(для студентов)
Факультеты: лечебно-профилактический, медико-профилактический, педиатрический
Курс: 2
1. Тема занятия: Механизмы переваривания и всасывания белков.
2. Учебная цель занятия: Изучить биохимические механизмы переваривания и всасывания белков.
3. Задачи занятия:
- Изучить роль белка в питании, показатели качества пищевого белка и принципы его нормирования в рационе, азотистый баланс.
- Изучить механизм действия пищеварительных ферментов, механизмы всасывания аминокислот, процесс «гниения» белков в кишечнике.
- Ознакомиться с биохимическими причинами, метаболическими и клиническими последствиями белковой недостаточности и методами ее профилактики.
Дополнительный вопрос для педфака: возрастные особенности переваривания и всасывания белков.
4. Продолжительность занятия: 3 акад. часа.
5. Задание студентам:
1. Определить рН трех образцов желудочного сока.
2. Определить присутствие лактата в трех образцах желудочного сока.
3. Определить кислотность (свободную и связанную соляную кислоту и общую кислотность) в трех образцах желудочного сока.
6. Методические указания к выполнению самостоятельной работы на занятии.
Работа № 1. Определение рН желудочного сока.
Принцип метода: Индикатор Конго в нейтральной и слабо кислой среде имеет красную окраску, а при рН меньше 3-4 меняет ее на синюю. Это происходит только в присутствии сильной соляной кислоты (органические кислоты не снижают рН ниже 4,0).
Ход работы: Одну каплю желудочного сока наносят стеклянной палочкой на красную бумагу Конго. Изменение цвета на синий свидетельствует о присутствии в желудочном соке свободной соляной кислоты. Записать результаты и выводы в таблицу.
Работа № 2. Определение лактата в желудочном соке.
Принцип метода: Качественная реакция на молочную кислоту основана на ее способности образовывать с ионами Fe3+ комплекс желто-зеленого цвета. Эта окраска наиболее четко определяется при проведении реакции с фенолятом железа.
Ход работы:
В пробирку наливают 2-3 мл 1% раствора фенола и добавляют 1-2 капли 3% раствора FeCl3. Образуется сине-фиолетовый фенолят железа. Затем добавляют несколько капель желудочного сока. При наличии в нем лактата окраска становиться желто-зеленой. Записать результаты и выводы в таблицу.
Работа № 3. Определение кислотности желудочного сока.
Принцип метода: Определение кислотности желудочного сока основано на титровании кислореагирующих веществ 0,1 Н раствором NaOH. Титрование в присутствии двух индикаторов позволяет в одной пробе определить свободную HCl, связанную HCl и общую кислотность. Кислотность определяется количеством мл 0,1 Н раствора NaOH, пошедшего на титрование 100 мл желудочного сока (титрационные единицы, Т.Е.). В норме общая кислотность у взрослых составляет 40-60 Т.Е.
Ход работы:
В колбу вносят 5 мл желудочного сока и по 1-2 капли индикаторов: диметилазобензола и фенолфталеина. Титруют 0,1 Н NaOH до оранжевого окрашивания, отмечают количество израсходованного NaOH – это I пункт титрования, он соответствует количеству свободной HCl, которое определяется по формуле:
Свободная HCl = А • 100/5 = 20 • А Т.Е.,
где А – количество мл 0,1 Н NaOH, израсходованного до I пункта.
Далее эту же пробу продолжают титровать до лимонно-желтого окрашивания, отмечают израсходованное количество NaOH от начального пункта – это II пункт титрования. Затем эту же пробу титруют до появления розовой окраски – III – пункт, отмечают израсходованное количество NaOH от начального пункта. Количество NaOH, необходимое для связывания общей HCl равно средне арифметическому количеств NaOH, пошедших на титрование до II и до III пунктов. Поэтому общая HCl рассчитывается по формуле:
Общая HCl = (Б+В)/2 • 100/5 = 10 • (Б+В) Т.Е.,
где Б и В – количества 0,1 Н NaOH, пошедшие на титрования до II и до III пунктов соответственно.
Связанная HCl = Общая HCl – Свободная HCl
Общая кислотность = В • 100/5 = 20 • В Т.Е.
Рекомендации по оформлению результатов работы и написанию выводов
Оформить результаты работы в виде таблицы:
Анализ желудочного сока
| № пробы | |||
| 1. Свободная HCl 2. Общая HCl 3. Связанная HCl 4. Общая кислотность 5. Лактат 6. рН | |||
| Вывод |
