Цветная реакция на фенилмолочную кислоту в моче является первичным скрининг-тестом на фенилкетонурию. По его результату проводиться дальнейшее обследование для уточнения диагноза.
7. Контрольные вопросы по теме занятия (см. задание к занятию).
8. Литература для подготовки (см. задание к занятию).
9. Обсуждено на заседании кафедры 18. 04. 2011 г.
10. Учебное задание подготовлено асс. Голомолзиным Б.В.
ГОУ ВПО «Уральская государственная медицинская академия
Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
кафедра биохимии
Утверждаю
Зав. каф. проф., д.м.н.
Мещанинов В.Н.
_____‘’_____________2011 г
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
К ПРАКТИЧЕСКОМУ ЗАНЯТИЮ № 21
(для студентов)
Факультеты: лечебно-профилактический, медико-профилактический, педиатрический
Курс: 2
1. Тема занятия: Обмен нуклеопротеидов. Биосинтез белка.
2. Учебная цель занятия: Рассмотреть: 1) биохимические механизмы переваривания нуклеиновых кислот и всасывания продуктов в ЖКТ; 2) пути тканевого обмена нуклеотидов, РНК и ДНК; 3) биохимические аспекты биосинтеза белка и его регуляции.
3. Задачи занятия:
1. Повторить: строение, классификацию, свойства и биологическое значение нуклеопротеидов (нуклеиновых кислот, белков хроматина).
2. Изучить биохимические механизмы переваривания нуклеиновых кислот и всасывания продуктов в ЖКТ.
3. Изучить пути тканевого катаболизма и биосинтеза пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов.
4. Самостоятельно ознакомиться с биохимическими механизмами тканевого обмена ДНК и РНК (репликация, транскрипция).
5. Самостоятельно ознакомиться с биохимическими аспектами биосинтеза белка и его регуляции.
6. Провести лабораторную работу по определению мочевой кислоты в сыворотке крови. Дать клинико-диагностическую интерпретацию полученных результатов.
7. Выполнить тест-контроль по разделу: Обмен белков.
4. Продолжительность занятия: 3 акад. часа.
5. Задание студентам:
1. Определить содержание мочевой кислоты в трех пробах сыворотки крови.
6. Методические указания к выполнению самостоятельной работы на занятии.
Работа № 1. Определение мочевой кислоты в сыворотке крови.
Принцип метода: Мочевая кислота – это главный продукт обмена пуриновых нуклеиновых оснований. Определение мочевой кислоты основано на фотоколориметрическом определении окрашенных продуктов, образующихся при восстановлении фосфорно-молибденового реактива Фолина мочевой кислотой. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации мочевой кислоты.
Ход работы: В центрифужную пробирку вносят 1,5 мл сыворотки крови, 1,5 мл воды и 1,5 мл раствора ТХУ. Содержимое перемешивают, выдерживают 30 минут и затем центрифугируют 10 мин при 3000 об/мин. Готовят опытный и стандартный растворы следующего состава:
| Реактивы | Опытный раствор | Стандартный раствор |
| 1. Центрифугат (соответствующий 1,5 мл сыворотки) 2. Стандартный раствор * 3. Раствор трихлоруксусной кислоты 4. Вода 5. Реактив Фолина * | 1,5 мл - - - 1 капля | - 0,5 мл 0,5 мл 0,5 мл 1 капля |
Примечание: * реактивы готовят лаборанты.
Готовые растворы выдерживают при 20˚С 10 мин, при этом развивается окраска. Оба раствора колориметрируют на ФЭКе (зеленый светофильтр, измерение проводят относительно воды).
Расчет проводиться по формуле:
Соп = 0,12 • Доп/Дст мМоль/л,
Где Соп – концентрация мочевой кислоты в сыворотке крови, 0,12 – концентрация стандартного раствора мочевой кислоты, Доп и Дст – оптические плотности соответственно опытного и стандартного растворов.
Рекомендации по оформлению результатов работы и написанию выводов
Результаты работы оформить в виде таблицы:
Определение мочевой кислоты в сыворотке крови
| Норма | Проба №1 | Проба №2 | Проба №3 | |
| Содержание мочевой кислоты, мМоль/л | 0,2-0,5 | |||
| Выводы |
