Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


 линико-биохимическое исследование




(’олод ¬.ћ., ћацинович ј.ј.)

¬ насто€щее врем€ в клинической лабораторной диагностике широко используютс€ современные биохимические и иммунохимические методы. — целью совершенствовани€ и ускорени€ проведени€ исследований примен€ютс€ полуавто- и автоанализаторы и большое количество лабораторно- диагностических наборов и тест-систем.

 оличественное определение исследуемых компонентов проводитс€ обычно УмокрымФ анализом, когда и исследуемые вещества и химические реагенты наход€тс€ в растворенном состо€нии.

ƒл€ полуколичественных и иногда количественных определений используетс€ также метод УсухогоФ анализа, когда на специальную бумагу или пленку в определенных пропорци€х нанос€тс€ химические реагенты, необходимые дл€ анализа, высушиваютс€ и стабилизируютс€. ѕосле нанесени€ точного объема биологической жидкости (кровь, сыворотка и др.) реагенты активируютс€ и химическа€ реакци€ протекает так же, как и при УмокромФ анализе. –азработанные дл€ этих целей тест-полоски, имеют довольно сложное строение и состо€т из нескольких слоев. ¬ наружном слое происходит отделение сыворотки от форменных элементов. —ыворотка затем проникает в нижележащие слои, содержащие химические реагенты, которые отделены друг от друга. »зменение окраски продуктов реакции регистрируетс€ с помощью отражательного фотометра.

ƒл€ качественной оценки или полуколичественных определений широко используютс€ диагностические полоски, которые позвол€ют определ€ть в биологических жидкост€х различные вещества (белки, углеводы, кетоновые тела, желчные пигменты и др.). ѕолоску опускают в биологическую жидкость, затем извлекают, подсушивают фильтровальной бумагой и прикладывают к цветной стандартной шкале. —равнивают окраски и делают вывод о наличии определенных веществ и их примерном содержании.

¬ насто€щее врем€ практически дл€ всех биохимических показателей, имеющих клиническое значение, различными лаборатори€ми и фирмами выпускаютс€ диагностические наборы, включающие все необходимые компоненты дл€ проведени€ исследовани€ и инструкцию по его проведению. ѕоэтому при проведении массовых анализов следует ориентироватьс€ на их использование, а не пытатьс€, как раньше, проводить всю подготовительную работу своими силами.

ƒо насто€щего времени основным биологическим объектам, используемым в клинико-биохимических исследовани€х, €вл€етс€ кровь. ’имический состав крови и других биологических жидкостей не €вл€етс€ посто€нным, поскольку в организме в результате обмена веществ расходуютс€ одни и накапливаютс€ другие вещества. Ёти колебани€ происход€т в определенных пределах, характерных дл€ данного животного (индивидуальные колебани€) или вида в целом.

 ровь занимает особое место среди других биологических жидкостей и тканей, используемых дл€ клинико-биохимических исследований. Ќа прот€жении всей истории лабораторных исследований в медицине и ветеринарии кровь €вл€етс€ исключительно важным объектом исследовани€ в прикладных цел€х. Ёто положение сохран€етс€ на сегодн€шний день и сохранитс€ в будущем.

¬ насто€щее врем€ имеетс€ большой экспериментальный материал по химическому составу крови у сельскохоз€йственных животных, который может быть использован дл€ диагностики различных заболеваний, контрол€ полноценности рациона и обеспеченности биологически важными веществами, определени€ характера и степени воздействи€ ксенобиотиков, лекарственных веществ на организм.

ќбнаружение патологических или иных отклонений происходит путем сравнени€ исследуемых величин со значени€ми, характерными дл€ здорового животного (референтными, эталонными значени€ми).

¬ зависимости от природы исследуемого вещества дл€ определени€ беретс€ цельна€ кровь или сыворотка. ≈сли вещество равномерно распределено между форменными элементами и сывороткой (глюкоза, мочевина и др.), то дл€ исследовани€ берут обычно цельную кровь. ѕри неравномерном распределении используют сыворотку или плазму.

— целью получени€ воспроизводимых результатов при проведении клинико-биохимических исследований проводитс€ всесторонн€€ унификаци€ методов и полученных результатов. ќдним из способов такой унификации €вл€етс€ использование ћеждународной системы единиц (—»).

ѕоскольку использование единиц —» в различных област€х знаний имеет свои особенности, выработаны рекомендации по применению этой системы в медицине и ветеринарии. ¬ части, касающейс€ вопросов клинической биохимии и выражени€ результатов биохимических исследований, их можно свести к следующему.

 оличество вещества должно выражатьс€ в мол€х и кратных от него значени€х. ≈сли мол€рна€ масса неизвестна или исследуемый компонент €вл€етс€ смесью веществ, то количество вещества должно выражатьс€ в килограммах и кратных от него значени€х.

ƒопускаетс€ использование р€да единиц, не относ€щихс€ к системе —». “ак, в качестве единицы объема рекомендуетс€ брать литр. ¬ременные данные следует выражать по возможности в секундах или сутках (24 ч). –езультаты ферментативной активности допускаетс€ выражать не только на секунду, но также на минуту и час.

¬ некоторых случа€х в лабораторной практике допускаетс€ применение и внесистемных единиц, например при использовании тимоловой пробы. ¬ этом случае €вл€етс€ об€зательной ссылка на использованные методы. ¬ процентах выражаетс€ содержание однородных величин, например белковых фракций сыворотки крови.

»з физико-химических методов в клинической биохимии чаще всего используют оптические методы Ц колориметрию, спектрофотометрию, нефелометрию, атомно-абсорбционную фотометрию, флюорометрию.

Ќаиболее широко распространены методы с колориметрическим и спектрофотометрическим окончанием, когда о количестве исследуемого вещества суд€т по величине светопоглощени€ раствора. »спользуемые дл€ этих определений фотометрические приборы подраздел€ютс€ на фотоэлектроколориметры ( ‘ -2,  ‘ -3 и др.) и спектрофотометры (—‘-46, Ђ—оларї и др.).

ƒл€ массовых определений большого числа химических элементов используют метод атомно-абсорбционной фотометрии, основанный на поглощении света атомами вещества, наход€щегос€ в газообразном состо€нии.

≈сли вещество находитс€ в коллоидном состо€нии (коллоидный раствор), то используют нефелометрию, а если вещество способно при ультрафиолетовом облучении к флуоресценции Ц флюорометрию.

¬ р€де случаев в клинико-биохимических исследовани€х, изучаема€ смесь веществ должна быть подвергнута предварительному разделению. ¬ этих случа€х используют такие методы как электрофорез и хроматографи€. Ёлектрофорез Ц процесс разделени€ зар€женных биомолекул в электрическом поле. ’роматографи€ - процесс разделени€ многокомпонентных систем, основанный на многократно повтор€ющихс€ €влени€х сорбции и десорбции в динамических услови€х. »меющиес€ в насто€щее врем€ разнообразные приборы дл€ электрофореза и хроматографические анализаторы снабжены детекторами и позвол€ют не только разделить смесь веществ, но и количественно определить отдельные компоненты (например, белковый состав сыворотки крови).

»з других физико-химических методов Ц в клинико-биохимических исследовани€х широко используетс€ потенциометри€ (ионометри€). ќна основана на измерении Ёƒ— цепей, составленных из индикаторного электрода, потенциал которого зависит от активности (концентрации) исследуемого иона и электрода сравнени€. Ќаиболее широкое распространение в клинико-биохимической практике получило потенциометрическое определение рЌ биологических жидкостей. ќднако сейчас создано большое число ионоселективных электродов, позвол€ющих проводить потенциометрическое определение не только Ќ+, но практически всех катионов и многих анионов.

¬ клинической лабораторной практике дл€ определени€ традиционных биохимических объектов Ц белков, ферментов, гормонов, медиаторов, фармакологических препаратов все чаще используютс€ иммунохимические методы. Ќаиболее часто дл€ этих целей используютс€ так называемые Уметоды св€зывани€Ф - радиоиммунологический анализ (–»ј) и иммуноферментный анализ (»‘ј). — помощью радиоиммунологического анализа возможно определение большого числа биологически активных соединений, но наиболее широко он используетс€ в эндокринологии.

–адиоиммунологический анализ провод€т с помощью стандартных диагностических наборов, в которые входит все необходимое (реагенты, посуда, инструкци€ по применению, выпускаемые заводским способом). ѕри наличии таких наборов радиоиммунологическое определение сводитс€ к последовательному выполнению определенных операций и замеру радиоактивности.

ћетод »‘ј отличаетс€ от –»ј тем, что в качестве метки здесь используетс€ не радиоактивный изотоп, а фермент. Ёто значительно упрощает определение. ћетод »‘ј не только широко используетс€ при диагностике различных инфекционных заболеваний, но также дл€ определени€ различных химических соединений - антибиотиков, белков и полипептидов, гормонов, микотоксинов, пестицидов, пищевых добавок и др.

ћетоды »‘ј дел€тс€ на гетерогенные (твердофазные) и гомогенные, отличающиес€ по принципу проведени€ анализа. √етерогенные методы основаны на использовании антигенов и антител, иммобилизованных на нерастворимых носител€х (как правило, пластик). √омогенные методы основаны на эффекте модул€ции антителами активности фермента (или кофактора), используемого в качестве метки антигена.

ѕри наличии наборов, предназначенных дл€ определени€ определенных веществ, также как и в случае –»ј, в соответствии с инструкцией последовательно выполн€ютс€ определенные операции и результат, обычно, количественно учитываетс€ фотометрически.

»сследование ферментов. ¬ клинико-биохимических исследовани€х чаще всего исследуютс€ индикаторные ферменты, которые, наход€сь и функциониру€ внутри клеток, в биологические жидкости (кровь) попадают вследствие нарушени€ проницаемости клеточных мембран или даже их разрушени€ в результате патологического процесса. “ак как концентраци€ (активность) внутриклеточных ферментов значительно выше, чем в крови, то наличие гиперферментемии указывает на патологию. ’арактер, локализаци€ и т€жесть патологического процесса определ€ют, какие ферменты и в каком количестве будут выходить в кровь, а в некоторых случа€х и в мочу. ≈сли повреждена только наружна€ клеточна€ мембрана, выход€т в основном ферменты цитоплазмы, при более глубоких повреждени€х клетки и повреждении мембран клеточных органелл (митохондрий, лизосом, €дер и др.) в крови по€вл€ютс€ соответствующие ферменты. ѕри остром процессе с гибелью большого числа клеток количественные изменени€ будут выражены более резко, чем при в€ло текущем хроническом процессе. Ёти изменени€ позвол€ют судить о глубине поражени€ и динамике повреждени€.

«начительно реже наблюдаетс€ при патологии гипоферментеми€. Ёто происходит в случае определени€ секреционных ферментов, которые реализуют свою каталитическую функцию, будучи секретированными из клеток в плазму крови. ѕонижение их активности служит признаком повреждени€ секретирующего органа.

Ќекоторые ферменты обладают низкой органной специфичностью и широко распространены в ткан€х, отлича€сь только концентрацией, другие более специфичны и обнаруживают активность в одном или ограниченном числе источников. Ќаибольшую диагностическую ценность представл€ют те ферменты, которые специфичны дл€ определенных органов или тканей.

¬ клинической лабораторной практике использование ферментных методов следует осуществл€ть комплексно, путем одновременного исследовани€ нескольких ферментов, что значительно повышает диагностическую ценность их применени€.

¬ некоторых случа€х используетс€ определение изоферментов. »зоферменты Ц молекул€рные формы одного и того же фермента. ќпределение изоферментов в сыворотке крови имеет важное диагностическое значение, так как распределение в ткан€х отдельных изоферментов более специфично, чем общей ферментативной активности. Ќапример, в клинико-биохимической диагностике довольно широко используетс€ определение активности такого фермента, как щелочна€ фосфатаза. ¬ сыворотку крови щелочна€ фосфатаза поступает в основном из костной ткани, печени и кишечника. ѕоэтому при патологии этих органов активность щелочной фосфатазы будет возрастать и дифференциальную диагностику на основании определени€ общей активности провести нельз€. ќднако УкостныйФ и УпеченочныйФ изоферменты различаютс€ по своей электрофоретической подвижности и температурной устойчивости, что позвол€ет проводить их раздельное определение. ”величение активности УкостногоФ изофермента свидетельствует о поражении костной ткани, в то врем€, как увеличение УпеченочногоФ - говорит о патологии печени.

 оличественные методы, используемые в клинической энзимологии, могут быть основаны на фотометрическом определении образующихс€ в результате реакций продуктов. ≈сли они не окрашены, используютс€ дополнительные химические реакции с определенными реагентами с целью получени€ окрашенных продуктов. Ќедостатком этих методов €вл€етс€ то, что измерение провод€т по конечной точке.

Ѕолее точными €вл€ютс€ кинетические методы исследовани€, когда определ€ют не конечный продукт ферментативной реакции, а кинетику самой реакции. ѕри этом производ€т определение по ходу реакции, выбира€ дл€ замеров 2 временные точки и более.  инетические методы основаны на оптическом тесте ¬арбурга. ќн заключаетс€ в том, что один из продуктов дегидрогеназной реакции восстановленный ЌјƒЌ сильно поглощает в ближней ультрафиолетовой области. “ак как многие Ќјƒ Ц зависимые дегидрогеназы используютс€ в клинико-биохимических исследовани€х, оптический тест ¬арбурга нашел широкое применение. ќн лежит в основе методических принципов, на основе которых разработано большое количество наборов реактивов, выпускаемых промышленным способом.

ѕри изучении ферментов необходимо подбирать наиболее оптимальные услови€ исследовани€.   их числу обычно относ€т следующие:

1. »сследование ферментов следует проводить при оптимальном рЌ, создаваемом буферными растворами и оптимальной температуре (25-37 ∞—).

2. ќпределение активности ферментов нужно проводить при начальных скорост€х катализируемых реакций.

3.  онцентраци€ субстрата примерно в 10 раз должна превышать значение константы ћихаэлиса.

4. »сследование малоактивных ферментов следует проводить с применением активаторов, например, активность креатинкиназ в присутствии сульфгидрильных соединений (цистеин и др.) возрастает в дес€тки раз.

ƒл€ определени€ изоферментов используют электрофорез на различных носител€х Ц полиакриламиде, агаре или крахмале, а также хроматографические или иммунохимические методы. јктивность отдельных изоферментов после электрофореза определ€ют или визуально, отмеча€ наиболее интенсивно окрашенные полосы, либо путем денситометрии. ƒл€ иммунологической дифференциации отдельных изоферментов используют моноспецифические сыворотки.

јспартатаминотрансфераза обратимо катализируетреакцию переноса аминогруппы с L-аспартата наa-кетоглутарат. ќбнаруживаетс€ у животных во всех органах и ткан€х, но наибольша€ активность наблюдаетс€ в печени, миокарде, скелетной мускулатуре. ѕоэтому определение активности фермента широко используетс€ при заболевани€х печени, сердца, мышц.

ќсобенно высокие значени€ активности фермента наблюдаютс€ при заболевани€х, сопровождающихс€ поражением клеток печени. ѕовышение активности фермента в сыворотке крови, наблюдаетс€ при травмах скелетной мускулатуры, паралитической миоглобинурии у лошадей, беломышечной болезни овец, мышечной дистрофии у свиней.

јланинаминотрансфераза обратимо катализирует реакцию переноса аминогруппы с L-аланина на a-кетоглутарат. “акже как и у аспартатаминотрансферазы, наибольша€ активность наблюдаетс€ в печени, мышцах, миокарде и используетс€ дл€ диагностики поражений этих органов. “ак как сердечна€ мышца содержит больше аланинаминотрансферазы, то гиперферментеми€ более специфична дл€ заболеваний сердца (инфаркт миокарда у свиней). ѕри поражени€х печени активность аланинаминотрансферазы возрастает быстрее и труднее приходит в норму.

јльдолаза (фруктозобисфосфатальдолаза) Ц фермент активно расщепл€ет фруктозо-1,6-бисфосфат на два триозофосфата. ¬ лабораторно-клинической практике фермент исследуют в сыворотке крови. ќднако необходимо иметь ввиду, что в значительно большем количестве он содержитс€ в форменных элементах. ѕоэтому даже небольшой гемолиз может искажать результаты исследовани€. Ќаиболее посто€нное и значительное повышение активности альдолазы наблюдаетс€ при острых гепатитах, травмах скелетной мускулатуры и больших физических нагрузках у лошадей. Ќекоторыми авторами отмечаетс€ резкое повышение активности фермента при кетозе у коров.

√амма-глутамилтрансфераза катализирует перенос гамма-глутамиловой группы с гамма-глутамилпептида на акцепторный пептид и аминокислоту. √амма-глутамилтрансфераза - мембраносв€занный фермент, встречающийс€ в большинстве тканей млекопитающих. Ќаибольша€ активность обнаружена в почках и поджелудочной железе. ѕовышаетс€ она при основных формах нефропатий и панкреатитах. ќпределение гамма-глутамилтрансферазы следует проводить также при заболевани€х печени и желчных путей. ќсобенно резко возрастает активность фермента при закупорке желчных протоков.

ўелочна€ фосфатаза Ц фермент, катализирующий гидролиз эфиров ортофосфорной кислоты в щелочной среде (при рЌ 9,0 Ц 10,0). ўелочна€ фосфатаза содержитс€ во всех органах и ткан€х животных, особенно много ее в костной ткани, печени, почках, слизистой оболочке кишечника. јктивность щелочной фосфатазы в сыворотке крови возрастает, обычно, при заболевани€х костей, сопровождающихс€ пролиферацией остеобластов и при поражении печени, особенно с €влени€ми холестаза. ” молодн€ка она выше, чем у взрослых животных, что обусловлено гиперфункцией остеобластов.

√иперферментеми€ наблюдаетс€ при рахите, остеосаркомах, остеомал€ции. ѕри рахите активность фермента повышаетс€ параллельно т€жести заболевани€ и нормализуетс€ с выздоровлением. “ел€та, содержащиес€ в услови€х гиподинамии, имеют повышенную активность фермента в сыворотке крови. ѕри повреждении паренхимы печени отмечаетс€ умеренное повышение щелочной фосфотазы, при желтой атрофии печени Ц резкое. √ипоферментеми€ наблюдаетс€ при т€желой мышечной дистрофии у овец.

јмилаза Ц фермент катализирует гидролиз a-1,4 гликозидных св€зей крахмала. ’арактерной особенностью фермента €вл€етс€ то, что он легко фильтруетс€ в клубочках почек и легко переходит в мочу. Ѕольше всего его содержитс€ в поджелудочной железе сельскохоз€йственных животных. ќн секретируетс€ с поджелудочным соком и в обычных услови€х поступает в тонкий кишечник, где участвует в пищеварении. Ёти два обсто€тельства (локализаци€ в поджелудочной железе и свободна€ фильтраци€ в почках) обусловили исследование этого фермента в крови и моче при панкреатитах. ќсобенно резкое повышение активности наблюдаетс€ при остро протекающих заболевани€х поджелудочной железы с разрушением клеток и выходом фермента в кровь.

Ћактатдегидрогеназа Ц фермент обратимо катализирует окисление молочной кислоты в пировиноградную. —уществует 5 различных, отличающихс€ по электрофоретической подвижности изоферментов лактатдегидрогеназы. ѕомимо определени€ общей активности в клинических цел€х определ€ют активность одного из изоферментов лактатдегидрогеназы Ћƒ√ (a- гидроксибутиратдегидрогеназы). ќрганоспецифичность лактатдегидрогеназы сравнительно невелика, что затрудн€ет интерпретацию случаев гиперферментемии. Ќаивысша€ активность обнаруживаетс€ у животных в скелетной мускулатуре и миокарде. ѕоэтому активность фермента в сыворотке крови значительно возрастает при поражении сердца и мышц. ќпределени€ лактатдегидрогеназы дл€ диагностики инфаркта миокарда редки, так как он у животных почти не встречаетс€ (за исключением свиней). ” лошадей резко повышаетс€ при травмах скелетной мускулатуры и после больших физических нагрузок. ќтмечено увеличение лактатдегидрогеназной активности в сыворотке крови при паренхиматозном гепатите, интоксикаци€х, лейкозе. —ледует иметь в виду, что увеличение активности лактатдегидрогеназы в сыворотке крови означает, что в каком-то органе произошло повреждение клеток (некроз), изменилась проницаемость клеточных мембран, в результате чего фермент в больших количествах попал в кровь. ”величение активности гидроксибутиратдегидрогеназы (Ћƒ√1) наблюдаетс€ также при т€желых поражени€х печени, многочисленных метастазах.

√лутаматдегидрогеназа катализирует гидролиз L-глутаминовой кислоты с образованием 2-оксоглутарата и аммиака. Ќаивысша€ активность у животных обнаруживаетс€ в печени и почках. ‘ермент в основном локализован в митохондри€х и выход его в кровь происходит при т€желых повреждени€х печеночных клеток. ”меренно повышаетс€ при острых паренхиматозных поражени€х печени и более резко при хронических. »спользуетс€ дл€ диагностики гепатоцеллюл€рных некрозов. »сследование глутаматдегидрогеназы часто провод€т в комплексе с другими ферментами, характеризующими определенную патологию (печени, почек). ƒл€ оценки патологического состо€ни€ иногда используют коэффициент, представл€ющий отношение суммы активностей аспартат и аланинаминотрансфераз к активности глутаматдегидрогеназы. ѕри острых гепатитах он обычно повышен, при хронических и закупорке желчных путей Ц понижен.

—орбитолдегидрогеназа (L-йодитолдегидрогеназа) Ц катализирует окисление L-идитола. јктивность фермента наиболее высока в печени животных, органоспецифичность сорбитолдегидрогеназы выражена в высокой степени. ¬ сыворотке здоровых животных она не обнаруживаетс€ или ее активность очень низка. √иперферментеми€ свидетельствует о повреждении клеток печени, некрозе, нарушении процесса обмена веществ в печени. ¬ услови€х эксперимента при отравлении лошадей четыреххлористым углеродом активность фермента возрастала более чем в 500 раз. ѕовышение активности сорбитолдегидрогеназы возможно также при поражении почек, но патологию их можно определить с помощью других методов.

’олинэстераза разрушает нейромедиатор ацетилхолин и родственные ему вещества. ¬ эритроцитах содержитс€ ацетилхолинэстераза, обладающа€ аналогичным действием. ќна отличаетс€ от холинэстеразы тем, что ингибируетс€ избытком ацетилхолина. ƒиагностическа€ значимость холинэстеразы сыворотки крови определ€етс€ тем, что она синтезируетс€ клетками печени и функционирует в крови. ѕоэтому при повреждени€х печени активность ее в сыворотке крови понижаетс€. ќсобенно характерно снижение активности фермента при отравлении фосфороорганическими €дами.

ѕо этой же причине гипохолинэстераземи€ наблюдаетс€ при недостатке белка в рационе, кахексии и других патологических состо€ни€х, вызывающих снижение белково-синтезирующей функции печени. —нижение холинэстеразной активности сыворотки крови наблюдаетс€ при кетозе у коров. ¬ыздоровление сопровождаетс€ нормализацией активности фермента в сыворотке крови.

“рипсин синтезируетс€ в поджелудочной железе и секретируетс€ с панкреатическим соком в виде неактивного трипсиногена. “рипсин действует на различные пептидные св€зи и чаще всего те, которые образованы карбоксильными группами лизина и аргинина. ѕри панкреатитах, вследствие феномена Ууклонени€ ферментовФ, он попадает в кровь и активность трипсина в ней возрастает. ѕоэтому он нар€ду с другими ферментами, синтезируемыми в поджелудочной железе, используетс€ дл€ диагностики ее заболевани€.

 реатинкиназа Ц фермент обратимо катализирует фосфорилирование креатина с помощью ј“‘. Ќаибольша€ активность фермента у животных отмечаетс€ в скелетной мускулатуре и сердце. ¬ клинико-лабораторной практике определение креатинкиназы провод€т при заболевани€х мышц. Ћюбые формы миопатий сопровождаютс€ значительным повышением креатинкиназы в сыворотке крови. ћожет использоватьс€ дл€ диагностики инфаркта миокарда у свиней, паралитической миоглобинурии у лошадей. —одержание фермента резко возрастает в сыворотке крови у лошадей после больших физических нагрузок.

»сследование белков и небелковых азотистых веществ. Ѕелки сыворотки крови широко используютс€ в клинико-биохимических исследовани€х, так как они тесно св€заны с белковым и другими обменами и несут обширную информацию о состо€нии организма. ¬ зависимости от целей исследовани€ определ€етс€ или общий белок или белковый спектр сыворотки крови или индивидуальные белки.  оличественные изменени€ в содержании белковых фракций и отдельных белков называют диспротеинеми€ми. »х определ€ют чаще всего с помощью различных электрофоретических (в агаре, крахмальном, полиакриламидном геле и др.) или иммунохимических методов (по ћанчини, иммуноэлектрофорез и др.). ќбщий белок определ€ют биуретовым методом, методом Ћоури, спектрофотометрически.

ѕреальбумины. —одержание их резко снижаетс€ при нарушени€х функции печени, опухолевой кахексии, т€желых заболевани€х лимфоидной системы. –езкое возрастание количества преальбуминов наблюдаетс€ при компенсированном, нефротическом синдроме.

јльбумин. ”меньшение концентрации альбумина в плазме €вл€етс€ причиной понижени€ онкотического давлени€ крови и развити€ отеков. –езкое снижение альбумина наблюдаетс€ при шоке. ѕоражение паренхимы печени при различных заболевани€х также может быть причиной уменьшени€ альбумина в сыворотке крови. —нижение альбумина в сыворотке крови наблюдаетс€ при хроническом нефрите, бронхопневмонии порос€т, атрофическом рините свиней, лейкозе крупного рогатого скота, хроническом мастите; повышение Ц при болезни јуески, эхинококкозе овец.

—-реактивный белок в сыворотке крови здоровых животных обычными методами, используемыми в лабораторной практике, не определ€етс€. ѕоэтому считают, что по€вл€етс€ он в крови только при патологических состо€ни€х, сопровождающихс€ воспалением и некрозом тканей. —-реактивный белок в больших количествах по€вл€етс€ в крови в острый период заболевани€, поэтому его иногда называют белком Уострой фазыФ. — переходом заболевани€ в хроническую форму содержание —-реактивного белка в крови резко уменьшаетс€.

÷ерулоплазмин Ц медьсодержащий белок сыворотки крови, он св€зывает 90-95 % меди, наход€щийс€ в ней. ”становлено повышенное содержание церулоплазмина при инфаркте миокарда, злокачественных новообразовани€х, различных заболевани€х печени. ѕри гепатолентикул€рной дегенерации (болезнь ¬ильсона) наблюдаетс€ накопление меди в печени, ведущее к циррозу. —одержание церулоплазмина в крови при этом снижено.

»ммуноглобулин G (IgG). ќсновной компонент гаммаглобулиновой фракции сыворотки крови, на его долю приходитс€ около 80 % иммуноглобулинов. ≈го наличием обусловлена гуморальна€ защита организма от многих бактерий и вирусов, а также их токсинов.

ѕовышение уровн€ поликлональных IgG наблюдаетс€ при хронических воспалительных состо€ни€х: стафилоккоковых инфекци€х, хронически протекающем гепатите, хронически протекающих инфекци€х (туберкулезе, лейкозе, €щуре, хроническом мастите крупного рогатого скота, бронхопневмонии порос€т и др.).

—нижение IgG наблюдаетс€ при различных иммунодефицитах, новообразовани€х лимфатической системы, после удалени€ селезенки, злокачественной анемии. Ќизкие значени€ IgG наблюдаютс€ при врожденной недостаточности гуморального иммунитета.

»ммуноглобулин ћ (Igћ) составл€ет около 5% гаммаглобулиновой фракции.   классу Igћ относ€т антибактериальные антитела, изогемагглютинины, холодовые агглютинины. ќни принимают активное участие в нейтрализации корпускул€рных антигенов-эритроцитов, бактерий, вирусов.

ѕовышение концентрации поликлональных Igћ обнаруживаетс€ при острых воспалительных процессах, остром гепатите, остром и хроническом пиелонефрите, острых и хронических инфекци€х, паразитарных заболевани€х. —нижение уровн€ Igћ наблюдаетс€ при моноклонильных гаммапати€х, агаммаглобулинемии.

»ммуноглобулин ј (Igј). Ќа долю Igј приходитс€ около15 % иммуноглобулинов сыворотки крови. »меютс€ две формы Igј: сывороточный и секреторный. ’арактерно присутствие Igј в молозиве, слюне, носовых и бронхиальных секретах, слизистой оболочке кишечника, где он обуславливает местный иммунитет.

”меньшение уровн€ Igј наблюдаетс€ при различных, приобретенных иммунодефицитах, новообразовани€х лимфатической системы, после удалени€ селезенки, злокачественной анемии. Ќизкие значени€ Igј наблюдаютс€ при врожденной недостаточности гуморального иммунитета.

ѕарапротеинеми€ Ц состо€ние, которое сопровождаетс€ по€влением в сыворотке крови аномального белка, который в норме отсутствует обозначаетс€, обычно, как парапротеинеми€. ѕарапротеины (миеломные белки) по€вл€ютс€ в крови чаще всего при злокачественных заболевани€х лимфоидной системы. ќни €вл€ютс€ гомогенной попул€цией белковых молекул. ќднородность парапротеинов резко отличает их от нормальных антител.

ƒиагностика парапротеинемии основываетс€ на одновременном определении иммуноглобулинов соответствующего класса и иммуноэлектрофорезитическом исследовании сыворотки крови. –езкое увеличение иммуноглобулинов определенного класса (IgG, Igј, Igћ) и искажение иммуно-электрофорезитических линий преципитации указывает на парапротеинемию соответствующего класса.

ѕомимо белков в диагностических цел€х определ€ют также небелковые азотистые компоненты крови, к которым относ€т продукты обмена простых и сложных белков. Ёти компоненты определ€ют часто, как небелковый или остаточный азот. ќстаточным его называют потому, что он остаетс€ в надосадочной жидкости после осаждени€ белков. ’от€ эти определени€ используют часто как синонимы, пон€тие Унебелковый азотФ несколько шире, чем пон€тие УостаточныйФ азот.

ќстаточный азот. ” здоровых животных колебани€ в содержании остаточного азота зависит в основном от количества белка в рационе. Ќизкие показатели остаточного азота в крови могут наблюдатьс€ при неполноценном кормлении, дефиците белка в рационе.

ѕовышение остаточного азота в крови (азотеми€) свидетельствует о нарушении азотистого метаболизма в организме. ”величение остаточного азота в крови в большинстве случаев €вл€етс€ плохим прогностическим признаком. јзотемии в зависимости от причин возникновени€ дел€тс€ на ретенционные и продукционные.

ѕри ретенционной азотемии увеличение азотсодержащих продуктов в крови наступает вследствие нарушени€ выделительной способности почек. Ќаблюдаетс€ она при остром и особенно хроническом нефрите, пиелонефрите, туберкулезе почек и некоторых других заболевани€х. ¬непочечна€ ретенционна€ азотеми€ может развитьс€ на фоне т€желого нарушени€ кровообращени€. ќна может наблюдатьс€ при травматическом шоке, врожденных пороках сердца, преп€тствующих оттоку мочи после ее образовани€ и других заболевани€х.

ѕродукционна€ азотеми€ возникает, как правило, вследствие усиленного распада белка и избыточного поступлени€ азотсодержащих веществ в кровь. ‘ункци€ почек при этом чаще всего не нарушена. ќна наблюдаетс€ при лейкозе, злокачественных новообразовани€х, туберкулезе легких, инфекционных заболевани€х с прогрессирующим течением, сопровождающихс€ лихорадкой, циррозе печени, острой желтой атрофии печени, отравлении гепатотропными €дами. ѕродукционна€ азотеми€ обнаруживаетс€ при острых гнойных воспалени€х подкожной клетчатки, хирургическом шоке, ожогах, перитоните, острой кишечной непроходимости.

¬ клинико-диагностических лаборатори€х остаточный азот чаще всего определ€ют гипобромитным методом.

ћочевина. —одержание мочевины в крови определ€етс€ процессами ее образовани€ и выведени€. «начительное повышение мочевины в крови сопровождаетс€ выраженным клиническим синдромом интоксикации Ц уремией.

ѕри острой почечной недостаточности содержание ее в крови резко возрастает. ћочевина наиболее индикаторный компонент остаточного азота, указывающий на почечную недостаточность, так как именно мочевина в наибольшей степени задерживаетс€ в крови при ухудшении функции почек. ѕоэтому содержание мочевины увеличиваетс€ быстрее остальных компонентов мочи.

ќтношение азота мочевины к остаточному азоту используют дл€ дифференциации патологии печени и почек. ≈сли в норме это соотношение колеблетс€ около 0,5, то при почечной недостаточности оно повышаетс€, а при т€желых поражени€х печени Ц снижаетс€.

ѕовышенное содержание мочевины в крови наблюдаетс€ при высоком содержании белка в рационе, а также при использовании некоторых лекарственных средств: анаболических стероидов, салицилатов, препаратов железа, препаратов, оказывающих нефротоксическое действие.

—нижение мочевины в крови происходит при патологии печени, сопровождающейс€ глубокими дистрофическими изменени€ми, отравлении фосфором, мышь€ком, декомпенсированном циррозе, голодании.

ƒл€ определени€ используютс€ ферментативные (уреазные) и многочисленные неферментативные методы. –азличными фирмами предлагаютс€ наборы реагентов, позвол€ющие работать по тому или иному методу. Ѕыстрыми и простыми в выполнении €вл€ютс€ потенциометрические методы с использованием ионоселективных электродов. ƒл€ полуколичественного определени€ можно использовать УсухойФ анализ с использованием диагностических тест-полосок.

 реатин и креатинин Ц компоненты остаточного азота. —интез креатина происходит в основном в печени и почках, с током крови он поступает в мышечную ткань, где происходит его фосфорилирование и превращение в макроэрг-креатинфосфат. ѕосле разрушени€ последнего образуетс€ креатинин.

”величение креатина в крови наблюдаетс€ при поражении скелетной мускулатуры, мышечных дистрофи€х, больших оперативных вмешательствах, гипертиреозе, инфекци€х, сопровождающихс€ лихорадочными состо€ни€ми.

ѕовышение содержани€ креатинина в крови может быть обусловлено, как задержкой этого метаболита в организме, так и усиленным его образованием.

–етенционна€ креатининеми€ наблюдаетс€ при нарушении функции почек. ќбычно увеличение креатинина в крови рассматривают, как ранний признак почечной недостаточности.

ѕродукционна€ креатининеми€ отмечаетс€ при резко выраженном нарушении функций печени, кишечной непроходимости, лихорадочных состо€ни€х, сердечно-сосудистой недостаточности, голодании, усиленной мышечной работе, гипертиреозе, гиперфункции надпочечников, сахарном диабете.

ƒл€ определени€ креатинина используют неферментативные методы, чаще всего колориметрические, основывающиес€ на реакции яффе, а также ферментативные, обычно с использованием фермента креатинфосфокиназы. ƒл€ проведени€ исследований выпускаютс€ готовые диагностические наборы.

јммиак Ц конечный продукт распада белка, входит в состав фракции остаточного азота. јммиак сильно токсичен, особенно чувствительны к нему клетки центральной нервной системы.

”величение аммиака в крови наблюдаетс€ при острой печеночной недостаточности, жировой дистрофии печени, острой почечной недостаточности, кишечном и рубцовом дисбактериозе, нарушении руменогепатической циркул€ции азота. јммиак, накапливающийс€ в крови при т€желых паренхиматозных поражени€х печени, €вл€етс€ одним из патологических факторов, привод€щих к развитию печеночной комы.

”величение аммиака в крови наблюдаетс€ при врожденных энзимопати€х в случае дефектов синтеза ферментов орнитинового цикла.

ƒл€ определени€ аммиака используютс€ титриметрические, потенциометрические и ферментативные методы. ¬ыпускаютс€ соответствующие диагностические наборы.

ћочева€ кислота €вл€етс€ конечным продуктом обмена пуриновых оснований у человекообразных обезь€н, свиней и птиц. ” остальных млекопитающих мочева€ кислота окисл€етс€ до аллантоина.

”величение мочевой кислоты в крови наблюдаетс€ при патологических состо€ни€х, св€занных с усиленным распадом клеток, нарушением выделени€ мочевой кислоты с мочой, нарушением эндокринной регул€ции обмена пуриновых оснований.

ћочева€ кислота плохо растворимое в воде соединение. ѕри повышении содержани€ ее в крови она может оказыватьс€ в ткан€х в виде соответствующих солей (уратов натри€).

ѕовышение содержани€ мочевой кислоты в крови наблюдаетс€ при заболевани€х почек, гемоглобинопати€х, пернициозной анемии, лейкозах, функциональной недостаточности печени, ожирении, отравлении свинцом, угарным газом.

ƒл€ определени€ мочевой кислоты используютс€ химические методы с колориметрическим окончанием, спектрофотометрические, основанные на абсорбции мочевой кислоты при 293 нм и энзиматические.

Ѕилирубин Ц продукт распада гемоглобина. —читаетс€, что при распаде 1 г гемоглобина образуетс€ 34 мг билирубина. –азличают свободный, неконъюгированный, Унепр€мойФ билирубин (дающий непр€мую реакцию с диазореактивом) и св€занный, конъюгированный (с глюкуроновой кислотой) Упр€мойФ билирубин. ѕри паренхиматозной желтухе в крови увеличиваетс€ в основном конъюгированный билирубин и в меньшей степени Ц свободный.

ѕри обтурационной (застойной, механической, холестатической) желтухе в крови увеличиваетс€, главным образом, св€занный билирубин. ѕри т€желых формах застойных желтух несколько повышаетс€ содержание и свободного билирубина.

ѕри гемолитической желтухе, обусловленной усиленным распадом эритроцитов, в крови резко увеличиваетс€ содержание свободного билирубина.

 роме этих широко известных в клинической практике патологических состо€ний, гипербилирубинеми€ может наблюдатьс€ при врожденных или приобретенных нарушени€х систем, отвечающих за метаболизм и удаление билирубина из организма. „аще всего это обусловлено дефектом соответствующих ферментов. ƒл€ определени€ билирубина в крови используют колориметрические, спектрофотометрические, флюориметрические методы. Ќаиболее широко в клинико-биохимических исследовани€х используетс€ колориметрический метод …ендрашика- леггорна-√рофа.

”величение содержани€ непр€мого билирубина в сыворотке крови наблюдаетс€ при некоторых кровепаразитарных заболевани€х (пироплазмоз, нутталлиоз и др.), инфекционных (инфлюэнца, петехиальна€ гор€чка и др.), при отравлении гемолитическими €дами (куколь, солонин).

”величение обеих фракций наблюдаетс€ при поражении печени факторами инфекционного и токсического характера: при инфекционной анемии, мыте, лептоспирозе, отравлении фосфором и др.

»сследование гормонов и медиаторов.   гормонам относ€т биологически активные вещества, вырабатываемые в железах внутренней секреции, а также в специализированных клетках ÷Ќ—, почек, хориона, слизистой желудочно-кишечного тракта и др. ќтдельно выдел€ют тканевые гормоны, оказывающие действие по месту выработки. ƒл€ гормонов характерно очень низкое содержание их в крови (10-9-10- 6 моль/л).

»сследование гормонов в клинике используетс€ в цел€х диагностики первичных поражений эндокринных желез, оценки состо€ни€ органов нейрогуморальной регул€ции, при острых и хронических заболевани€х, дл€ изучени€ действи€ лечебных меропри€тий на состо€ние регул€ции.

” сельскохоз€йственных животных определение гормонов проводилось разными методами в различных возрастных группах, у животных, наход€щихс€ в разном физиологическом состо€нии и содержащихс€ в различных услови€х. ѕоэтому приведенные ниже количественные данные, следует воспринимать как ориентировочные.  ажда€ лаборатори€ должна отработать свои референтные данные с учетом используемого метода и контингента животных.

 ортикоидные гормоны (кортикоиды, кортикостероны, кортикостероиды.). √ормоны коры надпочечников, 70-80 % кортикоидов, секретируемых надпочечниками, приходитс€ на долю кортикостерона, 17 Ц окси-кортикостерона и кортизола, на долю альдостерона приходитс€ 2-5 %.

ѕри исследовании кортикостероидов используют обычно кровь и мочу. ѕри исследовании крови, наход€щиес€ в ней гормоны предварительно экстрагируют, а затем количественно определ€ют с использованием колориметрических или флюориметрических методов.

ѕри определении отдельных кортикостероидов широко примен€ютс€ радиоиммунологические и иммуноферментные методы, с использованием соответствующих диагностических наборов.  онтроль за содержанием кортикостероидов в крови необходим в случае определени€ функции коры надпочечников и также при введении стероидных препаратов.

”величение кортикостероидов в крови наблюдаетс€ при т€желой работе, нервном возбуждении, стрессах.

 ортизол Ц основной представитель глюкокортикоидов, содержание его в крови сельскохоз€йственных животных составл€ет 45 Ц 350 нмоль/л.

ѕовышение кортизола в крови происходит при карциноме надпочечников, злокачественных новообразовани€х легких, поджелудочной железы, тимуса, при острых инфекци€х, лечении эстрогенами, сахарном некомпенсированном диабете.

”меньшение содержани€ кортизола в крови наблюдаетс€ при гипофункции гипофиза, гипотиреозе, дефиците ферментов, участвующих в биосинтезе кортизола, хроническом гепатите, циррозе печени.

ѕри хронических гепатитах, циррозе печени, остеоартрите, хронической почечной недостаточности резко снижено содержание конъюгированных 17-оксикортикостероидов. ќтмечено резкое увеличение 17-оксикортикостерона при раке коры надпочечников.

јльдостерон Ц основной представитель минералкортикоидов. —одержание альдостерона колеблетс€ в довольно широких пределах, зависит от возраста, физиологического состо€ни€, положени€ (лежа, сто€) и других факторов, ориентировочно 0,5 Ц 5 нмоль/л.

”меньшение альдостерона в крови происходит при общей надпочечниковой недостаточности, гипофункции гипофиза, врожденном или приобретенном нарушении биосинтеза альдостерона, под вли€нием введени€ гепарина, препаратов, блокирующих адренергическую систему.

”величение альдостерона имеет место при опухоли клубочкового сло€ коры надпочечников, гиперплазии коры надпочечников, патологии внутренних органов, сопровождающихс€ гипертонией и отеками.

¬ моче определ€ют, обычно, предшественники кортикостероидов, составл€ющих фракцию 17-кетостероидов (17 Ц  —). ƒл€ определени€ 17 Ц  — в моче используютс€ в основном химические методы, основанные на цветной реакции между метаболитами гормонов и метадинитробензолом. ѕри определении отдельных компонентов, вход€щих в эту фракцию используют методы тонкослойной, распределительной, газожидкостной хроматографии. –езкое увеличение выделени€ 17 Ц  — с мочой происходит при опухол€х €ичка, андрогенной опухоли €ичника, раке надпочечников, врожденной или приобретенной гиперплазии надпочечников.

—нижение 17- — в моче наблюдаетс€ при гипотиреозе, т€желых формах поражени€ печени, нефротическом синдроме, истощении.

√ормоны мозгового сло€ надпочечников.   гормонам мозгового сло€ надпочечников (катехоламинам) относ€тс€ адреналин, норадреналин, дофамин.

¬ св€зи с низким содержанием катехоламинов в крови и их быстрым удалением из кровотока дл€ диагностических целей чаще провод€т их определение в моче. ѕри здоровых почках исследование мочи позвол€ет судить о характере функционировани€ мозгового сло€ надпочечников не хуже, чем исследование крови.

—уточна€ экскреци€ катехоламинов с мочой колеблетс€ в довольно широких пределах и составл€ет дл€ адреналина от 10 до 50 нмоль/сут., норадреналина Ц от 20 до 150 нмоль/сут., дофамина 530 -2100 нмоль/сут.

ƒл€ определени€ катехоламинов используют биологические, хроматографические, флюориметрические и радиоизотопные методы исследовани€. ’от€ радиоэнзиматические методы отличаютс€ высокой чувствительностью, однако из-за р€да технических трудностей и дефицита некоторых реагентов, в клинико-биохимических исследовани€х наиболее часто используютс€ флюориметрические методы.

ѕри сборе материала следует прин€ть меры дл€ стабилизации катехоламинов (кровь Ц охладить, мочу Ц подкислить). ƒл€ выделени€ и очистки катехоламинов используют хроматографию с последующим превращением элюированных катехоламинов во флюоресцирующие продукты.

ѕомимо самих катехоламинов в диагностических цел€х провод€т определени€ в моче продуктов их метаболизма Ц ванилинминдальную кислоту (¬ћ ), гомованилиновую кислоту (√¬ ). ƒл€ фракционировани€ и определени€ этих метаболитов широко используетс€ высоковольтный электрофорез и тонкослойна€ хроматографи€.

”величение адреналина, норадреналина, дофамина в крови и моче и ванилинминдальной и гомованилиновой кислот в моче происходит при опухол€х мозгового вещества надпочечников, в острый период инфаркта миокарда, гепатитах и циррозах печени, обострении €звенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, нарушении экскреторной функции почек.

”ровень содержани€ катехоламинов в крови и моче снижаетс€ при остропротекающих инфекци€х, остром лейкозе, коллагенозе, гипофункции надпочечников.

Ќаибольшее клиническое значение имеет определение катехоламинов при катехолсекретирующих опухол€х хромаффинной ткани (феохромацитомах, параганглиомах, нейробластомах), при которых их содержание в крови и моче резко увеличено.

√ормоны щитовидной железы. ќсновными гормонами щитовидной железы €вл€ютс€ тироксин (тетрайодтиранин,“4 и трийодтиранин,“3). —екретируемые в плазму гормоны св€зываютс€ с тироксинсв€зывающим глобулином (“—√), который по электрофоретической подвижности относитс€ к a- глобулинам, а также с тироксинсв€зывающим преальбумином (“—ѕј). Ќеобходимо иметь в виду, что при нарушении синтеза этих белков или их транспортной функции определение “3 и “4, не будут давать представление о функциональной активности щитовидной железы.

“иреоглобулин, наход€щийс€ в фолликулах щитовидной железы не €вл€етс€ гормоном, так как в обычных услови€х он не секретируетс€ в кровь. ќднако, при тиреоидитах, онкологических заболевани€х щитовидной железы он может попадать в кровь и вызывать образование соответствующих антител.

¬ насто€щее врем€ клинико-биохимическа€ диагностика патологии щитовидной железы основываетс€ на использовании радиоиммунологических и иммуноферментных методов определени€ “3,“4, тиреоглобулина, антител к нему, а также тиреотропного гормона (““√).

“иреоглобулин Ц гликопротеин с молекул€рной массой около 650000 в нормальной сыворотке крови, обычно не определ€етс€. ”величение тиреоглобулина наблюдаетс€ при тиреоидите, диффузном токсическом зобе, раке щитовидной железы. ¬ клинической практике определение тиреоглобулина используетс€ в основном в качестве маркера новообразований в ткан€х щитовидной железы. ѕомимо тиреоглобулина при тех же показани€х определ€ют антитела к нему.

“ироксинсв€зывающий глобулин (“—√) Ц специфический белок сыворотки крови, св€зывающий и транспортирующий гормоны щитовидной железы. ќдна молекула “—√ св€зывает одну молекулу “3 и одну молекулу “4.  онцентраци€ “—√ в крови пр€мо св€зана с продукцией тиреоидных гормонов. “ак как метаболически активными €вл€ютс€ только свободные гормоны, то дл€ оценки функции щитовидной железы необходимо определ€ть и концентрацию “—√. ќриентировочное содержание “—√ в крови Ц 15 Ц 45 мг/л.

ќбычно “—√ определ€ют одновременно с “4 и рассчитывают коэффициент “4/“—√. ѕри гипотиреозе этот коэффициент уменьшаетс€, при гипертиреозе - увеличиваетс€.

ѕовышение содержани€ “—√ в крови происходит при беременности, инфекционном гепатите, наследственно детермированном повышении биосинтеза этого белка. ”меньшение содержани€ “—√ в крови наблюдаетс€ при нефротическом синдроме, циррозе печени, наследственно обусловленном дефиците, акромегалии.

√истамин Ц биогенный амин, участвующий в нейрогуморальной регул€ции тонуса кровеносных сосудов и органов с гладкой мускулатурой, повышает проницаемость капилл€ров, усиливает секрецию пищеварительных желез.

ћетоды определени€ гистамина включают его экстракцию с последующим количественным определением. ’имические методы определени€ основаны на взаимодействии некоторых его функциональных группировок с определенными реагентами. Ќаиболее часто в клинико-биохимических исследовани€х используютс€ флюориметрические методы. ¬ последнее врем€ дл€ определени€ гистамина используютс€ методы »‘ј. —одержание гистамина в цельной крови составл€ет от 0,2 до 0,9 мкмоль/л.

”величение гистамина в крови наблюдаетс€ при аллергических процессах, гипоксии, травмах, переохлаждении и перегревании, хроническом миелоидном лейкозе, €звенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, рентгеновском облучении, проникающей радиации. ѕовышение уровн€ гистамина в крови имеет место при гепатитах, циррозе печени, что, возможно, обуславливает аллергические про€влени€ при этих заболевани€х.

»сследование минеральных веществ. Ќарушение обмена минеральных веществ ведет к разнообразным патологическим состо€ни€м. Ёто обусловлено множественностью функций, которые макро- и микроэлементы выполн€ют в организме. ѕолноценное минеральное питание в соответствии с разработанными нормами Ц необходимое условие нормального функционировани€ всех органов и систем организма животных.

ѕоэтому необходим оперативный контроль за состо€нием минерального обмена, направленный на обнаружение несоответстви€ поступлени€ минеральных веществ в организм, его физиологическим потребност€м и вы€влению самых ранних предклинических стадий нарушени€ минерального обмена. ѕри этом необходимо иметь в виду, что объективно оценивать состо€ние минерального обмена чаще всего можно лишь при комплексном изучении большого числа элементов, так как их обмен тесно св€зан между собой. Ќаиболее часто дл€ этих целей исследуют содержание минеральных веществ в сыворотке крови.

»сследование минеральных компонентов крови ведетс€ либо химически методами, либо методами пламенной фотометрии.

ќднако, химические методы более трудоемкие и в тех случа€х, когда приходитс€ определ€ть одновременно несколько макро- и микроэлементов, требуют больших затрат времени. ѕоэтому все чаще используютс€ методы пламенной фотометрии.

ѕламенна€ фотометри€ основана на излучении (эмиссионный метод) или поглощении (абсорбционный метод) света атомами веществ, испар€емых в пламени. —ущность метода заключаетс€ в том, что раствор анализируемого вещества в распыленном виде подаетс€ в плам€ газовой горелки, где происходит его испарение. јтомы анализируемого вещества поглощают свет стандартного источника или сами испускают его.  оличество испускаемого или поглощенного света при определенных услови€х пропорционально числу возбужденных атомов.

ѕламенна€ фотометри€ в виде эмиссионного метода при анализе крови чаще всего используетс€ дл€ определени€ содержани€ натри€, кали€, кальци€, лити€. ƒл€ определени€ интенсивности излучени€ используют пламенные фотометры различных марок, работа с которыми проводитс€ в соответствии с прилагаемой инструкцией.

ѕри работе с биологическим материалом, озоление необходимо проводить очень осторожно, чтобы не потер€ть и определ€емые элементы. ѕоэтому сжигание провод€т при возможно более низких температурах, использу€, как правило, мокрое озоление с применением перекиси водорода, серной кислоты и других окислителей. ¬следствие нестабильности пламени газовой горелки каждое исследование повтор€ют не менее 2-3 раз. ƒл€ количественного расчета используют метод калибровочных графиков, которые стро€т по серии стандартных смесей.

Ўирокое распространение получил абсорбционный метод фотометрии. ¬ этом варианте атомы исследуемого металла, наход€щегос€ в виде атомного пара, поглощают свет определенной длины волны. »нтенсивность света, прошедшего через плам€ регистрируетс€ фотодетектором. »спользование современных атомно-абсорбционных спектрофотометров позвол€ет определ€ть большое количество различных элементов с относительной ошибкой 2-4%.

Ќатрий.ѕри недостатке натри€ у скота наблюдаетс€ р€д патологических симптомов (огрубение шерстного покрова, извращение аппетита, нерегул€рна€ охота, бесплодие). —нижаетс€ продуктивность, ухудшаетс€ использование протеина корма, нарушаютс€ процессы рубцового метаболизма. Ќедостаточность натри€ может быть св€зана с избытком кали€ в рационе, так как при этом резко возрастает выведение натри€ с мочой. ”величение содержани€ натри€ в крови (гипернатриеми€) наблюдаетс€ при повышенном диурезе, гиперфункции коры надпочечников, чрезмерном поступлении хлорида натри€ с кормом. ”меньшение содержани€ натри€ в крови (гипонатриеми€) может иметь место при недостаточном его поступлении, чрезмерном выведении с почками при поносах.

 алий. ƒефицита кали€ в рационах сельскохоз€йственных животных практически не бывает. ѕри содержании животных на синтетической диете с недостатком кали€ наблюдаетс€ замедленный рост, атакси€, атони€ кишечника, нарушение сердечной де€тельности. »збыточное поступление кали€ с травой рассматриваетс€ как один из этиологических факторов пастбищной тетании. ”величение содержани€ кали€ в крови (гиперкалиеми€) установлена при повышенном поступлении кали€ с кормом, распаде клеток и тканей (гемолитическа€ анеми€, некрозы), почечной недостаточности, гиперфункции коры надпочечников. ѕричиной гипокалиемии (уменьшение содержани€ кали€ в крови) может быть недостаточное поступление кали€ с кормом, усиленное выведение его с мочой, при поносах, метаболическом алкалозе и ацидозе, парентеральном введении хлорида натри€ и глюкозы.

 альций. ќсновной физиологической формой кальци€ в организме €вл€етс€ ионизированна€ форма.  оличество ионизированного кальци€ зависит от рЌ крови. ѕри повышении рЌ усиливаетс€ св€зывание кальци€ с белками и содержание ионизированного кальци€ уменьшаетс€. ѕоэтому при алкалозах может развитьс€ тетани€ даже при достаточном содержании общего кальци€ в крови. ѕри хронических ацидозах повышаетс€ растворимость солей костной ткани, и кальций тер€етс€ организмом. ѕоэтому даже при нормальном содержании солей кальци€ в рационе и функционировании паращитовидных желез может развиватьс€ остеомал€ци€. Ќедостаток кальци€ в рационах сельскохоз€йственных животных ведет к разнообразной патологии (рахит, остеомал€ци€, остеопороз, родильный парез). ѕри этих заболевани€х наблюдаетс€ уменьшение содержани€ общего кальци€ в сыворотке крови (гипокальциеми€). —нижение содержани€ кальци€ в крови наблюдаетс€ также при тетании, хронических заболевани€х почек, лейкозе, бронхопневмонии, контагиозной плевропневмонии. ”величение содержани€ кальци€ в крови (гиперкальциеми€) может быть алиментарного происхождени€, после приема кормов с большим содержанием кальци€, а также наблюдаетс€ при р€де патологических состо€ний - гипервитаминозе ƒ1, деформирующем артрите, гиперфункции паращитовидных желез, перитоните, желтухе. ѕовышение содержани€ кальци€ в крови наблюдаетс€ иногда при острых панкреатитах, нарушении эндокринной регул€ции минерального обмена.

ћагний. ѕри недостатке магни€ в рационах жвачных наблюдаетс€ т€желое заболевание Ц гипомагниеми€ или трав€на€ (пастбищна€) тетани€. ’от€ это заболевание может быть предупреждено или излечено введением солей магни€, считают, что оно вызываетс€ не только недостатком магни€, но и дисбалансом других элементов (в частности кали€). ”величение содержани€ магни€ в сыворотке крови наблюдаетс€ при введении животным повышенных доз препаратов, содержащих магний, при отравлении щавелевой кислотой и ее сол€ми, болезн€х печени, почечной недостаточности. —нижение содержани€ магни€ в крови может быть при пастбищной тетании у жвачных, клонико-тонических судорогах у порос€т, поносах, белково-минеральном голодании, фтористой интоксикации, а также при избыточном поступлении в организм азота с концентрированными кормами.

‘осфор. Ќедостаток фосфора у молодых животных ведет к возникновению рахита. ƒефицит фосфора в корме €вл€етс€ одной из основных причин алиментарной дистрофии, котора€ наблюдаетс€ у всех видов сельскохоз€йственных животных. ќбмен фосфора в организме тесно св€зан с обменом кальци€. Ёти элементы взаимодействуют в пищеварительном тракте, в системе кость Ц кровь, в м€гких ткан€х и регулируютс€ по сути дела одними и теми же механизмами. ”величение содержани€ фосфора в крови (гиперфосфатеми€) наблюдаетс€ при высококонцентратном типе кормлени€, гипервитаминозе ƒ1, почечной недостаточности, желтой атрофии печени, при интенсивной мышечной работе, в период заживлени€ костных переломов. √иперфосфатеми€ при нефритах и нефрозах указывает на неблагопри€тное течение болезни. √ипофосфатеми€ (понижение содержани€ неорганического фосфора в крови) наблюдаетс€ при рахите, остеомал€ции, при нарушении всасывани€ фосфатов в кишечнике, избытке кальци€ в рационе, гиповитаминозе ƒ.

∆елезо. ѕри недостатке железа в организме развиваетс€ анеми€. Ќаиболее часто железодефицитна€ анеми€ наблюдаетс€ у порос€т, особенно в подсосный период, так как запасы железа у них практически отсутствуют, а молоко свиноматок бедно железом. јнемии, св€занные с недостатком железа, отмечаютс€ и у других видов животных Ц тел€т, €гн€т и у кур в период высокой €йценоскости. ќ состо€нии обмена железа и его запасах в организме суд€т по содержанию его в крови и по степени насыщенности трансферрина железом. ”меньшение содержани€ железа в сыворотке крови наблюдаетс€ при гнойных септических инфекци€х. —одержание железа в сыворотке крови Ц важный показатель, характеризующий эффективность лечени€ животных с железодефицитной анемией. ¬ысокое содержание железа в сыворотке возможно при избытке его в кормах, при нарушении механизма его использовани€ (например, нарушение образовани€ ферритина при некоторых заболевани€х печени), а также при анеми€х, св€занных с нарушением эритропоэза.

ћедь. ћедь участвует в процессах кроветворени€. ћобилизаци€ внутриклеточных резервов железа и его поступление в плазму регулируетс€ медьсодержащим белком церулоплазмином. ћедь способствует включению железа в структуру гема и способствует созреванию эритроцитов на ранних стади€х развити€. ѕри недостатке меди в рационе в зависимости от вида и возраста животных в организме развиваютс€ разнообразные нарушени€. Ќаиболее характерными €вл€ютс€ анеми€, нарушение роста и развити€, остеопороз. ћогут наблюдатьс€ поносы, истощение, огрубение и депигментаци€ волос€ного покрова, демиелинизаци€ головного и спинного мозга, двигательные расстройства и спастические параличи. ƒиагностическую ценность при гипокупрозах имеет исследование меди и церулоплазмина в крови, содержание которых снижаетс€.

÷инк. ѕри дефиците цинка в рационе или нарушении его всасывани€ в кишечнике могут наблюдатьс€ €влени€ цинковой недостаточности. ” свиней при недостатке цинка возникает заболевание паракератоз, характеризующеес€ сморщиванием и утолщением кожи, по€влением сыпи, струпьев, укорочением и утолщением костей. ” свиноматок удлин€ютс€ сроки супоросности, чаще наблюдаютс€ патологические роды и послеродовые осложнени€, у хр€ков наблюдаетс€ дистрофи€ семенников. ” коров при дефиците цинка наблюдаетс€ увеличение эмбриональной смертности, угнетение половой охоты, течки. ѕри этом отмечено снижение пролактина и простагландина PGF2. ѕри диагностике недостаточности цинка учитываетс€ количество его в органах и ткан€х. —нижение содержани€ в сыворотке крови указывает на недостаток его в организме. ƒл€ прижизненной диагностики недостаточности цинка предложен также ферментативный тест. ”величение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови более чем в 2 раза после внутривенного введени€ цинка в дозе 2-3 мг/кг живой массы свидетельствует о недостаточной обеспеченности организма цинком.

 обальт. Ќаиболее чувствительны к недостатку кобальта крупный рогатый скот и овцы. ѕри недостатке кобальта в почвах и растени€х у них возникает характерное заболевание, известное под названием гипокобальтоз, энзоотический маразм, сухотка, солева€ болезнь. «аболевание отмечают в биогеохимических провинци€х, где содержание кобальта в траве ниже 0,2 мг/кг. —нижение содержани€ кобальта в крови и витамина ¬12 в крови и печени указывает на кобальтовую недостаточность. ≈сли количество кобальта в содержимом рубца падает ниже 20 мкг/л, то синтез витамина ¬12 бактери€ми ингибируетс€.

…од. Ѕиогеохимические провинции с недостатком йода встречаютс€ довольно часто, что обуславливает широкое распространение такого заболевани€, как эндемический зоб. Ќаиболее чувствительным €вл€етс€ молодн€к животных, что может быть следствием дефицита йода в рационах беременных маток. ќсновным показателем обеспеченности животных йодом €вл€етс€ концентраци€ гормонов щитовидной железы в крови или белково-св€занного йода. ƒефицит йода может быть вторичным при скармливании животным соевых бобов, гороха, белого клевера, капусты. ¬ них содержитс€ большое количество так называемых зобогенных, йоддепрессивных веществ, которые преп€тствуют св€зыванию свободного йода в щитовидной железе.

—елен. ” животных установлено два вида заболеваний, св€занных с недостатком селена. Ёкссудативный диатез у цыпл€т, излечиваемый как селеном, так и витамином ≈ и беломышечна€ болезнь овец и крупного рогатого скота, излечиваема€ только селеном. ”становлено, что органические соединени€ селена, обладают свойствами антиоксидантов. ќн входит в состав фермента глутатионпероксидазы, функци€ которого заключаетс€ в разрушении гидроперекисей жирных, нуклеиновых кислот и стероидов и превращении их в малотоксичные продукты. ѕри недостатке селена наблюдаетс€ снижение в плазме крови активности фермента глутатионпероксидазы. ѕо изменению активности этого фермента диагностируют дефицит селена в организме.

»сследование липидов. ¬ клинико-биохимических исследовани€х из показателей липидного обмена обычно исследуютс€ холестерин и его фракции, триглицериды, фосфолипиды, свободные жирные кислоты и кетоновые тела.

’олестерин Ц важна€ составна€ часть клеточных мембран и липопротеинов. ¬ организме имеетс€ два типа холестерина Ц свободный, вход€щий в состав мембран, и этерифицированный, вход€щий в состав липопротеинов. Ќарушение обмена холестерина приводит к отложению его в клетках органов и тканей и патологии. ќтложение холестерина в плазматических мембранах клеток приводит к атеросклерозу. ”величение содержани€ общего холестерина в крови наблюдаетс€ при алиментарном бесплодии у коров, гепатите, циррозе печени, хронической почечной недостаточности, гипофункции щитовидной железы, хроническом панкреатите, ожирении, авитаминозах группы ¬. ”меньшение общего холестерина в сыворотке крови наблюдаетс€ при голодании, синдроме жирной печени у крупного рогатого скота, туберкулезе легких, гипертиреозе, анемии, лихорадочных состо€ни€х, обширных ожогах, гнойно-воспалительных процессах. —нижение этерифицированной фракции холестерина указывает на т€желое поражение печени.

’олестерин Ћѕ¬ѕ (’— Ц Ћѕ¬ѕ) Ц холестерин, вход€щий в состав липопротеинов высокой плотности (Ћѕ¬ѕ), транспортируетс€ из клеток сосудистой стенки в печень, т.е. содержание этого холестерина коррелирует с антиатерогенной функцией Ћѕ¬ѕ. —нижение концентрации ’— Ц Ћѕ¬ѕ наблюдаетс€ при атеросклерозе, острых инфекци€х, туберкулезе легких, неспецифических бронхолегочных заболевани€х.

’олестерин ЋѕЌѕ Ц ЋѕќЌѕ (’— Ц ЋѕЌѕ Ц ЋѕќЌѕ) Ц холестерин, вход€щий в состав липопротеинов низкой плотности (ЋѕЌѕ) и липопротеинов очень низкой плотности (ЋѕќЌѕ), способен откладыватьс€ в сосудах и способствовать развитию атеросклероза. ѕоэтому его содержание в крови хорошо коррелирует с атерогенными нарушени€ми в организме.

ѕовышение концентрации ’— Ц ЋѕЌѕ Ц ЋѕќЌѕ наблюдаетс€ при ожирении, заболевани€х печени, нефротическом синдроме, гипотиреозе.

”меньшение концентрации этого холестерина имеет место при голодании, злокачественных новообразовани€х, гиперфункции щитовидной железы, анеми€х, поражении центральной нервной системы.

ћногочисленные методы определени€ ’— Ц Ћѕ¬ѕ базируютс€ на различных способах выделени€ его из сыворотки крови. ѕредложены диагностические наборы, в основу которых положен принцип осаждени€ ЋѕЌѕ и ЋѕќЌѕ различными осадител€ми (фосфорновольфрамовой кислотой, полиэтиленгликолем и др.) с последующим определением ’— Ц Ћѕ¬ѕ. ¬ норме примерно 70 % холестерина плазмы крови находитс€ в составе УатерогенныхФ ЋѕЌѕ и ЋѕќЌѕ и около 30% - в составе УантиатерогенныхФ Ћѕ¬ѕ.

‘осфолипиды Ц группа липидов, содержащих в своем составе фосфорную кислоту, спирт (чаще глицерин), остатки жирных кислот и азотистые основани€. —одержание фосфолипидов в сыворотке крови увеличиваетс€ при холестазе, обтурационной желтухе, билиарном циррозе, хроническом панкреатите, нефротическом синдроме, т€желой форме сахарного диабета, печеночной коме. —нижение фосфолипидов наблюдаетс€ при анеми€х, алиментарной дистрофии, острых лихорадочных состо€ни€х, жировой дегенерации печени, гипертиреозе, циррозе печени, абеталипопротеинемии. ќпределение фосфолипидов основано на определении липидного фосфора или в липидном экстракте (метод Ѕлюра) или после осаждени€ трихлоруксусной кислотой (метод «ильверсмита и ƒэвиса), а также энзиматическим методом. —оответствующие диагностические наборы разработаны и выпускаютс€ различными фирмами.

“риглицериды (триацилглицерины, нейтральные жиры) Ц эфиры трехатомного спирта глицерина и высших жирных кислот. ”величение концентрации нейтральных жиров идет параллельно увеличению ЋѕќЌѕ и хиломикронов. ќно имеет место при хронической почечной недостаточности, нефротическом синдроме, панкреатитах, при ожирении, билиарном циррозе печени, ишемической болезни сердца. —нижение нейтрального жира наблюдаетс€ при голодании, хронических заболевани€х легких, в терминальной стадии поражени€ паренхимы печени, гиперти





ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2016-11-20; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 574 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

¬аше врем€ ограничено, не тратьте его, жив€ чужой жизнью © —тив ƒжобс
==> читать все изречени€...

2011 - | 1981 -


© 2015-2024 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.11 с.