Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


ћикробиологическое исследование. ÷ель исследовани€: вы€вление пневмококка.




÷ель исследовани€: вы€вление пневмококка.

ћатериал дл€ исследовани€

1. ћокрота (пневмони€).

2. —лизь из зева (ангина).

3. ќтдел€емое из €звы (ползуча€ €зва роговицы).

4. ¬ыделение из уха (отит).

5. √ной (абсцесс).

6. ѕлевральный пунктат (плеврит).

7.  ровь (подозрение на сепсис).

—пособы сбора материала


—пособы сбора материала

1 (Ћучше брать утреннюю мокроту (при специфической пневмонии мокрота имеет ржавый цвет).)

ќсновные методы исследовани€

1. ћикроскопический.

2. ћикробиологический.

3. Ѕиологический.

’од исследовани€

ѕервый день исследовани€


ѕервый день исследовани€

Ѕиологическа€ проба. Ќемного (3-5 мл мокроты) эмульгируют в стерильном бульоне, 0,5 мл этой смеси ввод€т внутрибрюшинно белой мыши. „ерез 6-8 ч у мыши отмечаютс€ признаки заболевани€. ¬ это врем€ пневмококк уже можно обнаружить в экссудате брюшной полости. Ёкссудат берут стерильным шприцем. »з него делают мазки, окрашивают по √раму и микроскопируют. ƒл€ выделени€ чистой культуры экссудат засевают на агар с сывороткой. ≈сли мышь погибает или заболевает, делают посев крови из сердца на агар с сывороткой крови дл€ выделени€ чистой культуры. ѕосевы став€т в термостат.

”скоренный метод определени€ типа пневмококка (реакци€ микроагглютинации). 4 капли экссудата из брюшной полости зараженной мыши нанос€т на предметное стекло.   первой капле прибавл€ют агглютинирующую сыворотку I типа, ко второй - сыворотку II типа, к третьей - III типа, к четвертой - изотонический раствор натри€ хлорида (контроль).

—ыворотки I и II типа предварительно развод€т в соотношении 1:10, а сыворотку III типа - 1:5. ¬се капли размешивают, высушивают, фиксируют и окрашивают разведенным фуксином. ѕри положительном результате в одной из капель отмечаетс€ скучивание микробов (агглютинаци€).

¬торой день исследовани€

ѕосевы вынимают из термостата, просматривают и из подозрительных колоний делают мазки. ѕри наличии в мазках грамположительных ланцетовидных диплококков 2-3 колонии выдел€ют на скошенный агар с сывороткой дл€ получени€ чистой культуры. ѕосевы помещают в термостат. »з бульона делают мазки, окрашивают по √раму и микроскопируют.

“ретий день исследовани€

ѕосевы вынимают из термостата. ѕровер€ют чистоту культуры - делают мазки, окрашивают по √раму и микроскопируют. ѕри наличии в выделенной культуре грамположительных ланцетовидных диплококков провод€т идентификацию выделенной культуры путем посева:

1) на среды √исса (лактоза, глюкоза, сахароза, мальтоза) провод€т посев обычным способом - уколом в среду;

2) на среду с инулином;

3) на среду с оптохином;

4) став€т пробу с желчью.

ѕроба на инулин. »сследуемую культуру засевают на питательную среду, содержащую инулин и лакмусовую настойку, и став€т в термостат. „ерез 18-24 ч посевы вынимают из термостата. ѕри наличии пневмококков среда окрашиваетс€ в красный цвет (стрептококки консистенцию и цвет среды не мен€ют).

ќпределение чувствительности к оптохину. ¬ыделенную культуру засевают на 10% агар с кровью, содержащий оптохин 1:50000. ѕневмококки, в отличие от стрептококков, не растут на средах, содержащих оптохин.

ѕроба с желчью. ¬ агглютинационные пробирки наливают по 1 мл исследуемой бульонной культуры. ¬ одну из них добавл€ют каплю кроличьей желчи, втора€ пробирка служит контролем. ќбе пробирки помещают в термостат. „ерез 18-24 ч наступает лизис пневмококков, который выражаетс€ в просветлении мутного бульона. ¬ контроле взвесь остаетс€ мутной.

ѕробу с желчью можно поставить на плотной питательной среде. ƒл€ этого на колонию пневмококков, выросших в чашках с агаром и сывороткой, нанос€т крупинку сухой желчи - колони€ раствор€етс€ - исчезает.

„етвертый день исследовани€

ѕроизвод€т учет результатов (табл. 26).


“аблица 26. ƒифференциаци€ пневмококка от зелен€щего стрептококка

ѕримечание. к - расщепление углеводов с образованием кислоты.

¬ насто€щее врем€ широко используютс€ серологические методы исследовани€ (–—  и –»√ј) дл€ определени€ стрептококковых антител. ќпределение группы и серовара выделенной культуры производ€т с помощью флюоресцирующих антител.

ќпределение вирулентности пневмококка. —уточную бульонную культуру пневмококка развод€т 1% пептонной водой от 10-2 до 10-8, 0,5 мл каждого разведени€ ввод€т двум белым мышам.  ультуру, вызвавшую гибель мышей в разведении 10-7, оценивают как вирулентную, в разведении 10-4-10-6 считают средневирулентной.  ультура, не вызвавша€ гибель мышей, авирулентна.

 онтрольные вопросы

1.  акие методы выделени€ чистой культуры пневмококков ¬ы знаете?

2.  акое животное наиболее чувствительно к пневмококку?

3.  акие реакции став€т с экссудатом зараженной мыши и с какой целью?

4. ќт каких представителей гноеродных кокков следует дифференцировать пневмококк и с помощью какой пробы?

5.  ак определить вирулентность пневмококков?

«адание

—оставьте схему исследовани€ мокроты, указав его этапы по дн€м.

ѕитательные среды

јгар с сывороткой (см. главу 7).

Ѕульон с сывороткой (см. главу 7).

јгар с кровью (см. главу 7).

—реды √исса (сухие).

—реда дл€ пробы с инулином.   200 мл дистиллированной воды прибавл€ют 10 мл инактивированной бычьей сыворотки, 18 мл лакмусовой настойки и 3 г инулина. —терилизуют текучим паром при 100∞ — 3 дн€ подр€д. ∆елчный бульон (см. главу 7).

√лава 16. ћенингококки

–од Neisseria включает два вида микробов, патогенных дл€ человека: N. meningitidis и N. gonorrhoeae. Neisseria meningitidis были выделены из цереброспинальной жидкости больного ¬ексельбаумом (1887).

ћорфологи€. ћенингококки - это парные кокки, состо€щие из двух бобовидных кокков, лежащих вогнутыми сторонами друг к другу, наружные стенки у них выпуклые (см. рис.4). –азмер каждого кокка 0,6-0,8 × 1,2-1,5 мкм. ќни полиморфны. ћенингококки неподвижны, не имеют спор, образуют капсулу. √рамотрицательны. ¬ чистых культурах располагаютс€ тетрадами и в виде отдельных кокков без определенного пор€дка, а в мазках, приготовленных из спинномозговой жидкости, чаще располагаютс€ попарно. ¬ гнойном материале наход€тс€ внутри лейкоцита.

 ультивирование. ћенингококки - аэробы. ќни требовательны к питательным средам, размножаютс€ только на средах, содержащих нативный белок (сыворотку, кровь). –астут при температуре 36-37∞ — (при 25∞ — рост прекращаетс€), рЌ среды 7,4-7,6. ƒл€ их размножени€ необходима влажна€ среда и повышенное количество углекислоты (фактор, стимулирующий их рост). ѕосев следует производить на свежеприготовленную среду.

Ќа плотных питательных средах менингококки образуют небольшие 2-3 мм в диаметре, нежные, полупрозрачные, голубоватые, в€зкие колонии. ¬ бульоне с сывороткой менингококки дают легкую муть и небольшой осадок. —вежевыделенные штаммы в S-форме. —тарые культуры могут диссоциировать, образовывать шероховатые R-формы колоний.

‘ерментативные свойства. Ѕиохимически менингококки мало активны. ќни расщепл€ют глюкозу и мальтозу с образованием кислоты. ѕротеолитические свойства у них не выражены (не створаживают молоко, желатин не разжижают).

ѕатогенность менингококков обусловливаетс€ наличием капсулы, котора€ преп€тствует фагоцитозу, пи лей, способствующих прикреплению микроба к поверхности эпителиальных клеток, и образованием ферментов: гиалуронидазы и нейраминидазы.

“оксинообразование. ѕри разрушении бактериальных клеток высвобождаетс€ сильный термоустойчивый эндотоксин, который €вл€етс€ липополисахаридом клеточной стенки. ѕри заболевании он обнаруживаетс€ в крови и в спинномозговой жидкости больных. “€жесть заболевани€ часто зависит от количества накопившегос€ токсина.

јнтигенна€ структура. ѕо полисахаридному (капсульному) антигену менингококки раздел€ют на серогруппы: ј, ¬, —, D, X, Y U-135 29E (всего дев€ть серогрупп).

—огласно международной классификации основными группами €вл€ютс€ ј, ¬ и —. ћенингококки группы ј часто вызывают генерализованные процессы и имеют наибольшее эпидемиологическое значение. ћенингококки групп ¬ и — вызывают спорадические заболевани€. ќстальные серогруппы мало изучены.

”стойчивость к факторам окружающей среды. ћенингококки малоустойчивы. “емпература 70∞ — губит их через 2-3 мин, 55∞ — - через 5 мин. ¬ отличие от других кокков этой группы они плохо перенос€т низкую температуру, особенно чувствительны к температурным колебани€м.

ќбычные концентрации дезинфицирующих растворов губ€т их быстро.

¬осприимчивость животных. ¬ естественных услови€х животные не чувствительны к менингококкам. Ќо при субдуральном введении менингококков обезь€нам можно вызвать у них заболевание.

¬нутрибрюшинное заражение морских свинок и белых мышей вызывает их гибель за счет действи€ эндотоксина.

»сточники инфекции. Ѕольной человек и бактерионоситель.

ѕути передачи. ќсновной путь воздушно-капельный.

«аболевани€ у человека:

1) назофарингит;

2) менингококкцеми€;

3) цереброспинальный эпидемический менингит.

ѕатогенез. ѕопав на слизистую оболочку носоглотки, менингококки могут там локализоватьс€, обусловив носительство или вызвать острый назофарингит. ≈сли они проникают в лимфатические сосуды, кровь и генерализуютс€, то вызывают глубокие изменени€ в паренхиматозных органах за счет действи€ эндотоксина. –азвиваетс€ менингококкцеми€. ѕри проникновении менингококков в мозговые оболочки возникает гнойное воспаление - менингит. ѕри менингококковом менингите спинномозгова€ жидкость мутна€ (в отличие от туберкулезного менингита). ѕри спинномозговой пункции жидкость вытекает струей вследствие повышенного внутричерепного давлени€. ћенингеальные €влени€ характеризуютс€ головной болью, ригидностью затылка, рвотой и т. д. ћенингитом чаще болеют дети. ” взрослых чаще заражение ограничиваетс€ носительством или назофарингитом.

»ммунитет. ѕостинфекционный иммунитет напр€женный, он обусловливаетс€ опсонинами, комплементсв€зывающими и бактериоцидными антителами. ќт интенсивности образовани€ антител к полисахаридным и белковым антигенам зависит течение заболевани€.

ѕрофилактика. —водитс€ к раннему вы€влению носителей, изол€ции заболевших назофарингитом. Ѕольные подлежат госпитализации.

—пецифическа€ профилактика. –азработана химическа€ вакцина, состо€ща€ из полисахаридов серогрупп ј и —. ƒл€ экстренной профилактики используетс€ иммуноглобулин.

Ћечение. јнтибактериальные препараты - пенициллин, левомицетин, ампициллин.

 онтрольные вопросы

1.  аковы морфологические свойства менингококков?

2. Ќа каких средах выращивают менингококки и какие услови€ необходимы дл€ их размножени€?

3.  акова биохимическа€ активность менингококков и их устойчивость во внешней среде?

4.  акие заболевани€ вызывают менингококки?

5. ѕо какому антигену дел€т менингококки на серогруппы?





ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2016-11-22; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 1979 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

—вобода ничего не стоит, если она не включает в себ€ свободу ошибатьс€. © ћахатма √анди
==> читать все изречени€...

545 - | 489 -


© 2015-2023 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.015 с.