1. Работать с микроскопом следует всегда сидя. Высота табурета или стула должна быть такой, чтобы наблюдатель, сидя прямо, вплотную к столу, мог бы работать без напряжения.
2. С правой стороны от наблюдателя на свободном участке стола должны находиться необходимые инструменты (препаровальные иглы, бритва), предметные и покровные стекла, капельницы с реактивами, альбом для зарисовок.
3. Микроскоп устанавливают прямо перед собой и во время работы не сдвигают. Зеркало микроскопа должно быть направлено к источнику света.
4. Начиная работу, прежде всего, нужно добиться равномерного освещения поля зрения. Для правильного освещения следует:
а) установить фронтальную линзу конденсора на уровне столика микроскопа;
б) отодвинуть кольцо со светофильтром, находящееся под конденсором;
в) полностью открыть диафрагму;
г) установить столиком микроскопа в верхнее положение;
е) для равномерного освещения необходимо поставить на место матовый светофильтр.
5. Положить препарат на столик микроскопа, и наблюдая в окуляр и одновременно опуская предметный столик добиться изображение объекта.
Если микроскоп имеет один окуляр, смотреть в него рекомендуется левым глазом, не закрывая, правый.
6. Прежде чем перейти к работе с большим увеличением, необходимо поставить объект или интересующую часть объекта в центр поля зрения, так как при большом увеличении размер поля зрения сильно сокращается.
7. После этого следует сменить объектив. Для этого, не опуская предметный столик, повертывают револьвер до тех пор, пока объектив большого увеличения не будет установлен строго вертикально относительно столика. О правильной установке объектива судят по легкому щелчку. После смены объектива в микроскопе обычно видно неясное изображение объекта. При отсутствии изображения осторожным движением кремальеры сначала нужно слегка поднять, а затем, если окажется необходимым, опустить предметный столик микроскопа с препаратом. Появившееся неясное изображение фокусируют микрометренным винтом, который можно повертывать не более чем на ½ или ¾ полного оборота. Резкость изображения регулируют с помощью диафрагмы.
8. По окончании работы микроскоп снова переводят на малое увеличение и только после этого снимают препарат с предметного столика.
Уход за микроскопом
При работе с микроскопом необходимо соблюдать следующие правила:
Переносить микроскоп с места хранения на рабочий стол нужно двумя руками: одной рукой берут микроскоп за изгиб дуги, а другой – поддерживают основание.
В случае каких-либо затруднений при обращении с револьвером и другими частями микроскопа не следует применять силу. Необходимо выяснить причины этих затруднений и устранить их (это может сделать преподаватель или квалифицированный мастер).
3. Особенно тщательно нужно следить за чистотой оптической системы микроскопа (осветительного аппарата, объективов, окуляров), предохранять их от механических повреждений (ударов, царапин), соприкосновения с жидкостями, особенно химически активными (кислоты, щелочи, различные растворители), применяемыми в качестве реактивов и сред для приготовления препаратов.
Совершенно недопустимо протирание линз пальцами, бумагой и т. п., так как оптическое стекло можно легко поцарапать. Даже небольшие царапины сильно снижают оптические качества микроскопа. Слегка загрязненные линзы протирают сухой чистой тряпочкой из хлопчатобумажной ткани. Если грязь не удаляется, тряпочку смачивают бензином или смесью спирта с эфиром. Тряпочки для протирания объективов нужно хранить в закрытой банке, чтобы предохранить их от пыли.
4. По окончании работы протирают линзы и столик и, поставив объектив малого увеличения, убирают микроскоп в футляр или шкаф. Микроскоп можно оставить и на столе, обязательно накрыв его чехлом.
Изготовление препаратов
Для изучения клеток или их частей готовят препараты. Иногда для изготовления препаратов можно использовать целые органы – листья растений, споры, пыльцу. Такие препараты называются тотальными.
В большинстве случаев для изготовления препаратов необходимы тонкие срезы органов или тканей. Материал, из которого делают препараты, чаще всего фиксируют в 96%-ном этиловом спирте или 40%-ном формалине. Мягкие ткани при фиксации спиртом уплотняются. Такой материал легче резать. Если объект очень твердый, то после фиксации спиртом его хранят в смеси спирта и глицерина в отношении 3:1, 1:1 или в смеси из равных частей спирта, глицерина и воды.
Срезы делают бритвой или с помощью специальных приборов – микротомов. На лабораторных занятиях срезы обычно делают вручную лезвием безопасной бритвы. Лезвие берут большим и указательным пальцами правой руки, объект – тремя пальцами левой руки. Сначала выравнивают поверхность будущего среза, чтобы она была перпендикулярной продольной оси органа. Затем быстрыми плавными скользящими движениями лезвием в направлении на себя и вправо делают как можно более тонкие срезы. Мягкий, мнущийся материал зажимают между кусочками сердцевины бузины, пробки или пенопласта. При работе руки должны быть свободны, упираться в стол локтями не рекомендуется. Нельзя «пилить» лезвием, т. е. делать несколько коротких движений в разные стороны.
Из срезов можно приготовить как временные, так и постоянные препараты.
Срезы снимают с лезвия кисточкой или препаровальной иглой. Срезы кладут на предметное стекло в воду и при малом увеличении микроскопа отбирают из них лучшие.
На лабораторных занятиях обычно готовят временные препараты, заключая объект в жидкую среду, каплю которой наносят на середину предметного стекла. Предварительно срезы можно обработать тем или иным реактивом. Затем под острым углом к предметному стеклу прикладывают покровное стекло, так чтобы оно касалось жидкости, и осторожно опускают его на предметное стекло. Нельзя опускать покровное стекло резко, так как в этом случае в жидкости, в которую погружен объект, может оказаться много пузырьков воздуха. Если все же пузырьки воздуха попали в препарат, их необходимо удалить, осторожно постукивая кончиком препаровальной иглы по покровному стеклу.
