В основе метода лежит способность альдегидной группы лактозы в щелочной среде окисляться молекулярным йодом:
.
Избыточное количество йода, которое не вступило в реакцию, определяют титрованием тиосульфатом натрия, используя в качестве индикатора крахмал.
Материалы и реактивы: складчатые бумажные фильтры, молоко, 7%-ный раствор сульфата меди, 2%-ный раствор гидроксида натрия, 5%-ный раствор фторида натрия, 0,05 моль/л раствор йода, 5%-ный раствор соляной кислоты, 0,05 моль/л раствор тиосульфата натрия, 1%-ный раствор крахмала.
Оборудование: стеклянные палочки, пипетки градуировочные, колбы мерные (объем 50 мл), колбы конические с притертой пробкой (объем 100 мл), воронки стеклянные, бюретки, капельницы, часы.
Ход работы. В две мерные колбы вносят по 5 мл раствора сульфата меди, по 5 мл раствора гидроксида натрия и по 2,5 мл раствора фторида натрия. В одну из них (проба) добавляют 5 мл молока, в другую (контроль) – 5 мл дистиллированной воды, перемешивают и доводят дистиллированной водой до объема 50 мл, через 30 мин. фильтруют. Затем в конические колбы переносят по 20 мл фильтрата пробы и контроля, вливают по 20 мл раствора йода и, непрерывно перемешивая, по 10 мл раствора гидроксида натрия. Тщательно закрывают. Через 20 мин к содержимому колб добавляют по 10 мл раствора соляной кислоты, по три капли раствора крахмала и титруют раствором тиосульфата натрия до исчезновения окраски, образовавшейся при добавлении крахмала.
Массовую концентрацию лактозы в молоке (мг/мл) рассчитывают по формуле
,
где А и В – объем раствора тиосульфата натрия, затраченный на титрование пробы и контроля;
f – коэффициент поправки на титр 0,05 моль/л раствора тиосульфата натрия;
Q – масса лактозы (18,01 мг), эквивалентная 1 мл 0,05 моль/л раствора тиосульфата натрия;
V0 – общий объем пробы;
V1 и V2 – объемы фильтрата и молока, соответственно, взятые для исследования.
Практическая часть
Таблица 1 – Массовая концентрация углеводов в исследуемых веществах.
| Название углевода | Исследуемое вещество | Массовая концентрация, мг/мл |
| Глюкоза | Раствор глюкозы | 110,88 |
| Глюкоза | Солодовая вытяжка | 0,79 |
| Лактоза | Молоко | 2,7 |
Вывод: в этой лабораторной работе мы познакомились с различными количественными методами определения содержания углеводов в исследуемых веществах. Наши опыты показали, что в растворе глюкозы содержалось 110,88 мг/мл глюкозы, в солодовой вытяжке находилось всего 0,79 мг/мл этого же сахара, а в молоке мы определяли уже лактозу, ее содержание – 2,7 мг/мл.
