Алкалоиды извлекают в виде солей или в виде оснований.
Alk-соли - В этом случае сырье обрабатывают слабыми растворами органических или минеральных кислот, соли которых хорошо растворимы в воде или спирте. Используют винную, лимонную, уксусную, серную, соляную и другие кислоты.
В извлечениепопадают углеводы, белки и другие сопутствующие вещества.
Alk-основания – В этом случае сырье смачивают концентрированным раствором аммиака. Едкие щелочи не используют, т.к. они образуют феноляты, вызывают гидролиз, изомеризацию алкалоидов.
Раствор аммиака вытесняет алкалоиды-основания из солей.
Алкалоиды-основания извлекают органическим растворителем (эфиром, хлороформом, бензолом и др.). В извлечение попадают воски, каротиноиды, фенольные соединения.
Извлечение проводят многократно новыми порциями до полного истощения. Полученные порции объединяют.
2. Очистка извлечения от балластных веществ.
Обычно проводят путем двух- или трехкратной сменой растворителя. Реже используют ионообменную или адсорбционную хроматографию.
3. Разделение суммы алкалоидов и выделение индивидуальных алкалоидов.
Выполняют в тех случаях, когда оценку качества сырья проводят не по сумме алкалоидов, а по содержанию индивидуального алкалоида, определяющего основное фармакологическое действие сырья.
Разделение основано на различных физико-химических свойствахалкалоидов, извлеченных из сырья:
1) на способности перегоняться с водяным паром.
Например, пахикарпин из суммы алкалоидов травы софоры толстоплодной отделяют путем отгонки его с водяным паром;
2) на различной растворимости алкалоидов в органических растворителях.
Например, колхамин из суммы алкалоидов клубнелуковиц безвременника отделяют, используя его плохую растворимость в ацетоне;
3) на различной растворимости полученных комплексов с общеалкалоидньми реактивами, т.е. используют реакции осаждения.
Например, скополамин из суммы алкалоидов семян дурмана индейского отделяют в виде солей пикриновой кислоты (пикрата).
Для разделения используют также различные виды хроматографии.
4. Собственно количественное определение проводят различными методами:
1) гравиметрический (весовой) метод.
Алкалоиды переводят в весовую форму, осадок отделяют, высушивают, взвешивают.
Этим методом определяют алкалоиды-основания клубнелуковиц безвременника. плауна-баранца; алкалоиды-соли травы крестовника плосколистного, семян дурмана индейского, листьев барбариса;
2) титриметрические методы:
а) ацидиметрического прямого титрования (алкалоиды побегов анабазиса, травы софоры толстоплодной, семян чилибухи);
б) ацидиметрического обратного титрования (алкалоиды листьев и корней красавки, листьев белены, листьев дурмана обыкновенного, травы термопсиса ланцетного, корневищ с корнями чемерицы),
с) для определения алкалоидов чая используют йодометрическийметод обратного титрования;
d) титрование в неводных средах:
- точку эквивалентности определяют, используя индикатор на алкалоиды
(корневища кубышки, травы барвинка малого, клубней с корнями стефании гладкой);
- точку эквивалентности определяют потенциометрически (алкалоиды травы чистотела)
3) физико-химические (инструментальные) методы:
а) фотоэлектроколориметрический метод (алкалоиды коробочек мака снотворного, рожков спорыньи, травы мачка желтого, листьев катарантуса розового, листьев унгернии Виктора, травы крестовника плосколистного, травы софоры толстоплодной, травы паслена дольчатого, клубней с корнями стефании гладкой);
б) спектрофотометрический метод (алкалоиды корней барбариса, семян и травы термопсиса очередноцветкового, травы маклейи, плодов стручкового перца);
с) полярографический метод (алкалоиды семян термопсиса ланцетного, корневищ кубышки желтой).
Так, например, количественное определение алкалоидов группы тропана в листьях красавки, белены, дурманаГосударственная Фармакопея XI (вып.2, ст. 13, 17, 24) предлагает проводить ацидиметрическим методом (вариант обратного титрования).
Метод основан на способности тропановых алкалоидов-оснований образовывать соли под действием кислоты хлористоводородной, т.е. на слабых основных свойствах алкалоидов; избыток кислоты хлористоводородной титруют раствором натрия гидроксида.
При этом, предварительно алкалоиды переводят в форму оснований, извлекают их из сырья эфиром, проводят очистку методом двукратной смены растворителей, удаляют экстрагент и растворяют сухой остаток суммы оснований алкалоидов в кислоте хлористоводородной (НС1), избыток которой оттитровывают щелочью.
Содержание суммы алкалоидов вычисляют в процентах в пересчете на гиосциамин в абсолютно сухом сырье.
Этапы определения:
- подготовительный;
- экстракция из сырья: алкалоиды переводят в форму оснований, извлекают из сырья эфиром без нагревания;
- очистка полученного извлечения: проводят методом двукратной смены растворителей;
- непосредственно количественное определение: удаление экстрагента, растворение сухого остатка суммы оснований алкалоидов в кислоте хлористоводородной (алкалоиды-основания переводят в форму солей); титрование избытка кислоты хлористоводородной натрия гидроксидом;
- расчет результатов по формуле, сопоставление с данными нормативной документации.
Подобное определение рекомендовано и для травы термопсиса ланцетного (ГФ-Х1, вып. 2, ст. 59).
Оценку количественного содержания алкалоидов в семенах чилибухи (ГФ Х, ст.606) проводят ацидиметрическим методом (прямое титрование).
При этом, предварительно алкалоиды переводят в форму оснований, извлекают из сырья эфиром, проводят экстракционную очистку, удаляют экстрагент, растворяют сухой остаток суммы оснований алкалоидов в этаноле и титруют хлористоводородной кислотой (НС1).
Количественное определение алкалоидов в сырье спорыньи проводят
элетроколориметрическим методом (ГФ-Х, ст. 599).