Методические указания к практическому занятию
По дисциплине ОП.06 Основы микробиологии и иммунологии
для студентов специальности 34.02.01 Сестринское дело
Тема: Выделение чистой культуры. Биохимические свойства.
Цель занятия: изучить этапы выделения чистой культуры; научиться читать биохимические ряды.
После выполнения практической работы студенты должны уметь:
-выделять чистую культуру;
- читать биохимические свойства микроорганизмов.
Студенты должны знать:
- правила работы в микробиологической лаборатории;
- методы посева на питательные среды.
Практическая работа способствует формированию следующих профессиональных компетенций:
ОК- 1. Понимать сущность и социальную значимость своей будущей профессии, проявлять к ней устойчивый интерес;
ОК-3. Принимать решения в стандартных и нестандартных ситуациях и нести за них ответственность.
ОК-4. Осуществлять поиск и использование информации, необходимой для эффективного выполнения профессиональных задач, профессионального и личностного развития.
ОК-6. Работать в коллективе и команде, эффективно общаться с коллегами, руководством.
ПК 2.5. Соблюдать правила использования аппаратуры, оборудования и изделий медицинского назначения в ходе лечебно-диагностического процесса.
План занятия
I. Входной контроль
II. Инструктаж к практической работе. Демонстрация манипуляций по теме.
III. Самостоятельная работа студентов. Оформление дневников по практике
IV. Отчет о проделанной работе. Выходной контроль
Ход занятия.
I. Ответьте на вопросы входного контроля:
1Что вы понимаете под чистой культурой?
2. Что можно определить по ферментативной активности микроорганизмов?
3.Какие среды применяются для определения ферментативной активности микроорганизмов?
II.Инструктаж к практической работе
Используя методические указания, изучите методику выделения чистой культуры и научитесь определять по ферментативной активности вид микроорганизмов.
II I. Самостоятельная работа студентов:
Изучите этапы выделения чистых культур бактерий.
Бактерии-аэробы выращивают в обычных условиях кислородной среды при температуре +370С в термостате.
Чистая культура - это скопление микробов одного вида.
Этапы выделения чистой культуры бактерий:
1 –ый день исследования – получение изолированных колоний. Изучаемый материал микроскопируют и высеивают на плотную среду в чашки Петри. Посевы помещают в термостат на 18-24 ч при температуре +370С.
2-ой день исследования – изучают рост микробов на чашках. Нужную колонию пересевают на скошенный агар. Посевы ставят в термостат на 18-24 часа при температуре +370С.
3-ий день исследования – изучают характер роста на скошенном агаре. Делают мазок, окрашивают его и, убедившись в том, что культура чистая, приступают к ее изучению. На этом выделение чистой культуры заканчивается.
Культура, полученная из мочи, – уринокультура
Культура, полученная из кала, – копрокультура.
Культура, полученная из желчи, - биликультура.
Культура, полученная из крови, - гемокультура.
2. Научитесь определять вид микроорганизмов по ферментативной активности.
По ферментативной активности можно отличить (дифференцировать) один вид микробов от другого. Для этого применяют, например, среды Гисса с углеводами и индикатором. При росте микроорганизмов, расщепляющих углеводы, изменяется цвет среды, а также может появляться газ. Микробы, не ферментирующий данный углевод, растут на среде, не изменяя ее. Наличие газа устанавливают по образованию пузырьков в средах с агаром или по скоплению его в «поплавке» на жидких средах.
При росте на желатиновой среде микробов, ферментирующих желатин, среда разжижается.
При расщеплении пептона могут выделяться индол, сероводород, аммиак. Их образование устанавливают с помощью индикаторных бумажек. Фильтровальную бумагу заранее пропитывают определенными растворами, высушивают, нарезают узкими полосками длиной 5-6 см и после посева культуры на МПБ помещают под пробку между нею и стенкой пробирки. После инкубации в термостате учитывают результат. Аммиак вызывает посинение лакмусовой бумажки; при выделении сероводорода – бумажка чернеет; индол вызывает покраснение бумажки.
Гемолитические свойства (способность разрушать эритроциты) изучаются на средах с кровью. Жидкие среды при этом становятся прозрачными, а на плотных средах вокруг колонии появляется прозрачная зона.
Изучение ферментативной активности микроорганизмов
 | |||||||||||||||
 | | | | | | | |||||||||
лактоза глюкоза сахароза маннит мальтоза индол сероводород желатин
Микроорганизмы, не проявляющие ферментативной активности.
 |  | ||||||||||||||
 | | | | |  |
лактоза глюкоза сахароза маннит мальтоза индол сероводород желатин
Микроорганизмы, проявляющие ферментативную активность
