удаетс€ не всегда.

Ѕолее эффективным способом €вл€етс€ постановка биопробы на белых мышах.

ƒл€ этого отобранный материал из внутренних органов растира≠ют с небольшим количеством изотонического раствора натри€ хлорида и полученную суспензию ввод€т 3-5 белым мышам внутрибрюшинно по 0,5мл. ¬ положительных случа€х на 5-7 день развиваетс€ болезнь, при которой в брюшной полости накапливаетс€ экссудат, содержащий большое количество токсоплазм. ѕри отрицательной биопробе, а также дл€ накоплени€ токсоплазм можно проводить 3-5 Ђслепых пассажейї путем введени€ суспензии головного мозга мышам от зараженных ранее белых мышей новой партии мышам.

ћетодическими указани€ми по лабораторным исследовани€м на токсоплазмоз животных, утвержденными 21.01.84, рекомендуетс€ дл€ обогащени€ материала цистами примен€ть метод искусственного пере≠варивани€ в желудочном соке. ѕатматериал (лимфоузлы, продолговатый мозг абортированного плода) измельчают, 50 г фарша помещают в колбу емкостью 1 литр и заливают 10 объемами искусственного желудочного сока.  олбу помещают в термостат при температуре 37∞— на 1,5 часа. ѕолученную массу фильтруют через марлю, затем фильтрат центрифуги≠руют при 2 тыс. об./мин. в течение 15 минут. ѕосле удалени€ надосадочной жидкости осадок ресуспензируют в двойном объеме изото≠нического раствора с добавлением антибиотиков (пенициллин, стрептомицин по 1 тыс. ≈ƒ на 1 л суспензии). —успензию в дозе 0,3 мл ввод€т внутрибрюшинно 3-5 белым мышам.

ƒл€ обнаружени€ токсоплазм готов€т мазки из содержимого брюшной полости или мазки-отпечатки из головного мозга, фиксируют, затем окрашивают по –омановскому-√имзе.

Ќаличие возбудител€ в организме животных может быть подтвер≠ждено путем использовани€ –—  (–ƒ— ), которую став€т в соответствии с Ђ¬ременным наставлением по применению токсоплазмозного антигена  аз.Ќ»¬» и института зоологии јЌ  аз.——– в реакции св€зывани€ комплемента –—  (–ƒ— ) дл€ серологической диагностики токсоплазмоза и токсоплазмоносительства у животныхї.

 

—аркоцисты

ƒл€ обнаружени€ саркоцист исследуют у овец шейную часть пищевода, скелетные мышцы. Ќаход€т макроцисты величиной с прос€≠ное зерно и больше.

” свиней их можно обнаружить в мышцах диафрагмы, межреберных и др. —аркоцисты освобождают от окружающей ткани, на предметном стекле разрушают в 2-3 капл€х изотонического раствора нат≠ри€ хлорида, затем каплю суспензии микроскопируют при среднем увеличении микроскопа с опущенным конденсором. ¬ положительных случа€х обнаруживают банановидные (серповидные) мерозоиты.

ќбнаружение микроцист производ€т путем исследовани€ срезов величиной с овс€ное зерно с мышц пищевода, диафрагмы, сердца, скелета. —резы исследуют в раздавленном в компрессории виде под малым уве≠личением микроскопа. »х можно окрашивать по –омановскому-√имзе, генцианвиолетом, метиленовой синью и др.

—аркоцистможно также обнаружить и при гистологическом исс≠ледовании пораженных тканей. ќтобранные кусочки ткани фиксируют в 10% растворе нейтрального формалина. √истосрезы готов€т обще≠прин€тыми методами, а окрашивают гематоксилин-эозином.

 

“рихомонады

¬ыделение трихомонад производ€т путем микроскопического и культурального исследовани€ патологического материала (истечени€ и смывыиз половых органов, околоплодна€ жидкость, соскобы с плаценты, содержимое сычуга абортированного плода, секрет придаточных половых желез, спермы).

ƒл€ обнаружени€ подвижных трихомонад нанос€т на предметное стекло патологический материал в виде толстого мазкаили делают раздавленную каплю и микроскопируют вначале под малым, затем сред≠ним увеличением микроскопа при затененном поле зрени€ микроскопа. ћазок можно окрашивать по –омановскому-√имзе с предварительной фиксацией в метиловом спирте.

ѕосевы исследуемого материала производ€т на специальные пита≠тельные среды (среда ѕетровского) в количестве 0,3-0,5мл из осад≠ка пробы. ћатериал помещают в термостат при 370— и исследуют на 3, 5, 7 и 10 день. ”же через 24-46 часов может наблюдатьс€ рост трихомонад.

¬ышеуказанные методы используютс€ дл€ выделени€ трихомонад при поражении половых органов у крупного рогатого скота.

” свиней, птиц трихомонады обитают в кишечнике и некоторых других органах. ƒл€ выделени€ паразитов используют соскобы с пораженных органов и исследуют нативным мазком.

»меютс€ данные о том, что и эти трихомонады хорошо растут на искусственных питательных средах.

 

Ѕалантидии

¬ыделение балантидий производ€т путем исследовани€ свежевыделенных фекалий или вз€тых из пр€мой кишки животного. ћатериал необходимо подвергнуть исследованию не позднее 2-3 часов после его вз€ти€. “рупы свиней на наличие балантидий исследуют в течение 5-6 часов после смерти животного. ¬ более поздние сроки баланти≠дий обнаружить не удаетс€ в св€зи с их лизисом. ѕо некоторым дан≠ным (ј.».‘едоров, 1980) трупы следует подвергать исследованию на обнаружение балантидий в течение 1,5-2 часов после убо€ или гибе≠ли порос€т.

ћикроскопическое исследование фекалий лучше всего провести не≠посредственно на ферме, использу€ метод нативного мазка. ƒл€ этого берут небольшое количество фекалий, помещают на предметное стекло и равномерно перемешивают с равным количеством теплого изотоничес≠кого раствора натри€ хлорида или дистиллированной воды (темпера≠тура не более 37,0∞—), накрывают покровным стеклом и просматрива≠ют мазок под малым увеличением микроскопа. ¬ положительных случа≠€х обнаруживают вегетативные формы и цисты балантидий. ѕод микро≠скопом отчетливо видны крупные, быстро передвигающиес€ при помощи ресничек паразиты.

ѕри необходимости гистологического исследовани€ отбирают кусочки стенок толстого и тонкого кишечника, желудка, лимфоузлов, паренхиматозных органов и фиксируют в 10% растворе формалина. √истосрезы окрашивают гематоксилин-эозином.





ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2016-11-20; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 705 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

∆изнь - это то, что с тобой происходит, пока ты строишь планы. © ƒжон Ћеннон
==> читать все изречени€...

1221 - | 1073 -


© 2015-2024 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.009 с.