Дополнительный контроль вспомогательных материалов

КОНСЕРВНОГО ПРОИЗВОДСТВА

Цель работы. Ознакомление с методами контроля вспомогательных материалов по некоторым микробиологическим показателям при дополнительном контроле консервного производства

Задания. 1. Определить наличие спор термофильных клостридий

2. Определить наличие спор термофильных аэробных и факультативно-

анаэробных микроорганизмов (ТАФАнМ).

 

Материалы и оборудование. Стерильная посуда; физраствор; среда Китт-Тароцци; уплотненный РПА с 1% глюкозы; 10%-ный раствор NaOH; 10%-ный раствором НCl; 3%-ный раствор Н₂О₂; КПБ (картофельно-пептонный бульон); реактивы для окраски по Граму; 0,04%-ный раствор бромкрезолового пурпурного; фарфоровые чашечки; шпатели; водяная баня; термометр; бактериологическая петля, предметные стекла, индикаторная бумага для определения рН; фильтровальная бумага, иммерсионное масло, дистиллированная вода; микроскоп; термостат на 55-62⁰С.

Методические указания

Для проведения работы необходимо ознакомиться с теоретическими вопросами микробиологического контроля рыбных консервов и нормативной документацией, ответить на контрольные вопросы по темам (МУ, с.9-18, 29-30, 34, 35, 43-50, 42-50, 58-60).

 

1. Определение наличия спор термофильных клостридий

Метод определения спор термофильных клостридий основывается на посеве определенного количества исследуемого материала, прогретого при температуре 95⁰С в течение 20 мин, в регенерированную среду Китт-Тароцци, культивировании посевов при температуре 55-62⁰С в течение 72 ч, регистрации видимых признаков роста микроорганизмов и их идентификации.

Ход определения

1. Регенерировать среду Китт-Тароцци (пробирки прогреть в кипящей водяной бане в течение 10-15 мин мин, а затем быстро охладить в струе холодной воды до температуры 55-62⁰С).

2. Взять навеску исследуемого материала и приготовить разведение 1:10.

3. В пробирки с регенерированной средой Китт-Тароцци высеять то количество пробы, в котором нормируется отсутствие спор термофильных клостридий (например, 1 см³ приготовленного разведения в одну пробирку со средой при исследовании пряностей или по 1 см³ разведения в пять пробирок со средой при исследовании соли, сахара и др.). После посева в пробирки внести стерильное вазелиновое масло слоем около 2 см.

4. Пробирки с посевами прогреть на водяной бане при 95⁰С в течение 20 мин. При прогревании посевов в водяную баню помещается контрольная пробирка с термометром, в которую вносится количество жидкости равное количеству среды в посевах. Водяная баня перед помещением пробирок должна быть прогрета до температуры около 50⁰С. Отсчет времени прогревания следует начинать с момента достижения в контрольной пробирке температуры 95⁰С. Во время прогревания не допускать колебания температуры. По истечении требуемого времени прогревания пробирки с посевами охладить под струей водопроводной воды до температуры 55-62⁰С.

5. Посевы термостатировать при температуре 55-62⁰С в течение 72 ч. Ежедневно наблюдать появление признаков роста микроорганизмов (помутнение среды, образование газа).

6. В пробирках с наличием роста определить каталазу (см. лаб. раб. № 6, п.2).

7. Из пробирок с наличием роста высеять по 0,5 см³ культуральной жидкости в стерильные пипетки. Посевы залить расплавленным и охлажденным до 40⁰С уплотненным питательным агаром с 1% глюкозы столбиком высотой 10-11 см. Посевы термостатируют при 55-62⁰С в течение 72 ч.

8. Отметить наличие роста в пробирках (анаэробные микроорганизмы растут в высоком столбике среды на расстоянии 2-3 см от поверхности)

9. Полученные результаты оформить в таблицу:

 

Таблица. 1. Наличие спор термофильных клостридий во вспомогательных материалах

Наименование материала	Исследуемое количество. г	Рост в среде Китт-Тароцци	Каталаза	Рост в высоком столбике	Полученное значение	Нормативное значение	Заключение