4. биологический метод - используется только если трудно выделить возбудителя при бакисследовании - чаще при ТВС почек.
5. серодиагностика: РСК с туберкулином, РПГА и др. использовать можно, но нецелесообразно, таким образом инфицированность микробактериями ТВС в нашей стране к подростковому возрасту составляет 90-95% населения.
6. метод микрокультур Прайса - в качестве ускоренного метода.
7. в последнее время применяют молекулярно-генетические методы - ПЦР и ДНК зондирование для обнаружения генов М.tub. в исследуемом материале.
8. используют аллергический метод – постановка кожно-алергической пробы Манту с туберкулином, выявление состояния инфекционной аллергии.
9. доклинический метод – депорограф, обследования проводят с 15лет, один раз в год. Вся патология на Тb с– кодируется цифрами от 01 до 26.
Недостаток: выявляются уже запущенные формы – кальцинаты либо в стадии распада.
ЛЕКЦИЯ 17 - Микробиология атипичных форм бактерий (микоплазмы, риккетсии, хламидии)
Микоплазмы и микоплазмозы
Микоплазмы - это прокариоты, отличительной биологической особенностью которых является отсутствие регидной клеточной стенки; это самостоятельная
группа живых организмов, они не произошли ни от каких бактерий и не могут реверсировать в какие-либо виды бактерий. Они принадлежат семейству
Mycoplasmatacea. Это семейство включает два рода, играющих определенную роль в патологии человека. (Mycoplasma –включает 07 видов, Ureoplasma – 7 видов).
Основные биологические особенности микоплазм:
- отсутствует клеточная стенка, ее функции выполняет цитоплазматическая мембрана (ЦПМ).
- микоплазмы полиморфны, пластичны и характеризуются осмотической хрупкостью. Они имеют малые размеры и проходят через фильтры -0,2 мкм. - устойчивы ко всем антибиотикам - ингибиторам клеточной стенки (β –лактамным антибиотикам и гликопептидам).
- не окрашиваются по Граму, для их изучения используют окраску по Романовскому –Гимзе.
- имеют самые малые размеры генома для прокариот - 450-500 МД, что ограничивает их биосинтетические возможности
- требовательны к питательным средам, в силу ограниченных биосинтетических способностей;
- низкое соотношение пар Г-Ц в ДНК; у большинства видов около 30% - имеют минимальный набор органелл: нуклеоид, рибосомы и ЦПМ. - важной биологической особенностью микоплазм является их способность паразитировать на мембране клетки, т.е. они являются мембранными паразитами, с чем во многом связан патогенез микоплазма - инфекции.
-микоплазмы могут изменять антигенную специфичность клеток макроорганизма, что ведет к развитию аутоиммунных процессов.
- микоплазмы имеют антигены, перекрестно реагирующие с тканями организма человека.
Морфология
-обладают выраженным полиморфизмом. Имеют различные формы. При выращивании на плотных питательных средах в основном имеют круглые формы.
-В мазке из одной колонии одновременно можно увидеть любые формы.
-По морфологии микоплазмы разных видов не отличаются.
Культуральные свойства
-они очень требовательны к питательным средам; растут на средах с добавлением 30% сыворотки или на основе сердечно-мозгового перевара.
-видимые колонии микоплазм на поверхности агара появляются только на 3-5 сутки; уреоплазм - через 24-48 часов; 6
-колонии очень мелкие (диаметр 0,1-0,3 мм. у уреоплазм 0,01-0,03) и видны только под большим увеличением микроскопа;
- колонии более плотные в центре с ажурной периферией – «яичница- глазунья», врастают в среду;
-колонии микоплазм разных видов не отличаются друг от друга.
В жидкой среде они растут, давая легкую аполисценцию.
Определение ферментативных свойств используются для определения видовой принадлежности.
Способы репродукции множественны: почкование, сегментация ветвистых форм, бинарное деление.
Факторы вирулентности
Микоплазмы широко распространены во внешней среде, из 107 видов микоплазм 16 входят в состав нормальной микрофлоры; основные биотопы – полость рта, нижние дыхательные пути, слизистая мочеполового тракта; в настоящее время только один вид M. pneumonia считается патогенным все остальные относятся к условно патогенным. Наиболее часто вызывают заболевания у человека M. hominis, M. genitalium, M. urealytikum. Патогенным потенциалом обладают M. fermentans и M.
penetrans.
В качестве основного фактора вирулентности микоплазм рассматриваются их способность адсорбироваться на рецепторах клетки хозяина и взаимодействовать с ними. Некоторые виды микоплазм имеют специальные органеллы для связывания с клеткой. Предполагается наличие нейротоксинов у некоторых штаммов M. pneumonia. Экзотоксин имеют M. pneumonia и M. fermentans. Эндотоксин микоплазмы пневмонии повреждает реснички респираторного эпителия и нейтрофилы человека. Гемолизины – микоплазмы пневмонии вызывает β-гемолиз эритроцитов человека. Микоплазмы могут продуцировать ферменты агрессии и защиты: нейроминидазу, протеазы, нуклеазы. М. urealytikum разрушает ДНК сперматозоидов. Микоплазмы, расположенные внутри клеток и паразитирующие на мембране клеток, резистентны к механизмам защиты хозяина. Микоплазмы обладают иммуномодулирующим действием.
Особенности микоплазмозов:
- не имеют собственных клинических проявлений;
- заболевание может протекать остро, но чаще всего микоплазмозы имеют хроническое рецидивирующее течение; характерно длительное носительство микоплазм в составе ЦИК
- обладают способностью “ускользать” от иммунного надзора хозяина. 7
- чаще они развиваются на фоне имунносупресии и сопровождаются различными иммунопатологическими реакциями
- микоплазмы могут проникать в клетку где и встречаются с вирусами
- микоплазмы могут поражать любые органы и ткани
M. pneumonia е – вызывает атипичную пневмонию, бронхиты и т. д. Источник - человек, путь передачи воздушно-капельный.
Внелегочные проявления M. pneumoniaе инфекции: гематологические (гемолитическая анемия, тромбоцитопения) неврологические (менингит, менингоэнцефалит, периферические и черепно-
мозговые невриты)
дерматологические (полиморфная эритема) желудочно-кишечные (гастроэнтерит) мышечно-скелетные (миалгия, артралгия, полиартрит) сердечнососудистые (перикардит, миокардит) генерализованные проявления.
Микробиологическая диагностика:
-Серодиагностика
-ПЦР
-Иммуноиндикация
Урогенитальные микоплазмозы
Источник - человек, путь передачи – половые контакты, относится к ИППП. Возбудители - M. hominis, M. genitalium, M. urealytikum; вызывают поражения мочеполового тракта. Осложнения - патология беременности, родов и заболевания новорожденных.
Микробиологическая диагностика:
- иммуноиндикация
- культуральный метод – микоплазмы считаются возбудителями, если их количество составляет ≥ 104 КОЕ/мл. Специфической профилактики нет.
Этиотропная терапия макролиды тетрациклины фторхиналон.
L-форма бактерий
Это бактерии, полностью или частично лишенные клеточной стенки. Эти формы бактерий способны к размножению. Первоначально считалось, что их можно получать in vitro. Однако было установлено, что L –формы бактерий образуются в организме животных и человека. В настоящее время переход бактерий в L –формы значительно участился, что связано с широким применением β –лактамных антибиотиков.
Различают стабильные и нестабильные L –формы бактерий.
Стабильные формы бактерий полностью лишены клеточной стенки. У нестабильных форм элементы клеточной стенки сохранены и при определенных условиях они могут реверсировать в исходный бактериальный вид.
Механизмы образования L –форм бактерий разные. В популяции бактерий постоянно происходят спонтанные мутации по любому признаку, в том числе возможно появление мутантов с дефектной клеточной стенкой; L- трансформирующие агенты, в том числе ингибиторы синтеза клеточной стенки, играют роль фактора селекции предсуществующих в популяции спонтанных мутантов.
Подавление синтеза клеточной стенки происходит под действием Lтранфсформирующих агентов, том числе бета-лактамных антибиотиков. В любом случае образование L –форм следует расценивать как результат изменчивости бактерий, что позволяет им выжить в новых условиях (под давлением антибиотиков).
В настоящее время доказано, что образование L –форм бактерий лежит в основе рецидивирующих заболеваний, таких как туберкулёз, ревматизм, сифилис, бруцеллез, эндокардиты и т.д.
III. Заключение: студенты ознакомлены с вопросами этиологии, этиопатогенеза, лабораторной диагностики, специфической профилактики и этиотропной терапии хламидийной и микоплазменной инфекции.
Хламидии
Представляют большую группу облигатных внутриклеточныхэнергетических паразитов. Зависимость хламидий от клеток объясняется ихнеспособностью синтезировать (АТФ). Это - энергетические паразиты. Хламидии неподвижные, кокковидные, Гр (-) микроорганизмы. Спор икапсул не имеют, неподвижны.Размножаются в цитоплазме клеток хозяина,проходя определенные стадии развития.Антигенное строение сложное Они имеют:
1.Общий, групповой, родоспецифическийантиген, представленный термостабильными липополисахаридами (LPS)- эндотоксин.
2.Видоспецифический и серовароспецифический антигены – позволяющие дифференцировать хламидии на виды и серовары.
