Род включает 10 свободноживущих и паразитических вида; типовой вид – L. interrogans. Выявляются темнопольной микроскопией и несколько хуже – фазовоконтрастной. L. interrogans вид представлен более чем 180 серологическими вариантами. По биологическим свойствам их разделяют на сапрофиты, свободноживущие в пресноводных водоемах, и варианты, патогенные для людей и животных, вызывающие поражения, известные как лептоспирозы.
Лептоспиры микроаэрофилы, температурный оптимум – 30°С; наиболее часто патогенные лептоспиры выращивают на жидких и полужидких средах с добавлением сыворотки кролика (например, среда Ферворта-Вольфа) рост наблюдают на 5–8 сутки инкубирования (иногда на 21–25 сутки).
Лептоспирозы человека и животных выявляют практически повсеместно в самых разнообразных климато-географических и ландшафтных зонах. Заболеваемость также тесно связана с деятельностью человека (сельскохозяйственные работы, скотоводство и т.д.).
Основной резервуар инфекции – различные дикие и домашние животные (более 80 видов), включающие жвачных, хищников, грызунов и рукокрылых. Из домашних животных особенно часто болеют свиньи, крупный рогатый скот; реже – собаки.
Пути передачи. Механизм передачи возбудителя сходен у всех лептоспирозов; основным фактором заражения человека и животных служит вода. Возбудитель сохраняется в почках больного животного и выводится с мочой, которой могут быть загрязнены водоемы, почва, растительность и пищевые продукты. Очаги лептоспироза характеризует определенная полигостальность (множественность хозяев), однако роль разных животных в поддержании очага весьма разнообразна, при непрерывной циркуляции наибольшую зараженность грызунов наблюдают в июле–сентябре, наименьшую – в январе-апреле. Соответственно, у человека пик заболеваемости приходится именно на эти периоды.
Патогенез. В организм лептоспиры проникают через слизистые оболочки носа, рта пищевода (но не желудка, где они обычно погибают), глаз, а также через микротравмы кожных покровов; чаще наблюдают комбинированное заражение (через слизистые оболочки и кожу). Продвигаясь по лимфатическим путям лептоспиры обычно не вызывают развития лимфаденитов (исключая случаи японской семидневной лихорадки с характерным увеличением регионарных лимфатических узлов). Затем возбудитель проникает в кровь и циркулирует в ней, генерализованная лептоспиремия продолжается 4–5 суток со дня заражения и сопровождается избирательной концентрацией возбудителя в почках и печени (5–6 суток). Соответственно, гепаторенальные поражения характерны для всех лептоспирозов и особенно для болезни Васильева-Beйля. Начиная со 2 недель, возбудитель депонируется преимущественно в извитых канальцах почек и исчезает из крови и других тканей.
Лабораторная диагностика. Включает бактериологические и серологические исследования.
Микроскопия крови наиболее эффективна в первые дни заболевания; проводят темнопольную микроскопию либо исследуют мазки, окрашенные по Романовскому-Гимзе. Количество лептоспир, циркулирующих в крови, невелико. Необходимо микроскопировать несколько образцов, либо предварительно отцентрифугировать исследуемый образец (эффективность прямой микроскопии не превышает 10%), более адекватные результаты может дать заражение лабораторных животных или выделение гемокультуры.
Биологическая проба. Проводят внутрибрюшинное заражение морских свинок (массой 150–200 г) 2–3 мл крови, взятой в первые дни заболевания (до появления желтухи), через 48–72 ч проводят микроскопию брюшинного экссудата и крови, а также наблюдают за животными и отмечают повышение температуры тела и появление желтухи. Павших животных подвергают патогистологическому и микроскопическому исследованию.
Выделение гемокультуры проводят в первые 2–4 сутки 8–10 мл венозной крови засевают отдельными порциями на 6–10 пробирок со средой Ферворта-Вольфа. Пробирки энергично встряхивают для предупреждения сворачивания крови, заливают жидким парафином и инкубируют при температуре 28–30°С. Через каждые 4–5 суток культуры исследуют. При отсутствии роста в течение 15–20 суток желательно сделать пересевы на свежую среду. Наиболее часто положительные результаты получают при посевах крови, взятой в 1-2 сутки. Начиная с 4 дня, высеваемость резко падает. На 2–3 неделе возбудитель можно обнаружить в моче и СМЖ, используя все упомянутые методы.
Серологические исследования проводят на 2–3 неделе заболевания, ставят РСК, реакции микроагглютинации и лизиса с сывороткой пациента и стандартным набором микроорганизмов; при положительном результате можно видеть образование клубков из лептоспир (специфичной считают реакцию при титре не ниже 1:400) или возникновение «зернистого» распада бактерий. Реакции необходимо ставить повторно для выявления нарастания титров AT.
В результате самостоятельной работы студент должен знать:
1. Классификацию и характеристику биологических свойств возбудителей сифилиса, боррелиозов, лептоспироза
2. Эпидемиологию, патогенез, восприимчивость и иммунитет при разных спирохетозах: сифилис, боррелеоз, лептоспироз
Уметь:
1. Дифференцировать возбудителей сифилиса, лептоспирозов, боррелиозов по морфологическим признакам в микропрепаратах
2. Интерпретировать результаты серологических реакций при обследовании на сифилис
Схема
