Коклюш - острое инфекционное заболевание, характеризующееся цикличностью течения и приступообразным спазматическим кашлем.
Цель занятия: овладеть навыком микробиологической диагностики инфекции.
Знать:
- биологию возбудителей;
- эпидемиологию заболевания;
- лабораторную диагностику.
Уметь:
- интерпретировать результаты лабораторных исследований;
- подобрать препараты для профилактики и терапии коклюша.
Раздел | Вопросы для изучения |
Таксономия | Род Bordetella. Представители патогенные для человека: B.pertussis – возбудитель коклюша, B.parapertusuis – возбудитель паракоклюша. |
Биология возбудителя | Морфологические и тинкториальные свойства: бордетеллы – мелкие, Гр- палочки, неподвижны. Спор, капсул не образуют. Культуральные признаки: B.pertussis нетребовательна к питательным средам. Культивируется на картофельно-глицериновом агаре с кровью (среда Бордс – Жангу) и казеиново-угольном агаре (среда КУА). Рост медленный – 48-72 часа. Колонии мелкие, круглые, блестящие как капельки ртути. Ферментативная активность слабая: не расщепляют белки и углеводы, не восстанавливают нитраты, образуют каталазу. |
Антигенная структура | В структуре B.pertusis выделено 12 антигенов. Основные из них: - агглютиноген, расположен не поверхностно, не токсичен, индуцирует выработку антител, не имеющих защитного значения; - гемагглютинин, агглютинирует эритроциты человека и животных; - протективный – не обладает токсическими свойствами, вызывает синтез защитных антител; - нуклеопротеин – обладает свойствами аллергена. |
Патогенность | Факторы вирулентности: Филаментозный гемагглютинин связывается с гликолипидами мембран клеток мерцательного эпителия дыхательных путей, с R3 - гликопротеиновым рецептором поверхности полиморфно-ядерных лейкоцитов и инициирует фагоцитоз Коклюшный токсин(токсин пертуссин)-S1 - субъединица пертуссина. АДФ - рибозилирует мембранный белок Gi; токе активность фагоцитов и миграцию моноцитов. S2 - субъединица пертуссина, связывается гликолипидом поверхности клеток респираторного тракта; S3 - субъединица пертуссина связывается с ганглиозидами поверхности фагоцитов. Пили-адгезия к мерцательном у эпителию дыхательных путей Пертактин-адгезия к мерцательному эпителию дыхательных путей Аденилатциклаза - подавляет киллинг-активность фагоцитов и миграцию моноцитов. Дерматонекротоксин - повреждает кожу и является летальным фактором для лабораторных животных. Трахеальный токсин - пептидогликановый фрагмент, разрушающий реснитчатые клетки дыхательных путей; стимулирует реализацию интерлейкина-1 (лихорадка). Эндотоксин (липополисахарид) активирует комплемент и стимулирует выработку цитокинов. |
Эпидемиоло-гия, патогенез | Болеют, в основном, дети в возрасте от трех месяцев до 5-7 лет. Источник заражения – больной или носитель. Путь передачи – воздушно-капельный. Патогенез: возбудитель заселяет слизистые дыхательных путей, токсическое действие компонентов его клеток приводит к раздражению нервных рецепторов, спазму мелких бронхов, голосовой щели, сосудов, судорогам скелетных мышц, постоянному раздражению дыхательного центра. |
Микробиоло-гическая диагностика | Методы лабораторной диагностики: а) бактериологический; б) серологический; Взятие материала для бактериологического исследования производят двумя методами: а) методом кашлевых пластинок (открытую чашку Петри с КУА держат во время приступа кашля на расстоянии 10 см от лица ребенка в течении 8-10 кашлевых толчков); б) носоглоточным изогнутым тампоном. Ход бактериологического исследования при коклюше: 1 этап – первичный посев на КУА. 2 этап (через 72 часа) – учет роста, приготовление мазка из подозрительных колоний, постановка реакции агглютинации на стекле с коклюшной и паракоклюшной сыворотками, пересев на скошенный КУА для выделения чистой культуры. Выдается предварительный ответ. При отсутствии роста отрицательный ответ выдается после повторного помещения посева в термостат на 24-48 часов, т.е. на 5 суток. 3 этап (через 5 суток от начала исследования). Изучение чистой культуры и ее идентификация проводится с целью дифференцировки коклюшной и паракоклюшной палочки по следующим тестам: а) изучение подвижности (подвижна B.parapertussis, неподвижна B.pertussis; б) рост на МПА (B.pertussis не растет, B.parapertussis растет); в) рост на среде с тирозином (B.parapertussis дает коричневый пигмент); г) определение уреазной активности (уреазу выделяет только B. parapertussis); д) остановка реакции агглютинации со специфической коклюшной сывороткой (реакция положительная с культурой B. pertussis). В качестве серологических реакций используют: а) реакцию связывания комплемента; б) РПГА (с эритроцитами коклюшным и паракоклюшным диагностикумами); в) РИФ (вспомните правила постановки и учета этих реакций). У переболевших – стойкий антибактериальный иммунитет. |
Специфичес-кая профилактика | Активная иммунопрофилактика коклюша проводится вакцино АКДС (адсорбированная коклюшно-дифтерийная столбнячная вакцина) с 3 месяца (вспомните к какому классу иммунопрепаратов относится АКДС и какой иммунитет формируется). |
Этиотропная терапия | Антибиотики, коклюшный иммуноглобулин. |
Вопросы для обсуждения
1. Общая характеристика и классификация бордетелл.
2. Антигенная структура и факторы патогенности возбудителя коклюша.
3. Источник инфекции, пути передачи, патогенез заболевания.
4. Методы лабораторной диагностики:
а) бактериологический: правило взятия материала, отличия возбудителя
коклюша и паракоклюша;
б) серологический: реакции, применяемые для серологической диагностики
коклюша.
5. Препараты для специфической профилактики и лечения коклюша.