Определение наличия протеев

Метод базируется на способности бактерий рода Proteus при посеве определенного количества продукта в конденсационную воду свежескошенного питательного агара давать ползучий рост раньше других видов бактерий.

Ход определения

1. Приготовить скошенный питательный агар.

2. Использовать разведения продукта предыдущих определений. Внести по 1 см³ 1-го, 2-го и 3-го разведений продукта в предварительно промаркированные пробирки со скошенным РПА. Материал следует вносить в пробирки, не касаясь скошенной поверхности среды. Посевы поместить в термостат при 37⁰С на 24 ч.

3. После инкубирования посевов отметить наличие в пробирках ползучего роста бактерий и гнилостного запаха.

4. Из колоний, характерных для бактерий рода Proteus, изготовить мазки, окрасить по Граму и микроскопировать с иммерсией. Наблюдаемую картину зарисовать и описать, отметив увеличение микроскопа.

5. Суточную культуру со скошенного агара пересеять штрихом на поверхность скошенного в пробирке фенилаланинового агара. Посевы поместить в термостат при 37⁰С на 24 ч.

6. После термостатирования посевов на поверхность выросшей на скошенном агаре колонии нанести 3-5 капель раствора хлорного железа. Появление интенсивного зеленого окрашивания свидетельствует дезаминировании фенилаланина, что характерно для бактерий рода Proteus.

7. Полученные данные оформить в таблицу.

 

 

Таблица 3. Наличие бактерий рода Proteus в кулинарной продукции

Наименование продукта	Исследуемое количество, г	Рост на скошенном РПА	Окраска по Граму	Дезаминирование фенилаланина	Полученное значение	Нормативное значение	Заключение
ползу- чий рост	гнилостный запах

Вывод. Сделать общий вывод о качестве кулинарной рыбной продукции по исследованным микробиологическим показателям.

 

Контрольные вопросы. 1. С какой периодичностью осуществляют микробиологический контроль кулинарной рыбной продукции? 2. По каким микробиологическим показателям контролируют различные виды кулинарной рыбной продукции? 3. Как производится отбор проб кулинарной рыбной продукции и подготовка их к микробиологическим анализам? 4. Какие виды порчи и пищевые отравления способны вызывать бактерии рода Proteus при развитии в пищевой продукции? 5. Какие среды и реактивы используют для определения бактерий рода Proteus? 6. Какой рост дают бактерии рода Proteus при посеве в конденсационную воду свежескошенного питательного агара? 7. Почему при развитии бактерий рода Proteus отмечается гнилостный запах? 8. Какая микроскопическая картина наблюдается при наличии бактерий рода Proteus в посевах? 9. Как определяется способность бактерий рода Proteus дезаминировать фенилаланин? 10. Какие меры предпринимают на предприятии, если выпускаемая копченая продукция по микробиологическим показателям не удовлетворяют нормативным требованиям?

 

 

Лабораторная работа № 6

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ ВСПОМОГАТЕЛЬНЫХ МАТЕРИАЛОВ

Цель работы. Ознакомление с методами контроля отдельных видов вспомогательных материалов по некоторым микробиологическим показателям.

Задания. 1. Определить количество спор МАФАнМ в пряностях.

2. Определить наличие спор мезофильных клостридий в муке и крупе.

3. Определить наличие стафилококков в растительном масле.

Материалы и оборудование. Стерильная посуда; пробирки с ватными тампонами; физиологический раствор; РПА; РПА с 1% глюкозы; среда Китт-Тароцци; солевой РПБ, молочно-солевой агар, стерильное вазелиновое масло; реактивы для окраски по Граму; 10%-ный раствор NaOH; 10%-ный раствором НCl; 3%-ный раствор Н₂О₂; водяная баня, бактериологическая петля, предметные стекла, индикаторная бумага для определения рН; фильтровальная бумага, иммерсионное масло, дистиллированная вода; термометр; микроскоп; термостаты на 30⁰С и 37⁰С.

Методические указания

Для проведения работы необходимо ознакомиться с теоретическими вопросами микробиологического исследования вспомогательных материалов и нормативной документацией, ответить на контрольные вопросы по темам (МУ, с.9-13, 27-30, 34, 35-43, 50, 53-58).

 

 

1. Определение количества спор МАФАнМ

Определение количества спор МАФАнМ проводят методом глубинного посева прогретого разведения навески исследуемого материала в питательный агар и подсчете всех выросших колоний.

Ход определения

1. Приготовить три десятикратных разведения исследуемой пряности.

2. Третье разведение продукта прогреть на водяной бане при 80⁰С в течение 20 мин, а затем охладить под струей холодной воды до 35-40⁰С. При прогревании в водяную баню одновременно с пробиркой разведения исследуемого материала помещается контрольная пробирка, в которую вносится количество жидкости равное количеству прогреваемого разведения. В контрольную пробирку помещается термометр. Водяная баня перед помещением пробирок должна быть прогрета так, чтобы продолжительность нагревания содержимого пробирок до требуемой температуры составляла 2-3 мин. Отсчет времени прогревания следует начинать с момента достижения в контрольной пробирке температуры 80⁰С. Во время прогревания не допускать колебания температуры более, чем на 1⁰С. По истечении требуемого времени пробирку с пробой следует немедленно охладить.

3. По 1 см³ подготовленного разведения высеять в две параллельные чашки Петри и не позднее 15 мин внести в них питательный агар слоем 4-5 мм.

4. Посевы инкубировать при 30⁰С в течение 72 ч.

5. Произвести учет колоний в чашках и оформить полученные данные в таблицу:

 

Таблица 1. Количество спор МАФАнМ в пряностях

Наименование материала	Исследуемое количество, г	Количество колоний на РПА	Количество спор МАФАнМ, КОЕ/г	Нормативный показатель, КОЕ/г, не более	Заключение