Ћекции.ќрг


ѕоиск:




 атегории:

јстрономи€
Ѕиологи€
√еографи€
ƒругие €зыки
»нтернет
»нформатика
»стори€
 ультура
Ћитература
Ћогика
ћатематика
ћедицина
ћеханика
ќхрана труда
ѕедагогика
ѕолитика
ѕраво
ѕсихологи€
–елиги€
–иторика
—оциологи€
—порт
—троительство
“ехнологи€
“ранспорт
‘изика
‘илософи€
‘инансы
’ими€
Ёкологи€
Ёкономика
Ёлектроника

 

 

 

 


 омплементзависима€ цитотоксичность

ћикролимфоцитотоксический тест. Ётот вариант иммунной цитотоксичности используют в качестве лабораторного теста в трансплантологии дл€ оценки возможного наличи€ в крови реципиента антител к клеточным антигенам предполагаемого донора.

“ест провод€т следующим образом.

1. ” реципиента берут периферическую кровь, получают сыворотку и раскапывают, например, двукратные разведени€ этой сыворотки в лунки планшета.

2. ” донора берут периферическую кровь, выдел€ют из нее лейкоциты или фракцию мононуклеаров (что лучше) и аликвоты клеток, например по 2×105 на лунку, раскапывают в лунки с разведени€ми сыворотки реципиента.

3. ѕланшеты инкубируют в —ќ2-инкубаторе при 37 ∞— в течение 45-60 мин.

 

4. «атем в лунки добавл€ют комплемент (заранее оттитрованную сыворотку кролика или морской свинки).

5. ѕродолжают инкубацию еще 30-45 мин.

6. ѕоврежденные клетки вы€вл€ют по включению суправитального красител€ - трипанового синего, дл€ чего из каждой лунки берут аликвоту клеток, добавл€ют к этой аликвоте 0,5% раствор трипанового синего и в камере √ор€ева подсчитывают число прокрашенных (поврежденных) и непрокрашенных (живых) клеток.

¬ случае если процент поврежденных клеток достоверно превышает таковой в контроле (т.е. в лунках, в которые не вносили сыворотку реципиента), то данный донор получает отвод.

ѕосле внедрени€ в клиническую практику трансплантологии этого теста трансплантологи значительно реже сталкиваютс€ со случа€ми сверхострого отторжени€ трансплантатов.

¬ другом варианте микролимфоцитотоксический тест примен€ют дл€ серологического типировани€ HLA специфичностей. ќсновные этапы теста указаны на рис. 3.2 (см. также цв. вклейку). ¬ качестве  ћ используют выделенные из крови пациента мононуклеарные клетки серотипировани€ HLA специфичностей класса I или очищенную фракцию ¬-клеток, например на колонке со стекл€нной ватой, дл€ тестировани€ специфичностей HLA класса II.  летки инкубируют с панелью стандартных типирующих сывороток и после добавлении€ комплемента определ€ют количество убитых и выживших клеток.

–ис. 3.2. ћикролимфоцитотоксический тест (серотипирование HLA класса I)



<== предыдуща€ лекци€ | следующа€ лекци€ ==>
Ћабораторна€ работа 3-2 | ќпределение фагоцитарной активности нейтрофилов и макрофагов
ѕоделитьс€ с друзь€ми:


ƒата добавлени€: 2015-02-12; ћы поможем в написании ваших работ!; просмотров: 375 | Ќарушение авторских прав


ѕоиск на сайте:

Ћучшие изречени€:

80% успеха - это по€витьс€ в нужном месте в нужное врем€. © ¬уди јллен
==> читать все изречени€...

1964 - | 1816 -


© 2015-2024 lektsii.org -  онтакты - ѕоследнее добавление

√ен: 0.009 с.