Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


ћетод оценки хемотаксиса нейтрофилов с использованием камеры Ѕойдена

Ќаиболее широко примен€етс€ дл€ оценки хемотаксической активности нейтрофилов метод с использованием камеры Ѕойдена.

ќсновна€ иде€, заложенна€ в конструкцию камеры, заключаетс€ в разделении пористым фильтром в растворе двух реагирующих компонентов: лейкоцитов и факторов, обладающих хемотаксической активностью. ¬ зависимости от исследуемых попул€ций клеток диаметр пор фильтров составл€ет от 3 до 8 мкм. ‘акторы с хемотаксической активностью помещаютс€ в нижнюю камеру и довольно быстро создают концентрационный градиент, распростран€ющийс€ через толщу фильтра. ѕомещенные в верхнюю камеру лейкоциты начинают активную миграцию вдоль градиента и собираютс€ на нижней поверхности фильтра, где можно подсчитать их количество.

ѕодсчет клеток на нижней поверхности фильтра проводитс€ микроскопически; вы€вл€етс€ число клеток, видимых в одном поле при большом увеличении.

Ѕолее надежен радиометрический метод оценки миграционной активности лейкоцитов, когда используютс€ лейкоциты, меченные изотопами 51—г или 90“с. ѕосле постановки реакции измер€ют радиоактивность фильтров. ќднако такой метод требует дополнительного оборудовани€.

 

ќдна из модификаций метода основана на применении двойного фильтра. —уть ее в следующем. Ќиже обычного фильтра помещают целлюлозонитратный фильтр. ¬ результате миграции клетки, прошедшие через верхний пористый фильтр, падают на целлюлозонитратную мембрану. “рудности учета падающих с нижней поверхности фильтров клетки успешно преодолеваютс€ путем использовани€ одиночных поликарбонатных фильтров.

¬ качестве фильтров апробированы самые разнообразные материалы, включа€ целлюлозонитраты, целлюлозные эфиры и поликарбонаты. ¬первые поликарбонаты использовались дл€ изучени€ хемотаксиса клеток перитонеального экссудата у морских свинок, а затем были предложены дл€ измерени€ хемотаксиса моноцитов крови человека. — тех пор фильтры из этого материала получили широкое распространение при постановке реакций по оценке хемотаксической активности моноцитов крови человека. ѕреимущество поликарбонатных фильтров состоит прежде всего в одинаковом размере пор.  роме того, при использовании таких фильтров значительно облегчаетс€ подсчет клеточных элементов, поскольку у мигрирующих клеток не наблюдаетс€ изменений морфологических характеристик, что отнюдь не редкость при применении фильтров из других материалов.



<== предыдуща€ лекци€ | следующа€ лекци€ ==>
ќпределение фагоцитарной активности нейтрофилов и макрофагов | ќсобенности постановки методов оценки хемотаксиса in vitro
ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-02-12; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 296 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

„еловек, которым вам суждено стать Ц это только тот человек, которым вы сами решите стать. © –альф ”олдо Ёмерсон
==> читать все изречени€...

522 - | 527 -


© 2015-2023 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.008 с.