Мікробіологічна діагностика мікоплазма- і уреаплазма-інфекцій

Патологічний матеріал: кров, харкотиння, слиз носоглотки, виділення і зскрібки з уретри, вагіни, шийки матки, осад сечі, сперма та інше.

 

Мікоплазмози.

1. Бактеріологічний метод. Найбільш доказовий. Проводять посів на щільні і двофазові середовища, виділення та ідентифікацію чистих культур. Для посіву використовують серцево-мозковий агар, двофазове середовище (селективний агар з налитим поверх нього сироватково-глюкозним бульйоном з додаванням пеніциліну і ацетату талія). Ознаки росту з’являються від одного до 7 тижнів. Прискорює цей метод ідентифікація колоній за допомогою епіфлуоресценції. Культури ідентифікуються на основі морфологічних, культуральних, ферментативних властивостей.

2. Експрес-метод. За допомогою РІФ, РНГА, ІФА, агрегат-аглютинації виявляють мікоплазми або їх антигени в клінічному матеріалі.

3. Серологічна діагностика. Застосовуються РЗК, ІФА, агрегат-аглютинація, непряма РІФ для виявлення специфічних антитіл в крові хворого.

Респіраторні мікоплазмози в практичних лабораторіях найчастіше визначають методами серодіагностики.

4. Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР)– є найчутливішим методом діагностики мікоплазмозів.

 

 

Діагностика уреаплазмозів.

1. Бактеріологічний метод – найчастіше використовується на практиці.

Проводять посів на рідкі і щільні середовища. Облік результатів посіву через 24-48 годин за зміною кольору середовища при відсутності каламуті, що пов’язано зі здатністю U.urealiticum розщеплювати сечовину. Метод визначення уреазної активності є основним при діагностиці уреаплазмозів.

2. Експрес-метод.Мікроскопічне виявлення уреаплазм в препаратах сперми при забарвленні флуорохромом олівоміцином.

3. Серологічна діагностика в РЗК, непрямій РІФ, РНГА, ІФА, агрегат-аглютинації, але реактиви для цих реакцій малодоступні для практичних лабораторій.

Лабораторна діагностика рикетсіозів.

Патологічний матеріал: кров (джерело збудників), при Ку-гарячці – харкотиння, сеча, спинно-мозкова рідина, молоко, м’ясо тварин.

 

1. Мікроскопічний метод.Виявлення рикетсій в досліджуваному матеріалі, в організмі заражених тварин, курячих ембріонах. В тілі вошей, бліх, кліщів. Препарати зафарбовуються за Здродовським, Романовського-Гімзи.

Виділення збудника.

2. Методи культивування. Рикетсії не розмножуються в безклітинних середовищах, вони є облігатними внутрішньоклітинними паразитами. Культивуються на курячих ембріонах, фібробластах курячих ембріонів, на деяких культурах клітин (McCoy).

3. Біологічна діагностика. Для діагностики епідемічного висипного тифу (виділення R.prowazekii) біопроба малоефективна. Зараження тварин має діагностичне значення при Ку-гарячці, ендемічному висипному тифі (кров’ю хворого інфікують гвінейських свинок), при гарячці цуцугімуші (інфікують білих мишей, рідше хом’яків, бавовняних щурів). Але всілякі маніпуляції з рикетсіями дуже небезпечні (становлять великий ризик), тому виділення збудника проводять лише при наукових дослідженнях в спеціальних режимних лабораторіях.

4. Серологічна діагностика – основа сучасної лабораторної діагностики. Застосовують реакцію Вейля-Фелікса, аглютинації з рикетсіями, РНГА, РЗК, непряму РІФ (дозволяє ідентифікувати IgM і IgG, що дає можливість ранньої діагностики і визначення стадії хвороби).

Надійні результати можливі лише в кінці першого тижня захворювання. Крім визначення діагностичних титрів, необхідно також орієнтуватись на наростання титрів антитіл, що має більше епідемічне значення.

5. Полімеразна ланцюгова реакція розроблена для діагностики активних форм ерліхіозів.

Відобразити (переписати в протокол) таблицю:

Класифікація хламідій

Порядок Chlamydiales

 

Родина Chlamydiacea

 

 

Рід Chlamydia

 

Chlamydia trachomatis Chlamydia psittaci Chlamydia pneumoniae

 

Таблиця №1.

Збудники хламідіозів

Види	Захворювання	Серовари
Chlamydia trachomatis	Трахома і паратрахома	A, B, Ba, C
Урогенітальний хламідіоз і пневмонія новонароджених	D, F, G, H, I, J, K
Венерична гранульома	L1, L2, L3
Chlamydia psittaci	Орнітози (первинні патогени тварин)	13 (?)
Chlamydia pneumoniae	Пневмонія, ГРЗ, атеросклероз, саркоідоз, бронхіальна астма	TWAR, AR, KA, CWL

Класифікація мікоплазм

Клас Mollicutes

(mollis-м’який, cutes-шкіра)

 

Порядок Mycoplasmatales

 

 

Родина Родина Родина

Mycoplasmataceae Acholeplasmataceae Spariplasmataceae

 

 

Рід Mycoplasma рід Ureaplasma рід Acholeplasma рід Spairoplasma

 

Таблиця №2.