Ферментативные свойства шигелл

Примечание: К – ферментация углевода до кислоты; ( - ) – отсутствие ферментации или признака

Ферментативная активность определена на жидких средах Гисса. Кроме питательной основы в состав среды добавлен углевод (0,5–1,0%) и индикатор бромкрезолпурпур. Исходный цвет среды фиолетовый. При ферментации углевода до кислоты рН среды сдви­гается в кислую сторону, индикатор становится желтым и вся сре­да желтеет. При отсутствии ферментации среда сохраняет исходный цвет. Для улавливания газа в среду погружены поплавки. Образо­вание сероводорода и индола определяют индикаторными бумажками. При образовании индола индикаторная бумажка, пропитанная насы­щенным раствором щавелевой кислоты, розовеет. При образовании сероводорода индикаторная бумажка, пропитанная уксуснокислым свинцом, чернеет. Если индол и сероводород не образуются, индикаторные бумажки не изменяются.

4. Изучение роста различных микроорганизмов и дизентерийных бактерий на среде Олькеницкого (зарисовать рост шигелл на среде)

Среда Олькеницкого представляет собой комбинированную среду. Она относится к дифференциально-диагностическим средам, со­держит кроме питательной основы 1%лактозы, 1%сахарозы, 1%мо­чевины, 0,1% глюкозы, соль Мора и гипосульфит натрия, индикатор ВР (водный голубой и розоловую кислоту). При посеве на среду Олькеницкого культуры кишечной палочки, которая ферментирует лактозу и глюкозу до кислоты и газа, среда Олькеницкого посинеет в столбике и в скошенной поверхности. Газообразование проявляется разрывами среды пузырьками газа. При посеве протея на среду Олькеницкого, который разлагает мочеви­ну и резко сдвигает рН среды в щелочную сторону, вся среда (и в столбике и скошенная поверхность) становится оранжевой. При посеве шигелл на среду Олькеницкого, которые в первые сутки раз­лагают только глюкозу, среда посинеет в столбике, скошенная по­верхность цвета не изменит.

5. Изучение схемы патогенеза дизентерии (установить связи на схеме 1, оформить протокол):

Схема 1

Схема патогенеза дизентерии

6. Изучение реакции непрямой гемагглютинации (записать схему постановки в тетрадь)

РНГА применяется для обоснования диагноза при стертых фор­мах заболевания, характеризуется большей чувствительностью, чем реакция агглютинации. Ставят реакцию в пробирках или полистироловых пластинах. Сыворотку больного разводят от 1:100 до 1:280. К 0,5 мл каждого разведения сыворотки добавляют по 0,25 мл эритроцитарного диагностикума. Пробирки или пластины встряхивают и помещают на 2–2,5 часа в термостат при 37⁰С. Обязательны контроли диагностикума в физиологическом растворе, и со стандартной сывороткой. Эритроцитарный диагностикум представляет собой 1% взвесь формализированных и сенсибилизированных антигенами из шигелл эритроцитов барана или человека (I группы); учет прово­дят по четырехбальной системе в плюсах:

(++++) – все эритроциты агглютинированы и покрывают дно лунки

равномерно;

(+++) – агглютинированы почти все эритроциты, но на их фоне име­ется малозаметное кольцо из неагглютинированных эритро­цитов;

(++) – наряду с равномерным агглютинатом на дне лунки имеется осадок из неагглютинированных эритроцитов;

(+) – большинство эритроцитов не агглютинировано и осело в ви­де колечка в центре дна лунки

(-) – признаков агглютинации нет. Эритроциты осели в виде пу­говки в центре лунки.